【摘要】：1目的從古代至近代,在臨床上黃芩被分為子芩和枯芩兩種規(guī)格,而現(xiàn)今已不再分別使用。為明確子芩和枯芩分別使用的合理性,本論文分析了兩種規(guī)格飲片的主要活性成分含量以及整體化學(xué)成分的差異;并從抑菌作用、動(dòng)物體內(nèi)藥效分析子芩與枯芩藥效學(xué)差異。為子芩與枯芩兩種規(guī)格的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。2方法與結(jié)果2.1超高效液相色譜法檢測(cè)有效成分含量采用超高效液相色譜法對(duì)10批子芩與枯芩有效成分進(jìn)行含量測(cè)定,分析子芩與枯芩有效成分含量的差異。結(jié)果顯示,與枯芩相比,子芩的黃芩苷和漢黃芩苷含量較高,分別高出28.96%、54.01%;而黃芩素、漢黃芩素、千層紙素A含量則明顯較低,分別低70.46%、44.35%、59.89%。其中10批子芩中黃芩苷與黃芩素比值范圍在15.10-21.07之間;10批枯芩中黃芩苷與黃芩素比值范圍在3.30-4.99之間。2.2子芩與枯芩指紋圖譜差異研究采用超高效液相色譜法建立子芩和枯芩的指紋圖譜,得到12個(gè)共有峰,共有峰面積占總峰面積的比值均大于94.10%,對(duì)10批子芩和10批枯芩的指紋圖譜進(jìn)行主成分分析,選取了兩個(gè)主成分1、2,其總累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為99.59%,在主成分分析得分散點(diǎn)圖中顯示子芩與枯芩分布在不同的區(qū)域。10批子芩中黃芩苷與黃芩素峰面積比值≥10;10批枯芩中黃芩苷與黃芩素峰面積比值3。2.3子芩與枯芩抗菌作用差異研究對(duì)子芩和枯芩分別水提和醇提,采用二倍稀釋法,將各提取物稀釋成0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1g/mL六個(gè)濃度,分別對(duì)肺炎鏈球菌和大腸桿菌的抑菌作用進(jìn)行分析,結(jié)果表明濃度為1g/mL時(shí),醇提物抑菌作用均優(yōu)于水提物(P0.05),其中濃度在0.5g/mL時(shí),醇提物對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌率達(dá)到93%以上,對(duì)大腸桿菌的抑菌率達(dá)到90%以上。且枯芩對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌作用優(yōu)于子芩,其中濃度分別在0.5g/mL和1g/mL時(shí),枯芩醇提物的抑菌率分別為93%、99%;子芩對(duì)大腸桿菌的抑菌作用優(yōu)于枯芩(P0.05),其中濃度在0.5g/mL和1g/mL時(shí),子芩醇提物對(duì)大腸桿菌的抑菌率分別為90%、97%。結(jié)合化學(xué)成分的差異進(jìn)行黃芩苷和黃芩素配伍組抑菌作用的分析,當(dāng)黃芩苷與黃芩素配伍比例在1:1,濃度在1mg/mL時(shí),對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌率達(dá)90%左右,且濃度在2mg/mL時(shí),對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌率達(dá)94%以上,其他配比在不同濃度下均沒(méi)達(dá)到有效抑菌作用;當(dāng)黃芩苷與黃芩素配伍比例在21:1,濃度在2mg/mL時(shí),對(duì)大腸桿菌的抑菌率達(dá)95%左右,其他配比在不同濃度下均沒(méi)達(dá)到有效抑菌作用。2.4子芩與枯芩體內(nèi)藥效學(xué)差異研究以細(xì)菌性肺熱模型大鼠,研究子芩和枯芩的藥效學(xué)差異。結(jié)果表明造模后模型組與空白組相比,體溫升高、肺重系數(shù)增加、血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)和致炎因子均顯著上升(P0.01),說(shuō)明造模成功。當(dāng)給予子芩和枯芩進(jìn)行治療后,大鼠的體溫、肺重系數(shù)、血常規(guī)和致炎因子均有不同程度的下降(P0.01),且模型組肺部病理切片與空白組相比,出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和部分粉紅色均質(zhì)物質(zhì),經(jīng)給藥治療后癥狀得到一定的改善,并且枯芩的整體治療效果顯著優(yōu)于子芩(P0.01)。以大腸濕熱證模型大鼠,研究子芩和枯芩的藥效學(xué)差異。結(jié)果表明造模后模型組與空白組相比,體溫升高,胸腺和脾指數(shù)增加、致炎因子均顯著上升(P0.01),說(shuō)明造模成功。當(dāng)給予子芩和枯芩進(jìn)行治療后,大鼠的體溫、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)和致炎因子均得到一定程度的改善(P0.01),且模型組回腸病理切片與空白組相比,出現(xiàn)腸組織結(jié)構(gòu)異常和部分粉紅色均質(zhì)物質(zhì);模型組結(jié)腸病理切片與空白組相比,出現(xiàn)隱窩消失,杯狀細(xì)胞數(shù)量減少,經(jīng)給藥治療后上述癥狀均得到一定的改善,并且子芩的整體治療作用顯著優(yōu)于枯芩(P0.01)。3結(jié)論3.1超高效液相色譜法檢測(cè)有效成分含量子芩和枯芩中有效成分含量具有顯著性差異。其中子芩中黃芩苷和漢黃芩苷含量較高,而黃芩素、漢黃芩素、千層紙素A含量則低于枯芩。3.2子芩與枯芩指紋圖譜差異研究子芩與枯芩超高效液相指紋圖譜在主成分分析得分圖中被明顯劃分為兩個(gè)部分,說(shuō)明子芩與枯芩的整體化學(xué)成分具有顯著性差異。3.3子芩與枯芩抗菌作用差異研究子芩與枯芩的抗菌作用具有顯著性差異。子芩對(duì)大腸桿菌的抑菌效果優(yōu)于枯芩,而枯芩對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌效果優(yōu)于子芩;且醇提物的抑菌效果均優(yōu)于水提物。黃芩苷與黃芩素配伍比例接近子芩中比例時(shí),對(duì)大腸桿菌的抑菌效果較好,而配伍比例接近枯芩中比例時(shí),對(duì)肺炎鏈球菌的抑菌效果較好。子芩與枯芩抑菌作用的差異可能與其黃芩苷和黃芩素的配伍比例不同有關(guān)。3.4子芩與枯芩體內(nèi)藥效學(xué)差異研究子芩與枯芩體內(nèi)藥效學(xué)具有顯著性差異�？蒈藢�(duì)細(xì)菌性肺熱模型大鼠的治療作用優(yōu)于子芩;子芩對(duì)大腸濕熱證模型大鼠的治療作用優(yōu)于枯芩。與傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論中枯芩善清肺胃之熱,子芩長(zhǎng)于瀉大腸下焦之火相印證。
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R284;R285
【圖文】：

樣品液相圖譜分別見(jiàn)圖 1-2、圖 1-3，含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表 1-5, 子芩與枯芩中黃芩苷/黃芩素比值結(jié)果見(jiàn)表 1-6。圖1-1 對(duì)照品 UPLC 含量測(cè)定圖譜1.黃芩苷 2.漢黃芩苷 3.黃芩素 4.漢黃芩素 5.千層紙素 AFig. 1-1 UPLC content determination of mixed reference solution1.baicalin 2.wogonoside 3.baicalein 4.wogonin 5.oroxylinA圖1-2 子芩(S5)UPLC 含量測(cè)定圖譜Fig.1-2 UPLC content determination in Scutellaria baicalensis Pith-decayed(S5)

Fig. 1-1 UPLC content determination of mixed reference solution1.baicalin 2.wogonoside 3.baicalein 4.wogonin 5.oroxylinA圖1-2 子芩(S5)UPLC 含量測(cè)定圖譜Fig.1-2 UPLC content determination in Scutellaria baicalensis Pith-decayed(S5)

子芩與枯芩化學(xué)成分及藥效差異研究7圖1-3 枯芩(S5)UPLC 含量測(cè)定圖譜Fig.1-3 UPLC content determination in Scutellaria baicalensis Pith-nodecayed(S5)表1-5 含量測(cè)定結(jié)果(n=3)Tab.1-5 Results of content determination(n=3)樣 品成分S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10平均含量（%）差異(%)黃芩苷（%）子芩12.56 12.78 13.03 11.82 11.93 11.60 12.82 12.47 12.85 12.27 12.41+28.96枯芩10.44 10.35 10.43 8.02 8.24 8.01 9.99 10.12 10.11 10.53 9.63漢黃芩苷（%）子芩2.64 2.69 2.74 2.57 2.55 2.52 2.73 2.56 2.67 2.51 2.62枯+54.01芩1.90 1.91 1.89 1.58 1.57 1.56 1.61 1.59 1.62 1.78 1.70黃芩素（%）子芩0.75 0.76 0.77 0.78 0.79 0.76 0.63 0.64 0.61 0.70 0.72-70.46枯芩3.14 3.14 3.10 2.13 2.11 2.14 2.14 2.15 2.16 2.11 2.43漢黃芩素（%）子芩0.43 0.43 0.44 0.45 0.44 0.45 0.33 0.34 0.33 0.37 0.40-44.35枯芩0.71 0.71 0.72 0.72 0.71 0.73 0.74 0.74 0.75 0.69 0.72千層紙素 A（%）子芩0.26 0.26 0.27 0.27 0.27 0.28 0.25 0.26 0.25 0.28 0.27-59.89枯芩0.69 0.71 0.69 0.68 0.64 0.66 0.64 0.63 0.65 0.64 0.66注：子芩較枯芩含量高為“+”，低為“-”

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本文編號(hào)：2799402