【摘要】：藜麥(chenopodium quinoa willd)是南美洲安第斯、智利等地區(qū)的一種傳統(tǒng)糧食作物,其種植歷史可以追溯到幾千年前,是有史以來最古老的食物。藜麥種子按顏色不同主要分為白藜(White quinoa,WQ)、紅藜(Red quinoa,RQ)、黑藜(Black quinoa,BQ)三個類型。從營養(yǎng)價值上,藜麥作為一種主食可以提供與肉類、牛奶媲美的高蛋白質(zhì)含量,而且多酚、黃酮、皂苷等功能活性成分比傳統(tǒng)的谷物更豐富,具有極大的開發(fā)前景和應(yīng)用價值。為了解不同顏色藜麥種子的營養(yǎng)品質(zhì)以及藜麥中黃酮化合物含量的差異,本研究以3種山西靜樂藜麥為材料,對其進行了營養(yǎng)成分的分析測定,并初步研究了藜麥黃酮提取物的抗氧化、抑菌、抗腫瘤活性,主要研究結(jié)果如下:1.對藜麥中基本營養(yǎng)成分(水分、脂肪、蛋白質(zhì)、淀粉、灰分、氨基酸)按國標(biāo)法測定。結(jié)果表明,BQ和RQ種子中蛋白質(zhì)、黃酮含量分別為13.74%和3.35 mg/100g,13.39%和3.25 mg/100g均高于WQ的11.81%和2.58 mg/100g。對藜麥氨基酸分析結(jié)果顯示,不同品種間氨基酸組成稍有差異且都含有17種氨基酸,BQ中氨基酸總含量最高,但RQ中必需氨基酸比例更接近FAO聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization)提出的蛋白質(zhì)評價人體氨基酸模式比值,是一種優(yōu)良的氨基酸來源。利用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)法對藜麥中黃酮化合物進行分析,結(jié)果顯示黃酮化合物種類主要為槲皮素(15.06~35.25 mg/100 g)和山奈酚(15.56~20.46 mg/100 g)。上述結(jié)果表明,不同顏色的藜麥營養(yǎng)組成稍有差異,但BQ和RQ中含有更高的蛋白質(zhì)和黃酮含量且存在顯著差異。2.通過DPPH、羥自由基的清除,還原能力3種體外抗氧化活性方法測定藜麥黃酮的抗氧化活性。結(jié)果表明藜麥黃酮具有良好的抗氧化活性。BQ、RQ、WQ三個樣品清除DPPH的IC50值分別為0.08、0.09、0.14 mg/mL,清除羥自由基的IC50值分別為0.08、0.10、0.15mg/mL,BQ和RQ清除自由基和對Fe~(3+)離子還原能力優(yōu)于WQ,分析表明,有色藜麥的黃酮含量更高,抗氧化能力也相對更強。以HCT116細(xì)胞為模型的細(xì)胞內(nèi)抗氧化CAA實驗顯示,藜麥黃酮對人結(jié)腸癌細(xì)胞存在明顯的細(xì)胞抗氧化能力,而且可以增加細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)的活力以及谷胱甘肽(GSH)含量。3.根據(jù)上述結(jié)果,選取抗氧化活性和黃酮含量最高的BQ種子用牛津杯法進行抑菌活性研究。結(jié)果表明藜麥黃酮對各供試細(xì)菌菌株均有抑制效果,對革蘭氏陰性細(xì)菌大腸桿菌的作用更為明顯。藜麥黃酮對真菌抑菌實驗分析發(fā)現(xiàn),木霉和根霉的擴散生長過程中會受到藜麥黃酮的抑制影響,且與黃酮的濃度成正相關(guān)。4.MTT實驗結(jié)果表明,較高濃度200~300μg/mL時藜麥黃酮可以明顯抑制HCT116細(xì)胞的生長,并且抑制率與黃酮的濃度為劑量依賴性關(guān)系。倒置和熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞與細(xì)胞核形態(tài),與對照組相比,藜麥黃酮處理細(xì)胞24 h后,大部分的細(xì)胞發(fā)生皺縮變小且細(xì)胞間距離變大,細(xì)胞核形狀也由正常的圓形變得不規(guī)則。用Annexin V和PI雙染后通過流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)藜麥黃酮能明顯誘導(dǎo)HCT116細(xì)胞發(fā)生凋亡,且主要發(fā)生在凋亡晚期。采用熒光探針DCFH-DA法檢測細(xì)胞內(nèi)ROS水平,結(jié)果顯示藜麥黃酮可誘導(dǎo)HCT116細(xì)胞中ROS的產(chǎn)生。以上結(jié)果初步表明藜麥黃酮具有一定的抗癌效果。綜上所述,藜麥中含有豐富的蛋白質(zhì)、淀粉、脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)以及均衡的氨基酸比例,深色種子中還含有更豐富的黃酮類物質(zhì)且具有良好的體外抗氧化活性、抑菌活性和抗腫瘤作用。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R151;R285
【圖文】：

圖 2.1 HPLC 法測定藜麥中黃酮化合物的成分 profiles of the flavonoid compounds of the white, red and black time of quercetin and kaempferol is 15 minutes(1,2,3,7) andtively.結(jié)表 2.6 藜麥中黃酮化合物的含量HPLC identification and concentration of the flavonoid in white,quinoa .槲皮素 山奈酚35.25±0.98a15.56±0.428.35±1.43b20.46±2.315.06±1.15c16.14±0.3

真菌生長至可以觀察到抑制生長現(xiàn)象時取出拍理得到的數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)的形式表示，實rigin 7.0 和 SPSS 17.0 統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行處理分析酮的清除 DPPH 自由基能力 分析可知，藜麥黃酮提取物的 DPPH 清除能力在 3 個<0.01），當(dāng)黃酮濃度達到 0.1 mg/mL 時 BQ 和 RQ 的，高于 VC 的清除率（52 %），而 WQ 的黃酮提取物WQ、RQ、BQ 清除 DPPH 的 IC50 值分別為 0.08、0.09三個品種間黃酮化合物的含量可知顏色越深，黃酮含力也越強。

第三章 藜麥黃酮提取物體外抗氧化及抑菌活性研究氫和亞鐵溶液產(chǎn)生的羥自由基，水楊酸捕捉后反應(yīng)光值可以反映樣品提取液清除羥自由基的能力。由的 OH 清除能力在 3 個品種間存在顯著的差異（P<的能力但都低于 VC。WQ、RQ、BQ 清除 OH 的 IC5 mg/mL。BQ 和 RQ 清除 OH 的能力顯著高于 WQ，量越多，其清除 OH 的效果越顯著。

【參考文獻】

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本文編號：2798532