發(fā)布時間：2020-08-18 13:57

【摘要】：蘆丁(Rutin,RT)是一種黃酮類化合物,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌和降血壓等活性。然而,由于其水溶性較差、口服生物利用度低,因此在臨床應(yīng)用中受到諸多限制,為了擴(kuò)大蘆丁的應(yīng)用范圍,本實(shí)驗(yàn)用透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)修飾改造蘆丁,大大的提高了其水溶性,并且,它使蘆丁在抗炎、抗菌、抗氧化等作用方面得到了一定的提高。本課題主要開展了以下研究內(nèi)容:1通過堿提取和酸沉淀法提取、分離蘆丁,條件:提取溶劑為堿水,料液比為1:10,提取溫度為60℃,提取時間為30min,提取次數(shù)為3次,經(jīng)核磁共振氫譜(~1H-NMR)、紅外光譜(FT-IR)、紫外光譜(UV)進(jìn)行了表征;2用HA修飾改造RT得到溶解度為850mg/mL的水溶性化合物HA-RT(RT在HA上的接枝率為50%),~1H-NMR、FT-IR、UV進(jìn)行了表征,并經(jīng)溶血試驗(yàn)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)證明HA-RT有較好的生物安全性;3體外采用ELISA試劑盒測RT、HA-RT、地塞米松(DXMS)對脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7巨噬細(xì)胞炎癥因子(NO、TNF-α、IL-1β)的影響,體內(nèi)采用耳廓腫脹法測RT、HA-RT對二甲苯致炎的小鼠的影響。結(jié)果表明HA-RT組炎癥因子(NO、TNF-α、IL-1β)的含量均低于RT組,在同一摩爾濃度下,RT、HA-RT及DXMS的抗炎能力大小為DXMSHA-RTRT,HA-RT組小鼠耳廓腫脹率低于RT組,說明HA-RT的抗炎效果優(yōu)于RT(HA-RT中蘆丁的含量與蘆丁單體的含量相同);4采用試管法測RT、HA-RT對大腸埃希氏菌、白色念珠菌和金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)。結(jié)果顯示HA-RT(溶劑為滅菌水,HA-RT中蘆丁的含量與蘆丁單體的含量相同)對大腸埃希氏菌的MIC、MBC分別為0.08mg/mL、0.11 mg/mL,對金黃色葡萄球菌的MIC、MBC分別為0.11 mg/mL、0.13 mg/mL,對白色念珠菌的MIC、MBC分別為0.07 mg/mL、0.09 mg/mL,RT(溶劑為20%乙醇)組對三種細(xì)菌的MIC(0.4 mg/mL)、MBC(0.8mg/mL)均高于HA-RT組,說明HA-RT的抗菌效果優(yōu)于RT;5采用清除DPPH自由基法、清除ABTS~+自由基法、清除超氧陰離子自由基(O~(2-))法測RT、HA-RT和Vc的抗氧化活性,結(jié)果表現(xiàn)為:在濃度達(dá)到一定程度后,Vc和HA-RT對DPPH自由基、ABTS~+自由基、O~(2-)自由基的清除率相當(dāng),幾乎達(dá)到100%,但HA-RT對超氧陰離子自由基(O~(2-))的清除率在各個濃度均大于RT,說明HA-RT的抗氧化能力較強(qiáng)。綜上所述,HA-RT的制備達(dá)到了最初的研究目的,極大的提高了RT的水溶性,使其在抗炎、抗菌、抗氧化等應(yīng)用上有較好的開發(fā)、生產(chǎn)和應(yīng)用前景。
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5;R284.2
【圖文】：

一種蘆丁綴合物的制備及其藥效學(xué)研究量的水，用 Ca(OH)2將 PH 調(diào)濾后用 1mol/L HCL 將 PH 調(diào)至 Ca(OH)2將 PH 調(diào)節(jié)至 8-9。加置過濾，烘干即得蘆丁。所得蘆 為蘆丁結(jié)構(gòu)式。

2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.5.1 蘆丁的鑒別蘆丁的 UV 圖譜（圖2-2）、FT-IR 圖譜 (圖3-2)、1H-NMR 圖(圖3-3)及圖譜解析見2.5.2、3.5.1、3.5.2。2.5.2 測定波長的選擇蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品與槐米中提取的蘆丁的紫外吸收光譜如圖 2-2 所示。圖譜顯示，在 200～400 nm 波長內(nèi)蘆丁有三個吸收峰，為 205 nm、257 nm、358 nm，其中蘆丁在 205 nm、257 nm 處有較大吸收。而蘆丁在 205 nm 處的吸收峰干擾因素較多，故將蘆丁的測定波長選擇為 257 nm[47]。

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁圖 2-2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品與蘆丁的紫外吸收圖譜標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制不同濃度蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品吸光度，以溶液濃度（c）為橫到蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品回歸方程為 A= 0.0375c（r = 0.9998 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，故而以紫外分光光度法測定

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2796303