【摘要】：蘆丁(Rutin,RT)是一種黃酮類化合物,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌和降血壓等活性。然而,由于其水溶性較差、口服生物利用度低,因此在臨床應用中受到諸多限制,為了擴大蘆丁的應用范圍,本實驗用透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)修飾改造蘆丁,大大的提高了其水溶性,并且,它使蘆丁在抗炎、抗菌、抗氧化等作用方面得到了一定的提高。本課題主要開展了以下研究內(nèi)容:1通過堿提取和酸沉淀法提取、分離蘆丁,條件:提取溶劑為堿水,料液比為1:10,提取溫度為60℃,提取時間為30min,提取次數(shù)為3次,經(jīng)核磁共振氫譜(~1H-NMR)、紅外光譜(FT-IR)、紫外光譜(UV)進行了表征;2用HA修飾改造RT得到溶解度為850mg/mL的水溶性化合物HA-RT(RT在HA上的接枝率為50%),~1H-NMR、FT-IR、UV進行了表征,并經(jīng)溶血試驗、穩(wěn)定性實驗以及細胞毒性實驗證明HA-RT有較好的生物安全性;3體外采用ELISA試劑盒測RT、HA-RT、地塞米松(DXMS)對脂多糖誘導的RAW264.7巨噬細胞炎癥因子(NO、TNF-α、IL-1β)的影響,體內(nèi)采用耳廓腫脹法測RT、HA-RT對二甲苯致炎的小鼠的影響。結(jié)果表明HA-RT組炎癥因子(NO、TNF-α、IL-1β)的含量均低于RT組,在同一摩爾濃度下,RT、HA-RT及DXMS的抗炎能力大小為DXMSHA-RTRT,HA-RT組小鼠耳廓腫脹率低于RT組,說明HA-RT的抗炎效果優(yōu)于RT(HA-RT中蘆丁的含量與蘆丁單體的含量相同);4采用試管法測RT、HA-RT對大腸埃希氏菌、白色念珠菌和金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)。結(jié)果顯示HA-RT(溶劑為滅菌水,HA-RT中蘆丁的含量與蘆丁單體的含量相同)對大腸埃希氏菌的MIC、MBC分別為0.08mg/mL、0.11 mg/mL,對金黃色葡萄球菌的MIC、MBC分別為0.11 mg/mL、0.13 mg/mL,對白色念珠菌的MIC、MBC分別為0.07 mg/mL、0.09 mg/mL,RT(溶劑為20%乙醇)組對三種細菌的MIC(0.4 mg/mL)、MBC(0.8mg/mL)均高于HA-RT組,說明HA-RT的抗菌效果優(yōu)于RT;5采用清除DPPH自由基法、清除ABTS~+自由基法、清除超氧陰離子自由基(O~(2-))法測RT、HA-RT和Vc的抗氧化活性,結(jié)果表現(xiàn)為:在濃度達到一定程度后,Vc和HA-RT對DPPH自由基、ABTS~+自由基、O~(2-)自由基的清除率相當,幾乎達到100%,但HA-RT對超氧陰離子自由基(O~(2-))的清除率在各個濃度均大于RT,說明HA-RT的抗氧化能力較強。綜上所述,HA-RT的制備達到了最初的研究目的,極大的提高了RT的水溶性,使其在抗炎、抗菌、抗氧化等應用上有較好的開發(fā)、生產(chǎn)和應用前景。
【學位授予單位】：河南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5;R284.2
【圖文】：

一種蘆丁綴合物的制備及其藥效學研究量的水，用 Ca(OH)2將 PH 調(diào)濾后用 1mol/L HCL 將 PH 調(diào)至 Ca(OH)2將 PH 調(diào)節(jié)至 8-9。加置過濾，烘干即得蘆丁。所得蘆 為蘆丁結(jié)構(gòu)式。

2.5 實驗結(jié)果2.5.1 蘆丁的鑒別蘆丁的 UV 圖譜（圖2-2）、FT-IR 圖譜 (圖3-2)、1H-NMR 圖(圖3-3)及圖譜解析見2.5.2、3.5.1、3.5.2。2.5.2 測定波長的選擇蘆丁標準品與槐米中提取的蘆丁的紫外吸收光譜如圖 2-2 所示。圖譜顯示，在 200～400 nm 波長內(nèi)蘆丁有三個吸收峰，為 205 nm、257 nm、358 nm，其中蘆丁在 205 nm、257 nm 處有較大吸收。而蘆丁在 205 nm 處的吸收峰干擾因素較多，故將蘆丁的測定波長選擇為 257 nm[47]。

蘆丁標準品蘆丁圖 2-2 蘆丁標準品與蘆丁的紫外吸收圖譜標準品標準曲線的繪制不同濃度蘆丁標準品吸光度，以溶液濃度（c）為橫到蘆丁標準品回歸方程為 A= 0.0375c（r = 0.9998 范圍內(nèi)線性關系良好，故而以紫外分光光度法測定

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本文編號：2796303