【摘要】：目的本研究以非GAP基地自種的大宗中藥材丹參為研究對(duì)象,分別建立氣相色譜及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)測(cè)定藥材中農(nóng)藥及黃曲霉毒素的殘留水平,并采用微量熱法考察藥材的抗菌作用,結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)技術(shù)評(píng)價(jià)多批次丹參藥材的抗菌作用差異,通過(guò)建立藥材化學(xué)指紋圖譜及抗菌作用的“譜-效”關(guān)系,探尋其主要的抗菌活性成分,以期為丹參藥材的安全性及抗菌作用評(píng)價(jià)提供參考和依據(jù)。方法本文主要從下幾個(gè)方面開(kāi)展研究:1、采用并優(yōu)化2015版《中國(guó)藥典》附錄中農(nóng)藥殘留檢測(cè)法色譜法測(cè)定丹參中農(nóng)藥殘留量。2、優(yōu)化2015版《中國(guó)藥典》黃曲霉毒素檢測(cè)法結(jié)合免疫親和柱凈化與LC-MS/MS法測(cè)定丹參中黃曲霉毒素的污染水平。3、采用微量量熱法比較丹參對(duì)金黃色葡萄球菌、耐藥金黃色葡萄球菌、大腸桿菌及綠膿桿菌的活性作用。4、結(jié)合丹參水溶性成分的化學(xué)指紋圖譜與其抗綠膿桿菌作用進(jìn)行“譜效”關(guān)系研究,探明其主要的抗菌活性成分。結(jié)果1、在確證方法學(xué)驗(yàn)證(包括儀器精密度,樣品回收率和穩(wěn)定性)符合規(guī)定的前提下,測(cè)定32批不同產(chǎn)地的丹參藥材中有機(jī)氯類、有機(jī)磷類及擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥的殘留量,結(jié)果顯示共檢測(cè)出7種有機(jī)磷類和擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥殘留,其中檢測(cè)率最高的為氯氰菊酯,且在10批樣品中被檢出,殘留量最高的農(nóng)藥為久效磷為,殘留水平0.028mg/kg。以上結(jié)果經(jīng)UFLC-MS/MS法驗(yàn)證,避免了假陽(yáng)性結(jié)果。2、采用優(yōu)化的免疫親和柱法檢測(cè)黃曲霉毒素的殘留水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn),32批丹參樣品中均未檢出黃曲霉毒素,加入黃曲霉孢子共培養(yǎng)7天的霉變丹參樣品中均檢出AFB1與AFG1,但均未超過(guò)《中國(guó)藥典》(2015版)限量規(guī)定。3、通過(guò)微量熱法來(lái)評(píng)估不同產(chǎn)地的丹參樣品對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和耐藥性金黃色葡萄球菌的抗菌效果。結(jié)果顯示,不同產(chǎn)地的丹參的抗菌活性差異較大,如5個(gè)產(chǎn)地中北京購(gòu)買(mǎi)的丹參抗大腸桿菌最強(qiáng)而抗金黃色葡萄球菌最弱。4、結(jié)合聚類分析、主成分分析和多元線性回歸分析,探討丹參藥材HPLC-DAD化學(xué)指紋圖譜與其抗綠膿桿菌作用的“譜-效”關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),北京采集的丹參樣品對(duì)綠膿桿菌的抗菌作用最強(qiáng),平均抑制率最高;相反,從四川采集的丹參樣品對(duì)綠膿桿菌的抗菌作用最弱,平均抑制率最小。“譜-效”關(guān)系研究結(jié)果表明:指紋圖譜中的峰4、峰8、峰13、峰17和峰18為主要的5個(gè)抗菌活性物質(zhì)。結(jié)論本文通過(guò)測(cè)定丹參藥材黃曲霉毒素、農(nóng)藥的污染水平及其對(duì)多種細(xì)菌的作用,并通過(guò)其化學(xué)指紋圖譜與抑菌作用“譜-效”關(guān)系的建立闡明了其抗菌作用成分,系統(tǒng)評(píng)價(jià)了不同產(chǎn)地和來(lái)源丹參藥材的安全性及抗菌作用差異,為其臨床合理、安全應(yīng)用提供了理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R284.1;R285

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本文編號(hào)：2791262