【摘要】：目的:運用血清藥理學(xué)方法及體外細胞培養(yǎng)技術(shù),觀察丹玄口康含藥血清對檳榔提取物(ANE)刺激下的口腔黏膜成纖維細胞(FB)細胞增殖分裂及腫瘤增殖抗原Ki-67表達的影響。方法:1.將30只SD大鼠隨機分為3組,每組10只分別灌胃生理鹽水、低劑量丹玄口康、高劑量丹玄口康,制備正常血清和含藥血清。2.運用組織塊法進行口腔黏膜成纖維細胞培養(yǎng),取第三代或第四代細胞用于實驗。(1)免疫細胞化學(xué)染色SP法鑒定口腔黏膜成纖維細胞。(2)將細胞接種后分為4組:A空白對照組、B正常血清組、C含藥血清低劑量組、D含藥血清高劑量組,分別加入正常血清、含藥血清和100ug/ml的ANE,干預(yù)48小時后。MTT法檢測細胞增殖,記錄細胞的吸光度值(OD);ELISA法和免疫細胞化學(xué)檢測培養(yǎng)細胞及上清液KI-67蛋白的表達;福爾根法檢測DNA;Giemsa染色于油鏡下計數(shù)細胞微核率(‰)。結(jié)果:(1)口腔黏膜成纖維細胞SP法染色胞漿內(nèi)可見波形蛋白表達陽性。(2)ANE干預(yù)48h后FB平均光密度值明顯高于A空白組,含藥血清組OD值低于正常血清組。(3)經(jīng)ANE干預(yù)的FB及上清液中KI-67含量高于空白組,而含藥血清組中KI-67含量低于正常血清組,有顯著差異(P0.05)。(4)ANE干預(yù)的FB細胞核NA、NP、NV值高于空白組,含藥血清組低于正常血清組。(5)ANE干預(yù)的FB細胞中微核細胞率明顯高于空白組,丹玄口康含藥血清組細胞微核率低于正常血清組,并且含藥血清高劑量組降低程度比含藥血清低劑量組高。結(jié)論:1.100ug/ml的ANE促進口腔黏膜成纖維細胞增殖。2.丹玄口康含藥血清可以拮抗ANE對FB的促增殖作用及KI-67的高表達。3.丹玄口康可以減少ANE誘導(dǎo)下的FB細胞的異形性,進而達到治療OSF的目的。
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2790127