【摘要】：放射治療是各種惡性腫瘤經(jīng)典的治療方法,但由于腫瘤輻射抗拒性等問題,影響著放療的療效和應(yīng)用。為了尋找一個新穎有效的放射增敏劑,本文基于蟲草素(Cordycepin)的抗腫瘤特性,旨在探討蟲草素對人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、MDA-MB-231輻射增敏的作用機制。MTT和克隆形成實驗結(jié)果顯示,蟲草素對乳腺癌兩種細(xì)胞系均有輻射增敏作用,能明顯抑制細(xì)胞的增殖。為了探討蟲草素提高乳腺癌細(xì)胞輻射增敏的機制,我們采用流式細(xì)胞術(shù)進行分析,結(jié)果顯示,蟲草素可以提高電離輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡能力。此外,輻照與蟲草素聯(lián)合處理組的活性氧(ROS)產(chǎn)生明顯增多。通過免疫熒光檢測組蛋白H2AX的磷酸化(γ-H2AX)水平,發(fā)現(xiàn)蟲草素增加輻照誘導(dǎo)的γ-H2AX焦點的形成。通過實時定量熒光PCR方法以及蛋白免疫印跡試驗,我們發(fā)現(xiàn)蟲草素預(yù)處理的乳腺癌細(xì)胞系,輻照后其Nrf2的mRNA和蛋白水平顯著降低,而且Nrf2的下游基因HO-1的mRNA水平變化與其趨勢一致。此外,在體內(nèi)實驗的研究中,我們得出與體外實驗一致的結(jié)果,即蟲草素能夠?qū)θ橄侔┘?xì)胞產(chǎn)生顯著的輻射增敏作用以及降低Nrf2的蛋白表達(dá)水平�？傊�,這些結(jié)果均證實了蟲草素通過Nrf2/HO-1/ROS信號軸提高對乳腺癌細(xì)胞系的輻射增敏作用。因此,我們的研究結(jié)果為蟲草素在放射治療中的功能和潛在機制提供了新的見解,并且蟲草素在乳腺癌放療臨床實踐中具有可觀的應(yīng)用潛力。目的研究3,3'-二吲哚甲烷(3,3-diindolylmethane,DIM)對2 Gy輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)的保護作用。方法取雄性C57BL/6小鼠30只,隨機分為對照組、照射組和照射+DIM組,每組10只小鼠。照射組和照射+DIM組小鼠接受2 Gy的137Cs γ-射線一次性全身照射。照射+DIM組小鼠在照射前30 min采用腹腔注射方法,注射濃度為75 mg/kg的DIM,對照組和照射組小鼠注射對照溶液。小鼠分別于受照后7 d和15 d每組處死5只,取外周血以測定血象,取骨髓細(xì)胞以測定有核細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞內(nèi)ROS水平以及克隆形成能力。結(jié)果與無輻照的對照組小鼠比較,照射組小鼠的外周血白細(xì)胞數(shù)量、血小板數(shù)量、骨髓有核細(xì)胞數(shù)目、粒單系集落形成單位、胸腺系數(shù)和脾臟系數(shù)顯著下降,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平明顯提高(P0.05)。而且受照后7 d比15 d的輻射損傷效應(yīng)更加嚴(yán)重。但是,腹腔注射DIM則明顯地降低了輻照所誘導(dǎo)的小鼠輻射損傷效應(yīng)(P0.05)。結(jié)論DIM對于小鼠2Gy照射后造血損傷具有一定的保護作用,其作用可能是通過降低骨髓細(xì)胞中活性氧的水平。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285
【圖文】：

為了探究蟲草素提高乳腺癌輻射增敏性的分子機制，首先我們采用流式細(xì)胞術(shù)逡逑檢測蟲草素對乳腺癌細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。即Ａｎｎｅｘｉｎ邋Ｖ／Ｐ１雙染色法檢測其促進凋逡逑亡的效果。流式細(xì)胞儀分析結(jié)果如圖２－１邋Ａ和Ｂ所示，在ＭＣＦ－７（或ＭＤＡ－ＭＢ－２３１）逡逑細(xì)胞中，單獨給藥組細(xì)胞凋亡率為２．５邋％邋（或３．６邋％）的前提下，４邋Ｇｙ輻照后細(xì)胞凋逡逑亡率為１６．９％邋（或２１．１邋％），而蟲草素＋福照組細(xì)胞凋亡率為２９．９％邋（或３２．９％），逡逑聯(lián)合處理組與單純照射組相比，細(xì)胞凋亡率有明顯提高，山此可見，蟲草素能夠促逡逑進輻照后乳腺癌細(xì)胞的凋亡。逡逑Ａ邋ＭＣＦ－７邐…邐逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邋Ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ邐３２－，邐：３二逡逑ｆ邐ｆ邋？邐一ｓ邐■邋ＩＲ逡逑＾邐■邋ＩＲ＊Ｃｏｒｄｙｃｅｐ＜ｎ逡逑0Ｇｙ：ｉ－邐１１逡逑ＡＣ逡逑Ｍ邐１：１邐Ｉ逡逑＿邐－Ｚ－．逡逑Ａｎｎｅｘｉｎ邋Ｖ逡逑Ｄ逡逑°邋ＭＤＡ－ＭＢ－２３１逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邐Ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ邐３２１邐＊＊＊邋…ｍ逡逑１邋Ｊ邐：＇邐一邐－－ＩＲ逡逑ＩＲ＾Ｃｏｒｄｙｃｅｐｍ逡逑０Ｇｙ邋丨一邐；＾邐｜２４－逡逑－邋—邋．邋－邋－邋－邋－－邋－邋－邋？邐Ｏ邐Ｉ逡逑？■§１６．邐

本文編號：2789555