【摘要】:本試驗研究苜蓿皂苷(Alfalfa saponin)對X射線照射小鼠的影響,探討苜蓿皂苷對照射小鼠是否具有防護(hù)作用。本試驗選取雄性SPF級昆明系小鼠(body weight=20±2g)100只,隨機分為陰性對照組(Negative control group,NC)、陽性對照組(Positive control group,PC)和苜蓿皂苷保護(hù)組(Alfalfa saponin protection group,AP)。陰性對照組和陽性對照組給予生理鹽水,苜蓿皂苷保護(hù)組給予不同濃度的苜蓿皂苷(25mg/m L、50mg/m L和100mg/m L)灌胃給藥,按體重0.1m L/10g每天灌胃一次,連續(xù)灌胃28天,第29天除了陰性對照組以外均給予全身一次性X射線均勻照射,劑量率1.0Gy/min,照射劑量分別為2.0Gy、4.0Gy和6.0Gy,照射后72小時處死動物。本試驗分為三個試驗:試驗一:主要研究苜蓿皂苷對X射線照射小鼠造血系統(tǒng)的影響。試驗結(jié)果表明:(1)25mg/m L苜蓿皂苷對小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞(PCE)微核和肝臟丙二醛(MDA)含量的影響單純灌胃25mg/m L苜蓿皂苷后,小鼠骨髓PCE的微核率和肝臟的MDA含量與陰性對照組相比,呈現(xiàn)下降的趨勢但差異不顯著(P0.05)。(2)苜蓿皂苷對X射線照射小鼠外周血白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血小板(PLT)的影響小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠減輕X射線對小鼠外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量的降低程度,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量升高的程度減弱。25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量均顯著高于對照組(P0.05或P0.01);100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組的外周血WBC、PLT均稍高于其對照組,但差異不顯著(P0.05)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽性對照組的外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量均顯著低于陰性對照組(P0.05或P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量降低越明顯。(3)苜蓿皂苷對X射線照射小鼠骨髓有核細(xì)胞(BMC)的影響小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠增加照射小鼠的骨髓BMC數(shù),且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠骨髓BMC數(shù)升高的程度減弱。50mg/m L和100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的骨髓BMC數(shù)雖有升高的趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義;25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的骨髓BMC數(shù)顯著高于對照組(P0.01)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽性對照組的骨髓BMC數(shù)與陰性對照組相比明顯降低(P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的骨髓BMC數(shù)降低越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,可以明顯減輕2.0Gy和4.0Gy的X射線照射后小鼠骨髓BMC的下降程度,與陽性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,6.0Gy的X射線照射組小鼠骨髓BMC數(shù)稍高于陽性對照組(P0.05),但差異不顯著。(4)苜蓿皂苷對X射線照射小鼠骨髓PCE微核的影響小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠明顯降低小鼠骨髓PCE微核率,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠骨髓PCE微核率降低的程度減弱。50mg/m L和100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠骨髓PCE微核率與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義;25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠骨髓PCE微核率顯著低于對照組(P0.05)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽性對照組的小鼠骨髓PCE微核率與陰性對照組相比明顯升高(P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的骨髓PCE微核率升高越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,三種不同劑量的X射線照射組小鼠骨髓PCE微核率均顯著低于其陽性對照組(P0.05或P0.01)。試驗二:主要研究苜蓿皂苷對X射線照射小鼠免疫器官的影響。試驗結(jié)果表明:小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠明顯減輕X射線對照射小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的降低程度,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)升高的程度減弱。50mg/m L和100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著高于對照組(P0.05或P0.01)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽性對照組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)與陰性對照組相比明顯降低(P0.05或P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)降低越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,可以明顯減輕4.0Gy的X射線照射后小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的下降程度,與陽性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05或P0.01)。試驗三:主要研究苜蓿皂苷對X射線照射小鼠抗氧化系統(tǒng)功能的影響。試驗結(jié)果表明:小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠提高X射線照射小鼠肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)活性,降低MDA含量,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加這種趨勢減弱。25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠肝臟SOD、GSH-Px和CAT活性均顯著高于對照組(P0.01);25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠肝臟MDA含量顯著低于對照組(P0.01)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽性對照組小鼠肝臟SOD、GSH-Px和CAT活性與陰性對照組相比明顯降低(P0.01),且隨著照射劑量的增加下降的程度越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,小鼠受照后SOD、GSH-Px和CAT活性較陽性對照組明顯升高(P0.05或P0.01),MDA含量顯著降低(P0.01)。綜上,苜蓿皂苷在一定程度上對照射小鼠造血系統(tǒng)、免疫器官和抗氧化系統(tǒng)有防護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R285.5
【圖文】:
本試驗選取雄性SPF級昆明系小鼠(Body weight=20±2g)100只,隨機分為陰性對照組、陽性對照組和苜蓿皂苷保護(hù)組。陰性對照組和陽性對照組均給予生理鹽水灌胃,苜蓿皂苷保護(hù)組給予不同濃度的苜蓿皂苷(25mg/mL、50mg/mL和100mg/mL)灌胃給藥,按體重0.1mL/10g每天灌胃一次,用鈍針頭灌胃給藥,連續(xù)28天,第29天除了陰性對照組以外均給予一次全身均勻照射,照射后72小時處死動物,取樣并檢測各項指標(biāo)。3.1.3 飼養(yǎng)管理試驗前對動物房及籠具進(jìn)行嚴(yán)格消毒,待籠具干燥后,將試驗小鼠稱重、編號和分組。試驗小鼠采用分籠飼養(yǎng),自由采食和飲水,控制室溫溫度在25°C左右,濕度為65%-75%,注意通風(fēng)換氣。飲水和墊料均先高壓消毒后使用,墊料每3天更換一次。適應(yīng)一周后進(jìn)行正式試驗。每天早上9點對小鼠進(jìn)行灌胃,苜蓿皂苷用生理鹽水溶解。3.1.4 照射條件小鼠照射在鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院進(jìn)行。用瑞典醫(yī)科達(dá)電子直線加速器對小鼠進(jìn)行 X射線全身均勻照射,電壓 200kV,電流 10mA,濾板 0.5mm Cu 和 1.0mm Al,照射源距靶中心垂直距離 50cm ,劑量率 1.0Gy/min,總劑量分別為 2.0Gy、4.0Gy 和 6.0Gy(如圖 3-2)。

Table 3-11 Effects of 25mg/ mL alfalfa saponins on PCE micronuclei of bone marrow in mice irradiated withdifferent doses of X-rays組別Groups苜蓿皂苷(mg/mL)Alfalfa saponinX 射線(Gy)X-ray (Gy)只數(shù)n微核率(‰)Micronucleus rate(‰)陰性對照組 NC 0 0 10 3.00±0.71陽性對照組 PC 0 2.0 10 21.80±3.11**保護(hù)組 AP 25 2.0 10 10.40±3.65##陽性對照組 PC 0 4.0 10 26.00±6.96**保護(hù)組 AP 25 4.0 10 16.80±5.72#陽性對照組 PC 0 6.0 10 31.20±6.38**保護(hù)組 AP 25 6.0 10 21.20±6.61##注:*P<0.05,**P<0.01 與陰性對照組比較;#P<0.05,##P<0.01 與陽性對照組比較。Note:*P<0.05,**P<0.01 compared with the negative control group;#P<0.05,##P<0.01 compared with the positivecontrol group.

Table 3-11 Effects of 25mg/ mL alfalfa saponins on PCE micronuclei of bone marrow in mice irradiated withdifferent doses of X-rays組別Groups苜蓿皂苷(mg/mL)Alfalfa saponinX 射線(Gy)X-ray (Gy)只數(shù)n微核率(‰)Micronucleus rate(‰)陰性對照組 NC 0 0 10 3.00±0.71陽性對照組 PC 0 2.0 10 21.80±3.11**保護(hù)組 AP 25 2.0 10 10.40±3.65##陽性對照組 PC 0 4.0 10 26.00±6.96**保護(hù)組 AP 25 4.0 10 16.80±5.72#陽性對照組 PC 0 6.0 10 31.20±6.38**保護(hù)組 AP 25 6.0 10 21.20±6.61##注:*P<0.05,**P<0.01 與陰性對照組比較;#P<0.05,##P<0.01 與陽性對照組比較。Note:*P<0.05,**P<0.01 compared with the negative control group;#P<0.05,##P<0.01 compared with the positivecontrol group.
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