【摘要】：本試驗(yàn)研究苜蓿皂苷(Alfalfa saponin)對(duì)X射線照射小鼠的影響,探討苜蓿皂苷對(duì)照射小鼠是否具有防護(hù)作用。本試驗(yàn)選取雄性SPF級(jí)昆明系小鼠(body weight=20±2g)100只,隨機(jī)分為陰性對(duì)照組(Negative control group,NC)、陽(yáng)性對(duì)照組(Positive control group,PC)和苜蓿皂苷保護(hù)組(Alfalfa saponin protection group,AP)。陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組給予生理鹽水,苜蓿皂苷保護(hù)組給予不同濃度的苜蓿皂苷(25mg/m L、50mg/m L和100mg/m L)灌胃給藥,按體重0.1m L/10g每天灌胃一次,連續(xù)灌胃28天,第29天除了陰性對(duì)照組以外均給予全身一次性X射線均勻照射,劑量率1.0Gy/min,照射劑量分別為2.0Gy、4.0Gy和6.0Gy,照射后72小時(shí)處死動(dòng)物。本試驗(yàn)分為三個(gè)試驗(yàn):試驗(yàn)一:主要研究苜蓿皂苷對(duì)X射線照射小鼠造血系統(tǒng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)25mg/m L苜蓿皂苷對(duì)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞(PCE)微核和肝臟丙二醛(MDA)含量的影響單純灌胃25mg/m L苜蓿皂苷后,小鼠骨髓PCE的微核率和肝臟的MDA含量與陰性對(duì)照組相比,呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)但差異不顯著(P0.05)。(2)苜蓿皂苷對(duì)X射線照射小鼠外周血白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血小板(PLT)的影響小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠減輕X射線對(duì)小鼠外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量的降低程度,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量升高的程度減弱。25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量均顯著高于對(duì)照組(P0.05或P0.01);100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組的外周血WBC、PLT均稍高于其對(duì)照組,但差異不顯著(P0.05)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽(yáng)性對(duì)照組的外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量均顯著低于陰性對(duì)照組(P0.05或P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的外周血WBC、RBC和PLT數(shù)量降低越明顯。(3)苜蓿皂苷對(duì)X射線照射小鼠骨髓有核細(xì)胞(BMC)的影響小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠增加照射小鼠的骨髓BMC數(shù),且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠骨髓BMC數(shù)升高的程度減弱。50mg/m L和100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的骨髓BMC數(shù)雖有升高的趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的骨髓BMC數(shù)顯著高于對(duì)照組(P0.01)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽(yáng)性對(duì)照組的骨髓BMC數(shù)與陰性對(duì)照組相比明顯降低(P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的骨髓BMC數(shù)降低越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,可以明顯減輕2.0Gy和4.0Gy的X射線照射后小鼠骨髓BMC的下降程度,與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,6.0Gy的X射線照射組小鼠骨髓BMC數(shù)稍高于陽(yáng)性對(duì)照組(P0.05),但差異不顯著。(4)苜蓿皂苷對(duì)X射線照射小鼠骨髓PCE微核的影響小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠明顯降低小鼠骨髓PCE微核率,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠骨髓PCE微核率降低的程度減弱。50mg/m L和100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠骨髓PCE微核率與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠骨髓PCE微核率顯著低于對(duì)照組(P0.05)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽(yáng)性對(duì)照組的小鼠骨髓PCE微核率與陰性對(duì)照組相比明顯升高(P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的骨髓PCE微核率升高越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,三種不同劑量的X射線照射組小鼠骨髓PCE微核率均顯著低于其陽(yáng)性對(duì)照組(P0.05或P0.01)。試驗(yàn)二:主要研究苜蓿皂苷對(duì)X射線照射小鼠免疫器官的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠明顯減輕X射線對(duì)照射小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的降低程度,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)升高的程度減弱。50mg/m L和100mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著高于對(duì)照組(P0.05或P0.01)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽(yáng)性對(duì)照組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)與陰性對(duì)照組相比明顯降低(P0.05或P0.01),且隨著照射劑量的增加,小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)降低越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,可以明顯減輕4.0Gy的X射線照射后小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的下降程度,與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。試驗(yàn)三:主要研究苜蓿皂苷對(duì)X射線照射小鼠抗氧化系統(tǒng)功能的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:小鼠在接受4.0Gy的X射線照射前,預(yù)防性給予苜蓿皂苷,能夠提高X射線照射小鼠肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)活性,降低MDA含量,且隨著苜蓿皂苷濃度的增加這種趨勢(shì)減弱。25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠肝臟SOD、GSH-Px和CAT活性均顯著高于對(duì)照組(P0.01);25mg/m L的苜蓿皂苷保護(hù)組小鼠肝臟MDA含量顯著低于對(duì)照組(P0.01)。小鼠接受不同劑量的X射線照射后,陽(yáng)性對(duì)照組小鼠肝臟SOD、GSH-Px和CAT活性與陰性對(duì)照組相比明顯降低(P0.01),且隨著照射劑量的增加下降的程度越明顯。預(yù)防性給予25mg/m L的苜蓿皂苷后,小鼠受照后SOD、GSH-Px和CAT活性較陽(yáng)性對(duì)照組明顯升高(P0.05或P0.01),MDA含量顯著降低(P0.01)。綜上,苜蓿皂苷在一定程度上對(duì)照射小鼠造血系統(tǒng)、免疫器官和抗氧化系統(tǒng)有防護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

本試驗(yàn)選取雄性SPF級(jí)昆明系小鼠（Body weight=20±2g）100只，隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組和苜蓿皂苷保護(hù)組。陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組均給予生理鹽水灌胃，苜蓿皂苷保護(hù)組給予不同濃度的苜蓿皂苷（25mg/mL、50mg/mL和100mg/mL）灌胃給藥，按體重0.1mL/10g每天灌胃一次，用鈍針頭灌胃給藥，連續(xù)28天，第29天除了陰性對(duì)照組以外均給予一次全身均勻照射，照射后72小時(shí)處死動(dòng)物，取樣并檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。3.1.3 飼養(yǎng)管理試驗(yàn)前對(duì)動(dòng)物房及籠具進(jìn)行嚴(yán)格消毒，待籠具干燥后，將試驗(yàn)小鼠稱重、編號(hào)和分組。試驗(yàn)小鼠采用分籠飼養(yǎng)，自由采食和飲水，控制室溫溫度在25°C左右，濕度為65%-75%，注意通風(fēng)換氣。飲水和墊料均先高壓消毒后使用，墊料每3天更換一次。適應(yīng)一周后進(jìn)行正式試驗(yàn)。每天早上9點(diǎn)對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，苜蓿皂苷用生理鹽水溶解。3.1.4 照射條件小鼠照射在鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院進(jìn)行。用瑞典醫(yī)科達(dá)電子直線加速器對(duì)小鼠進(jìn)行 X射線全身均勻照射，電壓 200kV，電流 10mA，濾板 0.5mm Cu 和 1.0mm Al，照射源距靶中心垂直距離 50cm ，劑量率 1.0Gy/min，總劑量分別為 2.0Gy、4.0Gy 和 6.0Gy（如圖 3-2）。

Table 3-11 Effects of 25mg/ mL alfalfa saponins on PCE micronuclei of bone marrow in mice irradiated withdifferent doses of X-rays組別Groups苜蓿皂苷(mg/mL)Alfalfa saponinX 射線(Gy)X-ray (Gy)只數(shù)n微核率（‰）Micronucleus rate(‰)陰性對(duì)照組 NC 0 0 10 3.00±0.71陽(yáng)性對(duì)照組 PC 0 2.0 10 21.80±3.11**保護(hù)組 AP 25 2.0 10 10.40±3.65##陽(yáng)性對(duì)照組 PC 0 4.0 10 26.00±6.96**保護(hù)組 AP 25 4.0 10 16.80±5.72#陽(yáng)性對(duì)照組 PC 0 6.0 10 31.20±6.38**保護(hù)組 AP 25 6.0 10 21.20±6.61##注：*P＜0.05，**P＜0.01 與陰性對(duì)照組比較；#P＜0.05，##P＜0.01 與陽(yáng)性對(duì)照組比較。Note:*P<0.05,**P<0.01 compared with the negative control group;#P<0.05,##P<0.01 compared with the positivecontrol group.

Table 3-11 Effects of 25mg/ mL alfalfa saponins on PCE micronuclei of bone marrow in mice irradiated withdifferent doses of X-rays組別Groups苜蓿皂苷(mg/mL)Alfalfa saponinX 射線(Gy)X-ray (Gy)只數(shù)n微核率（‰）Micronucleus rate(‰)陰性對(duì)照組 NC 0 0 10 3.00±0.71陽(yáng)性對(duì)照組 PC 0 2.0 10 21.80±3.11**保護(hù)組 AP 25 2.0 10 10.40±3.65##陽(yáng)性對(duì)照組 PC 0 4.0 10 26.00±6.96**保護(hù)組 AP 25 4.0 10 16.80±5.72#陽(yáng)性對(duì)照組 PC 0 6.0 10 31.20±6.38**保護(hù)組 AP 25 6.0 10 21.20±6.61##注：*P＜0.05，**P＜0.01 與陰性對(duì)照組比較；#P＜0.05，##P＜0.01 與陽(yáng)性對(duì)照組比較。Note:*P<0.05,**P<0.01 compared with the negative control group;#P<0.05,##P<0.01 compared with the positivecontrol group.

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