【摘要】：秋茄和桐花樹(shù)是福建省內(nèi)中分布最廣的兩種紅樹(shù)植物,富含豐富的生物活性物質(zhì):酚類、萜類、多糖、生物堿、脂肪酸、甾醇等,民間將其作為藥物使用。酚酸為酚類物質(zhì)中重要的一類,主要通過(guò)莽草酸途徑生成,在谷物、蔬菜、水果、茶中一般以游離或與其它物質(zhì)形成酯鍵、糖苷鍵等形式存在,具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗炎等特性。近年來(lái),對(duì)酚酸物質(zhì)的存在形式的研究逐漸成為新的熱點(diǎn),研究表明紅樹(shù)植物中物質(zhì)的存在形式與極端條件下的抗壓有很大的關(guān)系,因此,研究秋茄、桐花樹(shù)中不同形式的酚酸及其生物活性對(duì)于更好的了解及開(kāi)發(fā)紅樹(shù)植物有重要的意義。本論文以秋茄和桐花樹(shù)為研究對(duì)象,從其不同部位(莖、樹(shù)葉、果實(shí))中提取出了游離、可溶酯化、可溶糖苷和不溶束縛四種存在形式的酚酸類物質(zhì),測(cè)定其總酚含量,并對(duì)四種形式酚酸物質(zhì)中酚酸的組成和分布進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:秋茄和桐花樹(shù)的游離、可溶酯化、可溶糖苷和不溶束縛四種存在形式的酚酸的總酚含量在 2.51～7.21,2.72～10.54,2.10～12.05 和 1.43～11.10 mg GAE/g DW范圍內(nèi)波動(dòng);不同存在形式的酚酸的單酚酸組成和含量在秋茄和桐花樹(shù)不同部位均存在差異,其中秋茄莖、樹(shù)葉和果實(shí)中游離形式的綠原酸含量突出,而桐花樹(shù)莖和樹(shù)葉中酯化形式的沒(méi)食子酸含量最高。從腫瘤化學(xué)預(yù)防角度,本論文采用DPPH分析、ABTS分析、FRAP分析、DNA氧化損傷保護(hù)不同的抗氧化活性評(píng)價(jià)體系評(píng)價(jià)了不同存在形式的酚酸抗氧化活性,并分析了總酚與抗氧化能力的相關(guān)性,研究了不同存在形式的酚酸對(duì)亞硝酸鹽、肝癌細(xì)胞SMMC-7721和小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16影響。結(jié)果表明,秋茄樹(shù)葉中四種存在形式的酚酸的抗氧化能力以可溶糖苷可溶酯化游離不溶束縛的順序遞減,而莖中則表現(xiàn)出完全相反的趨勢(shì),即不溶束縛游離可溶酯化可溶糖苷,秋茄果實(shí)中抗氧化活性最強(qiáng)的酚酸為可溶糖苷化酚酸,桐花樹(shù)莖和樹(shù)葉均為可溶酯化酚酸,與其對(duì)應(yīng)的總酚含量最高一致;不管是秋茄還是桐花樹(shù),各部分酚酸抗氧化活性均與其總酚含量均呈顯著正相關(guān);秋茄樹(shù)葉、莖和果實(shí)的不同存在形式的酚酸(1 mg/mL)對(duì)DNA氧化損傷的保護(hù)率在36.36±3.85%～56.44±1.54%范圍內(nèi)變動(dòng),而桐花樹(shù)樹(shù)葉和莖的四種酚酸(1 mg/mL)的保護(hù)率在45.05±4.26%～71.06±3.40%范圍內(nèi)變動(dòng);與VE比較,在模擬的胃液A、B中,不同形式的酚酸能有效清除亞硝酸鹽,在胃液A中清除效果普遍優(yōu)于胃液B;對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721抑制作用較強(qiáng)的酚酸為秋茄莖游離、酯化、糖苷化酚酸和秋茄樹(shù)葉酯化、糖苷化酚酸,IC50分別為234.88±18.17、176.69±12.75、215.12±23.16、145.12±13.45 和 125.25±20.27μg/mL,桐花樹(shù)莖和樹(shù)葉的酯化、糖苷化酚酸均對(duì)小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16有較強(qiáng)的抑制作用,IC50分別為 208.32±23.26、105.26±5.33 和 252.33±7.26 和 299.13±10.96 μg/mL。本論文進(jìn)一步研究了不同存在形式的酚酸對(duì)蘑菇酪氨酸酶單酚酶和二酚酶的影響。首先,對(duì)蘑菇酪氨酸酶單酚酶活性測(cè)定,結(jié)果表明秋茄樹(shù)葉的糖苷化酚酸、果實(shí)的酯化酚酸對(duì)蘑菇酪氨酸酶單酚酶有抑制作用,秋茄樹(shù)葉和莖的其它不同存在形式的酚酸和果實(shí)的游離酚酸均為激活作用。桐花樹(shù)樹(shù)葉和莖四種存在形式酚酸都造成了酶活不同程度的下降,樹(shù)葉游離酚酸的IC50值為39.24 μg/mL,莖不溶束縛、游離、酯化和糖苷化酚酸IC50值分別為72.25、93.31、99.72和117.05μg/mL。其次,對(duì)蘑菇酪氨酸酶二酚酶活性測(cè)定,結(jié)果表明有抑制作用且能達(dá)到IC50值的為秋茄樹(shù)葉、莖和桐花樹(shù)莖的游離酚酸,IC50值分別為95.34±4.21、96.26±5.07μg/mL、71.68±1.09μg/mL。綜上,通過(guò)本論文的研究,對(duì)紅樹(shù)植物秋茄、桐花樹(shù)酚酸類物質(zhì)在極端條件下存在形式,含量及其腫瘤化學(xué)預(yù)防作用和對(duì)酪氨酸酶的影響有了更深層次的了解,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用紅樹(shù)植物提供理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R284;R285
【圖文】：

秋茄和桐花樹(shù)酚酸類成分及其生物活性研究種碳骨架存在，由咖啡酸和奎尼酸生成的縮酚酸，又名咖啡鞣酸氧呼吸過(guò)程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物［３２］。綠甲酸、肉桂酸衍生物的結(jié)構(gòu)如圖２，３及表３。逡逑

秋茄和桐花樹(shù)酚酸類成分及其生物活性研究種碳骨架存在，由咖啡酸和奎尼酸生成的縮酚酸，又名咖啡鞣酸氧呼吸過(guò)程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物［３２］。綠甲酸、肉桂酸衍生物的結(jié)構(gòu)如圖２，３及表３。逡逑

本實(shí)驗(yàn)選取了邋１１種常見(jiàn)的酚酸標(biāo)品（５種羥基苯甲酸類衍生物、５種羥基肉逡逑桂酸類衍生物和綠原酸），運(yùn)用ＨＰＬＣ－ＰＤＡ技術(shù)，對(duì)秋茄和桐花樹(shù)中不同存在逡逑的酚酸進(jìn)行定性和定量分析。圖６為運(yùn)用上述梯度洗脫方法分離１１種酚酸標(biāo)準(zhǔn)逡逑品的色譜圖。從圖中可以看出，在梯度洗脫下，１１中酚酸標(biāo)品只有１０個(gè)峰。經(jīng)逡逑實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，４號(hào)峰因香草酸和咖啡酸的出峰時(shí)間相同而疊加在一起。因此，將咖逡逑啡酸和香草酸運(yùn)用等梯度洗脫的方法進(jìn)行單獨(dú)分離。圖７為沒(méi)食子酸、原兒茶酸、逡逑綠原酸、丁香酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸、水楊酸和肉桂酸９種酚酸標(biāo)品的分逡逑離色譜圖。圖８為咖啡酸和香草酸２中酚酸標(biāo)品的分離色譜圖。從圖７和圖８逡逑中可以看出，運(yùn)用兩種洗脫方法，１１種酚酸標(biāo)品得到了完好的分離。逡逑邐６邐逡逑０邋１＃

本文編號(hào)：2785765