【摘要】：目的:探討蛹蟲草多糖對H22荷瘤小鼠腫瘤細胞凋亡的影響及其分子機制。方法:本實驗分為正常組、構建H22荷瘤小鼠模型后隨機分為模型組、蛹蟲草多糖低劑量組、蛹蟲草多糖中劑量組、蛹蟲草多糖高劑量組以及環(huán)磷酰胺組,共6組。正常組與模型組每日腹腔注射生理鹽水,蛹蟲草多糖低劑量組按每日25mg/kg劑量腹腔注射給藥,蛹蟲草多糖中劑量組按每日50mg/kg劑量腹腔注射給藥,蛹蟲草多糖高劑量組按每日100mg/kg劑量腹腔注射給藥,環(huán)磷酰胺組每日30mg/kg劑量腹腔注射給藥,連續(xù)給藥10天,末次給藥24小時后處死小鼠,稱取體重,分別解剖胸腺以及脾臟并稱重;HE染色觀察腫瘤細胞狀態(tài);通過RT-PCR實驗檢測H22荷瘤小鼠腫瘤組織中Bcl2、Bax基因mRNA表達水平;通過Western Blot實驗檢測H22荷瘤小鼠腫瘤組織中Bc12、Bax以及Cleaved-Caspase-3蛋白表達水平。結果:1.H22荷瘤小鼠腋下全部成瘤,成瘤率為100%。2.與模型組相比,蛹蟲草多糖各組能夠明顯提高H22荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)。3.HE染色結果顯示,與模型組相比,蛹蟲草多糖各組腫瘤細胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)改變。4.RT-PCR結果顯示,與模型組相比,蛹蟲草多糖各組能夠明顯下調Bcl2基因mRNA的表達水平,上調Bax基因mRNA的表達水平。5.Western Blot結果顯示,與模型組相比,蛹蟲草多糖各組能夠明顯下調Bcl2蛋白表達水平,上調Bax蛋白和Cleaved-Caspase-3蛋白的表達水平。結論:1.蛹蟲草多糖能夠提高H22荷瘤小鼠胸腺指數(shù)。2.蛹蟲草多糖可能通過調控H22荷瘤小鼠腫瘤組織中Bcl2、Bax以及Cleaved-Caspase-3表達水平來發(fā)揮促進細胞凋亡的作用。
【學位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

各組和環(huán)磷酰胺組均表現(xiàn)出腫瘤細胞縮小，細胞核染色質致密濃縮、核分逡逑裂以及核碎裂等細胞凋亡特征，提示蛹蟲草多糖可能具有誘導腫瘤細胞凋逡逑亡的作用。見圖２。逡逑■■逡逑圖２各組荷瘤小鼠腫瘤組織ＨＥ染色結果（４００Ｘ）逡逑注；１：模型組；２：低劑量組；３：中劑量組；４：高劑量組；５：環(huán)磷酰胺組逡逑２９逡逑

黑龍江中醫(yī)藥大學碩士學位論文逡逑用。見圖１。逡逑■■■逡逑ＩＤＩＨＥ逡逑圖１各組荷瘤小鼠腫瘤組織ＨＥ染色結果逡逑注：１：模型組；２：低劑量組；３：中劑量組；４：高劑量組；５：環(huán)磷酰胺組逡逑４００倍視野下對各組腫瘤細胞ＨＥ染色結果進行觀察，模型組腫瘤細胞逡逑核體積較大，細胞質較少，細胞核質比較大。與模型組相比，蛹蟲草多糖逡逑各組和環(huán)磷酰胺組均表現(xiàn)出腫瘤細胞縮小，細胞核染色質致密濃縮、核分逡逑裂以及核碎裂等細胞凋亡特征，提示蛹蟲草多糖可能具有誘導腫瘤細胞凋逡逑亡的作用。見圖２。逡逑■■逡逑圖２各組荷瘤小鼠腫瘤組織ＨＥ染色結果（４００Ｘ）逡逑注；１：模型組；２：低劑量組；３：中劑量組；４：高劑量組；５：環(huán)磷酰胺組逡逑２９逡逑

０．３４７±０．１４６、０．２７３邋±邋０．０９３。與模型組相比，蛹蟲草多糖低、中、高劑量逡逑組以及環(huán)磷酰胺組腫瘤組織中Ｂｃｌ２基因ｍＲＮＡ相對表達量均有明顯下降逡逑（尸＜０．０５）。如表２，圖３。逡逑表２邐Ｈ２２荷瘤小鼠Ｂｄ２基因ｍＲＮＡ表達水平相對表達量Ｃ邋Ｂｃｌ２／（３－ａｃｔｉｎ）逡逑組別邐ｎ邐ｘ邋±邋Ｓ逡逑模型組邐１０邐０．８４７±０．１５６逡逑低劑量組邐１０邐０．７３２±邋０．０８４＊逡逑中劑量組邐１０邐０．４３８邋±０．１１７＊逡逑高劑量組邐１０邐０．３４７±０．１４６＊逡逑環(huán)磷酰胺組邐１０邐０．２７３±邋０．０９３＊逡逑注：與模型組比較，０．０５。逡逑模型組、蛹蟲草多糖低、中、高劑量組以及環(huán)磷酰胺組腫瘤組織屮Ｂａｘ逡逑基因邋ｍＲＮＡ邋的相對表達量分別為邋０．１５邋Ｕ０．０８２、０．２４３邋±０．１０６、０．３４８邋±０．１２４、逡逑０．４８３邋±邋０．１０３、０．６４１邋±邋０．０９３。與模型組相比，蚰蟲草多糖低、中、高劑量逡逑組以及環(huán)磷酰胺組腫瘤組織中Ｂａｘ基因ｍＲＮＡ相對表達最均有叨顯上升（尸逡逑＜０．０５）。見表邋３，圖邋３。逡逑表３邐Ｈ２２荷瘤小鼠Ｂａｘ基因ｍＲＮＡ表達水平相對表達量（Ｂａｘ／｜３－ａｃｔｉｎ）逡逑組別邐ｎ邐ｘ邋士邋Ｓ逡逑模型組邐１０邐０．１５１±０．０８２逡逑低劑量組邐１０邐０．２４３邋±０．１０６＊逡逑中劑量組邐１０邐０．３４８邋±０．１２４＊逡逑高劑量組邐１０邐０．４８３±０．１０３＊逡逑環(huán)磷酰胺組邐１０邐０．６４１邋±邋０．０９３＊逡逑注：與模型組比較

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李文婷;趙鳳鳴;戴紫函;周韜;李沐涵;吳勉華;;白花蛇舌草注射劑抑制人肝癌細胞SMMC-7721增殖及調控Bcl-2/CytC信號通路誘導線粒體凋亡[J];中成藥;2015年10期

2 徐小娟;蔡懿鑫;毛宇;徐芳;劉湘新;賀建華;;山慈菇多糖對荷H22肝癌小鼠的抗腫瘤機制研究[J];食品研究與開發(fā);2015年07期

3 張圣方;趙龍玉;趙鳳春;王雪;楊正友;;泰山蛹蟲草多糖對免疫抑制小鼠腸道菌群及分泌型免疫球蛋白A的影響[J];食品科學;2015年05期

4 陳忠杰;胡燕;;超高壓輔助提取蛹蟲草多糖工藝的研究[J];鄭州牧業(yè)工程高等專科學校學報;2015年01期

5 荊雪寧;邱波;戰(zhàn)文翔;武繼彪;;黃芪多糖誘導的樹突狀細胞疫苗對S180荷瘤小鼠Th1/Th2類細胞因子的影響[J];天津醫(yī)藥;2014年11期

6 徐云峰;劉松堅;;Bcl-2家族的研究進展[J];中國療養(yǎng)醫(yī)學;2014年10期

7 江海濤;吳雨龍;王仁雷;汪振炯;華春;;蛹蟲草基質多糖對酒精所致小鼠急性肝損傷的保護作用[J];食品科學;2014年13期

8 劉亞娟;王詩豪;張銘;華允芬;;鐵皮石斛多糖抗癌及免疫活性研究[J];廣州化工;2014年10期

9 占鵬飛;徐森華;施國方;李玉峰;馮建琴;費建明;;蛹蟲草多糖提取及其免疫功能研究進展[J];蠶桑通報;2014年02期

10 郭麗新;馮哲;齊彥;魏博洋;王世龍;趙敏;;蛹蟲草子實體多糖對腹水型肝癌移植瘤超微結構的影響[J];食品工業(yè)科技;2014年08期

本文編號：2784934