【摘要】：目的:探討蛹蟲草多糖對H22荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞凋亡的影響及其分子機(jī)制。方法:本實驗分為正常組、構(gòu)建H22荷瘤小鼠模型后隨機(jī)分為模型組、蛹蟲草多糖低劑量組、蛹蟲草多糖中劑量組、蛹蟲草多糖高劑量組以及環(huán)磷酰胺組,共6組。正常組與模型組每日腹腔注射生理鹽水,蛹蟲草多糖低劑量組按每日25mg/kg劑量腹腔注射給藥,蛹蟲草多糖中劑量組按每日50mg/kg劑量腹腔注射給藥,蛹蟲草多糖高劑量組按每日100mg/kg劑量腹腔注射給藥,環(huán)磷酰胺組每日30mg/kg劑量腹腔注射給藥,連續(xù)給藥10天,末次給藥24小時后處死小鼠,稱取體重,分別解剖胸腺以及脾臟并稱重;HE染色觀察腫瘤細(xì)胞狀態(tài);通過RT-PCR實驗檢測H22荷瘤小鼠腫瘤組織中Bcl2、Bax基因mRNA表達(dá)水平;通過Western Blot實驗檢測H22荷瘤小鼠腫瘤組織中Bc12、Bax以及Cleaved-Caspase-3蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.H22荷瘤小鼠腋下全部成瘤,成瘤率為100%。2.與模型組相比,蛹蟲草多糖各組能夠明顯提高H22荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)。3.HE染色結(jié)果顯示,與模型組相比,蛹蟲草多糖各組腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)改變。4.RT-PCR結(jié)果顯示,與模型組相比,蛹蟲草多糖各組能夠明顯下調(diào)Bcl2基因mRNA的表達(dá)水平,上調(diào)Bax基因mRNA的表達(dá)水平。5.Western Blot結(jié)果顯示,與模型組相比,蛹蟲草多糖各組能夠明顯下調(diào)Bcl2蛋白表達(dá)水平,上調(diào)Bax蛋白和Cleaved-Caspase-3蛋白的表達(dá)水平。結(jié)論:1.蛹蟲草多糖能夠提高H22荷瘤小鼠胸腺指數(shù)。2.蛹蟲草多糖可能通過調(diào)控H22荷瘤小鼠腫瘤組織中Bcl2、Bax以及Cleaved-Caspase-3表達(dá)水平來發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

各組和環(huán)磷酰胺組均表現(xiàn)出腫瘤細(xì)胞縮小，細(xì)胞核染色質(zhì)致密濃縮、核分逡逑裂以及核碎裂等細(xì)胞凋亡特征，提示蛹蟲草多糖可能具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋逡逑亡的作用。見圖２。逡逑■■逡逑圖２各組荷瘤小鼠腫瘤組織ＨＥ染色結(jié)果（４００Ｘ）逡逑注；１：模型組；２：低劑量組；３：中劑量組；４：高劑量組；５：環(huán)磷酰胺組逡逑２９逡逑

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文逡逑用。見圖１。逡逑■■■逡逑ＩＤＩＨＥ逡逑圖１各組荷瘤小鼠腫瘤組織ＨＥ染色結(jié)果逡逑注：１：模型組；２：低劑量組；３：中劑量組；４：高劑量組；５：環(huán)磷酰胺組逡逑４００倍視野下對各組腫瘤細(xì)胞ＨＥ染色結(jié)果進(jìn)行觀察，模型組腫瘤細(xì)胞逡逑核體積較大，細(xì)胞質(zhì)較少，細(xì)胞核質(zhì)比較大。與模型組相比，蛹蟲草多糖逡逑各組和環(huán)磷酰胺組均表現(xiàn)出腫瘤細(xì)胞縮小，細(xì)胞核染色質(zhì)致密濃縮、核分逡逑裂以及核碎裂等細(xì)胞凋亡特征，提示蛹蟲草多糖可能具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋逡逑亡的作用。見圖２。逡逑■■逡逑圖２各組荷瘤小鼠腫瘤組織ＨＥ染色結(jié)果（４００Ｘ）逡逑注；１：模型組；２：低劑量組；３：中劑量組；４：高劑量組；５：環(huán)磷酰胺組逡逑２９逡逑

０．３４７±０．１４６、０．２７３邋±邋０．０９３。與模型組相比，蛹蟲草多糖低、中、高劑量逡逑組以及環(huán)磷酰胺組腫瘤組織中Ｂｃｌ２基因ｍＲＮＡ相對表達(dá)量均有明顯下降逡逑（尸＜０．０５）。如表２，圖３。逡逑表２邐Ｈ２２荷瘤小鼠Ｂｄ２基因ｍＲＮＡ表達(dá)水平相對表達(dá)量Ｃ邋Ｂｃｌ２／（３－ａｃｔｉｎ）逡逑組別邐ｎ邐ｘ邋±邋Ｓ逡逑模型組邐１０邐０．８４７±０．１５６逡逑低劑量組邐１０邐０．７３２±邋０．０８４＊逡逑中劑量組邐１０邐０．４３８邋±０．１１７＊逡逑高劑量組邐１０邐０．３４７±０．１４６＊逡逑環(huán)磷酰胺組邐１０邐０．２７３±邋０．０９３＊逡逑注：與模型組比較，０．０５。逡逑模型組、蛹蟲草多糖低、中、高劑量組以及環(huán)磷酰胺組腫瘤組織屮Ｂａｘ逡逑基因邋ｍＲＮＡ邋的相對表達(dá)量分別為邋０．１５邋Ｕ０．０８２、０．２４３邋±０．１０６、０．３４８邋±０．１２４、逡逑０．４８３邋±邋０．１０３、０．６４１邋±邋０．０９３。與模型組相比，蚰蟲草多糖低、中、高劑量逡逑組以及環(huán)磷酰胺組腫瘤組織中Ｂａｘ基因ｍＲＮＡ相對表達(dá)最均有叨顯上升（尸逡逑＜０．０５）。見表邋３，圖邋３。逡逑表３邐Ｈ２２荷瘤小鼠Ｂａｘ基因ｍＲＮＡ表達(dá)水平相對表達(dá)量（Ｂａｘ／｜３－ａｃｔｉｎ）逡逑組別邐ｎ邐ｘ邋士邋Ｓ逡逑模型組邐１０邐０．１５１±０．０８２逡逑低劑量組邐１０邐０．２４３邋±０．１０６＊逡逑中劑量組邐１０邐０．３４８邋±０．１２４＊逡逑高劑量組邐１０邐０．４８３±０．１０３＊逡逑環(huán)磷酰胺組邐１０邐０．６４１邋±邋０．０９３＊逡逑注：與模型組比較

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2784934