發(fā)布時間：2020-08-07 10:37

【摘要】：蘆薈作為一種傳統(tǒng)的藥用植物,具有抗炎、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)、抗菌、抗腫瘤、抗病毒等多種藥理活性。目前亞洲常用的藥用蘆薈包括庫拉索蘆薈(Aloe barbadensis Miller)、中華蘆薈(A.vera L.var.chinensis(Haw.)Berger)、開普蘆薈(A.ferox Miller)和木立蘆薈(A.arborescens Miller)。蒽醌類小分子化合物和蛋白質(zhì)是蘆薈的兩類主要活性成分,但目前尚未有對四種藥用蘆薈中該兩類成分的系統(tǒng)比較研究。本論文首先采用HPLC及LC-MS分析比較四種藥用蘆薈中蒽醌類小分子化合物的差異,其次對蛋白質(zhì)進(jìn)行了凝膠電泳分析,并對四種藥用蘆薈中的差異表達(dá)蛋白進(jìn)行了質(zhì)譜鑒定及生物信息學(xué)分析,最后對蘆薈的活性提取物及單體成分進(jìn)行體外溶栓與纖溶的活性測定。本論文包括五個部分的內(nèi)容。論文的第一部分為文獻(xiàn)綜述,首先簡要介紹四種藥用蘆薈,然后總結(jié)了蘆薈中的主要活性成分,最后對蘆薈的生物活性進(jìn)行了概述。論文的第二部分為四種藥用蘆薈中蒽醌類小分子化合物的比較分析。首先對四種藥用蘆薈中的蒽醌類小分子化合物進(jìn)行總量測定,結(jié)果顯示庫拉索蘆薈中蒽醌類小分子化合物的含量最高。進(jìn)一步HPLC分析表明,四種藥用蘆薈中蒽醌類小分子化合物的成分與含量存在一定差異,這可能與品種、生長環(huán)境等有關(guān)。同時方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明針對蒽醌類小分子化合物建立的HPLC方法呈現(xiàn)出良好的線性、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性及靈敏度,適合四種藥用蘆薈中蒽醌類小分子化合物的常規(guī)分析與含量測定。而蒽醌類小分子化合物的LC-ESI-MS/MS鑒定表明Aloesin(蘆薈苦素)、Isoaloesin(異蘆薈苦素)、Aloenin A(蘆薈寧A)等化合物在只有這四種藥用蘆薈時可用于區(qū)分與鑒定這四種藥用蘆薈。論文的第三部分為四種藥用蘆薈蛋白質(zhì)的凝膠電泳分析。首先對適合雙向電泳的蘆薈蛋白質(zhì)提取方法進(jìn)行了比較,確定TCA/丙酮-飽和酚/SDS聯(lián)合抽提法為蘆薈中蛋白質(zhì)提取的最佳提取方法。SDS-PAGE分析結(jié)果顯示四種藥用蘆薈中的蛋白條帶數(shù)量和光密度曲線略有差異,部分蛋白存在表達(dá)差異。進(jìn)一步2-DE分析結(jié)果顯示四種藥用蘆薈中存在54個差異表達(dá)蛋白,其中有50個通過MALDI-TOF-MS成功鑒定,功能分析結(jié)果顯示庫拉索蘆薈中的類Ran結(jié)合蛋白1同系物C、肌動蛋白、NAD-依賴型蘋果酸脫氫酶和肉桂醇脫氫酶可能是產(chǎn)生庫拉索蘆薈葉片肥厚、含水量大的成分之一。中華蘆薈中的α-微管蛋白亞基和異黃酮還原酶相似蛋白可能是中華蘆薈葉片表面產(chǎn)生白色斑點(diǎn)的成分之一。木立蘆薈中的類生長素誘導(dǎo)蛋白PCNT-115異構(gòu)體1可能是木立蘆薈產(chǎn)生縱向生長而明顯高于其他蘆薈的成分之一。論文的第四部分為四種藥用蘆薈中活性成分的體外溶栓及纖溶活性測定。對四種藥用蘆薈中蛋白和總蒽醌提取物以及四個單體蒽醌化合物的體外溶栓與纖溶活性進(jìn)行評價。結(jié)果發(fā)現(xiàn)四種藥用蘆薈中總蛋白和總蒽醌提取物均表現(xiàn)出一定程度的體外溶栓與纖溶活性,并且活性大小與活性物質(zhì)的含量緊密相關(guān)。其中開普蘆薈中蛋白提取物的體外藥理活性明顯強(qiáng)于其他三種蘆薈,而庫拉索蘆薈中總蒽醌提取物的體外藥理活性明顯強(qiáng)于其他三種蘆薈;此外蘆薈苷A、蘆薈苷B、蘆薈苷(A/B)與蘆薈大黃素四個單體蒽醌化合物也顯示出一定的溶栓活性,且蘆薈苷A的活性最強(qiáng)�？傊�,這些結(jié)果可為四種藥用蘆薈的實(shí)際應(yīng)用提供一定的參考。論文的第五部分為結(jié)論與展望。本論文主要對四種藥用蘆薈中蒽醌類小分子化合物和蛋白質(zhì)進(jìn)行了系統(tǒng)比較分析,不僅豐富了蘆薈中該兩大類化合物的化學(xué)成分認(rèn)識,還可為蘆薈的鑒定提供一定參考。另一方面,本論文還對蘆薈的溶栓活性與纖溶活性進(jìn)行了評價,為蘆薈在溶栓方面的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：重慶大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284;R285
【圖文】：

重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文更尖銳的小齒，株體老化速度快，但葉片分生能力很強(qiáng)，生長速福建、廣東、廣西、云南、四川均有種植與栽培，其形貌特點(diǎn)如普蘆薈：又稱好望角蘆薈、青鱷蘆薈、非洲蘆薈，拉丁學(xué)名. ferox），原產(chǎn)于南非。葉片寬而短，皮層較厚，葉片邊緣有紅顏色呈深綠色，其特征是薄片呈半透明狀[14]。其形貌特點(diǎn)如圖立蘆薈：又稱木劍蘆薈、鹿角蘆薈、直立蘆薈、木本蘆薈、大loe arborescens Miller（A. arborescens），原產(chǎn)于南非，主要產(chǎn)于達(dá) 1-2 米，外形酷似直立的樹，葉片呈細(xì)長狀，長約 30 cm，寬約，背部突出，葉片邊緣呈鋸齒狀，葉片顏色呈灰綠色[15]。其形）所示。

重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文1.34±0.01 mg/g；而庫拉索蘆薈、中華蘆薈、開普蘆薈、木立蘆薈蒽醌粗提物中的蒽醌類小分子化合物的含量分別為 314.13±29.71 mg/g，232.41±31.24 mg/g，277.07±8.46 mg/g，267.83±2.12 mg/g，表明庫拉索蘆薈中蒽醌類小分子化合物的含量最高。2.3.2 蒽醌類小分子化合物 HPLC 分析庫拉索蘆薈、中華蘆薈、開普蘆薈、木立蘆薈及蘆薈苷 A、蘆薈苷 B 與蘆薈大黃素對照品的 HPLC 色譜圖如圖 2.2 所示。由此可看出四種藥用蘆薈中蒽醌類小分子化合物的成分存在明顯差異，同時同一成分在不同蘆薈中也存在明顯差異，該結(jié)果也證實(shí)了蘆薈中蒽醌類小分子化合物的成分及含量隨品種的變化而變化。1.001.201.40(e)

20圖 2.3 四種藥用蘆薈的總離子流色譜圖（a）庫拉索蘆薈；（b）中華蘆薈；（c）開普蘆薈；（d）木立蘆薈1-24：已知化合物；25-43：未知化合物Figure 2.3 The typical total ion chromatogram (TIC) chromatogram of four medicinal aloe(a) A. barbadensis; (b) A. vera var. chinensis; (c) A. ferox; (d) A. arborescens1-24: identified characterized compounds; 25-43: unknown compounds

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2783873