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東革阿里總黃酮抗氧化活性及多糖結(jié)構(gòu)表征與免疫調(diào)節(jié)活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-07 05:16
【摘要】:東革阿里(Eurycoma longifolia)為苦木科東革阿里屬植物,產(chǎn)自東南亞地區(qū)的一種傳統(tǒng)草藥。本論文以馬來西亞東革阿里樹根為原料,先提取純化出東革阿里總黃酮和多糖,再進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,最后用不同的生化指標(biāo)和細(xì)胞模型評(píng)估其生物活性,即東革阿里總黃酮的化學(xué)和CAA抗氧化活性、多糖的免疫調(diào)節(jié)活性和抗AAPH氧化溶血活性。選用AB-8大孔吸附樹脂分離東革阿里總黃酮,黃酮的吸附率為76.57%,經(jīng)凍干后得到東革阿里總黃酮樣品;然后通過紫外全波長(zhǎng)掃描和紅外吸收光譜初步分析了其所含官能團(tuán)和結(jié)構(gòu)特征;再對(duì)東革阿里總黃酮進(jìn)行的體外化學(xué)抗氧化能力測(cè)定,結(jié)果說明:在樣品濃度范圍內(nèi)對(duì)DPPH自由基、超氧自由基均具有較好的清除效果,對(duì)鐵離子具有較好的還原力;ORAC值和HepG2細(xì)胞抗氧化活性結(jié)果表明:東革阿里總黃酮ORAC值為2302.48μmol TE/g,EC_(50)值為192.27μg/mL,CAA值為為4.10μmol QE/100μmol of total flavonoid,與一般植物黃酮的ORAC值和細(xì)胞抗氧化活性對(duì)比,東革阿里總黃酮處于較優(yōu)抗氧化水平。采用水提醇沉法分離東革阿里粗多糖,其得率為6.93%;經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換柱層析和G-50凝膠柱層析進(jìn)一步純化出Ali-1組分,經(jīng)檢測(cè)樣品純度為95.42%。高效凝膠滲透色譜法測(cè)得Ali-1分子量為14.3Ku;紅外光譜掃描顯示Ali-1含有多糖特征吸收峰;單糖組成分析表明Ali-1其組成主要為阿拉伯糖、木糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸,其摩爾百分比分別為14.31%、57.69%、13.03%和14.86%;核磁共振分析及甲基化結(jié)果表明Ali-1組分的主鏈主要由1,4-Xylp糖苷鍵連接,并以1,2,4-Xylp糖苷鍵為分支點(diǎn)與支鏈相連接,其摩爾百分比分別為31.07%和22.68%;支鏈主要由1,2-GlcpA(12.99%)和1,2-Araf(9.71%)糖苷鍵組成,且支鏈末端以T-GalpA(12.30%)和T-Arap(11.25%)糖苷鍵終止。另外掃描電子顯微鏡觀察到Ali-1具有片狀外觀,并伴隨卵形顆粒隨機(jī)分布在其整個(gè)微觀結(jié)構(gòu)中。最后采用小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7模型證明Ali-1能促進(jìn)細(xì)胞分泌免疫因子NO、TNF-α和IL-6并伴隨一定程度的劑量效應(yīng),從而表現(xiàn)出較好的免疫調(diào)節(jié)活性。同時(shí)選用體外紅細(xì)胞抗氧化模型來評(píng)價(jià)Ali-1的抗氧化活性,在一定的樣品濃度范圍內(nèi),Ali-1可以保護(hù)人血紅細(xì)胞免受AAPH的損傷,也具有一定的抗氧化活性。
【學(xué)位授予單位】:華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R284.2;R285.5;O657.3
【圖文】:

阿里,植物成分,化學(xué)結(jié)構(gòu)式,原子數(shù)


表 1-1 東革阿里苦木素類化合物Table 1-1 The Quassinoids compound in Eurycoma longifoliaC 原子數(shù)目 化合物名稱 化學(xué)結(jié)構(gòu)式C17Laurycolactone 見圖 1-1CC18Eurycolactone B 見圖 1-1DC19EurycomalideA 見圖 1-1EC19Eurylactone 見圖 1-1FC19Longilactone 見圖 1-1GC19Eurycomalactone 見圖 1-1HC20Eurycomanone 見圖 1-1IC20Eurycomanol 見圖 1-1JC20Pasakbumin B 見圖 1-1KC20Hydroxyklaineanone 見圖 1-1L

酮類化合物,基本結(jié)構(gòu)


onoids)是植物經(jīng)光合作用后,植物所的 2-苯基色原酮為基形,見圖 1-2,主其在自然界分布范圍廣,目前文獻(xiàn)報(bào)道莖葉,如芹菜、銀杏葉、茶葉等;存在果實(shí)的皮中,如柑橘、檸檬皮;存在于黃酮類、異黃酮類、黃酮醇類、黃烷酮系的深入研究,發(fā)現(xiàn)其具有許多重要的增強(qiáng)免疫等[32-33]。

阿里,總黃酮含量,統(tǒng)計(jì)軟件,單因素方差分析


取東革阿里純化后黃酮凍干樣品 10mg,壓片后上機(jī)掃析。 3 組平行,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差(mean±SD)表示 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件的單因素方差分析(one-wayANOVA)和)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。論總黃酮含量的測(cè)定l(NO3)3-NaNO2的方法,得到如圖 2-1 所示的標(biāo)曲,同時(shí)130,y 為樣液吸光值,x 為總黃酮含量。線性相關(guān)系數(shù)關(guān)系良好。經(jīng)測(cè)定,東革阿里粗提液中總黃酮含量為

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2783540

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