【摘要】：目的1.通過(guò)建立宮頸癌荷瘤小鼠模型,觀察中藥清毒栓的抑瘤效果;2.探討中藥清毒栓對(duì)宮頸癌荷瘤小鼠外周血清INF-γ、TGF-β1及IL-10水平的影響,分析清毒栓的抑瘤機(jī)制;3.通過(guò)運(yùn)用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái),深入挖掘中藥治療宮頸HR-HPV的用藥規(guī)律,為臨床治療提供參考。方法:實(shí)驗(yàn)研究1.建立宮頸癌荷瘤小鼠模型,造模成功后,隨機(jī)分為模型對(duì)照組,低劑量中藥組及高劑量中藥組,中藥清毒栓連續(xù)灌胃處理28天,每周的第3、7天,分別測(cè)量并記錄各組小鼠的體重和瘤體大小。第28天,摘取腫瘤組織,測(cè)量瘤體重量,計(jì)算中藥組的抑瘤率。2.第28天,取各組小鼠的腫瘤組織進(jìn)行石蠟切片,HE染色,觀察中藥清毒栓對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖及細(xì)胞凋亡的影響。3.第28天,抽取各組小鼠外周血,并離心得到外周血清,用ELISA法檢測(cè)外周血清中INF-γ、TGF-β1及IL-10的水平。文獻(xiàn)研究檢索2008年1月1日-2018年12月31日,公開(kāi)發(fā)表在中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方中文期刊數(shù)據(jù)庫(kù)中關(guān)于中藥治療宮頸高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)感染的相關(guān)文獻(xiàn),運(yùn)用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析及挖掘,初步得到治療宮頸HR-HPV感染的中藥用藥規(guī)律、核心組合及備選新方。結(jié)果1.與宮頸癌模型對(duì)照組相比,低劑量藥物組和高劑量藥物組小鼠腫瘤體積均顯著減小,瘤重也顯著降低,且高劑量組下調(diào)更為顯著(與低劑量組相比,p0.01)。低劑量藥物組小鼠整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期內(nèi),體重?zé)o顯著差異。從第7d開(kāi)始,與宮頸癌模型對(duì)照組和低劑量藥物組相比,高劑量藥物組小鼠體重顯著增加(p0.05)。2.與宮頸癌模型對(duì)照組相比,低劑量藥物組和高劑量藥物組小鼠外周血血清INF-γ含量均有顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且高劑量藥物組中血清INF-γ含量顯著高于低劑量藥物組,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與宮頸癌模型對(duì)照組相比,低劑量藥物組和高劑量藥物組小鼠外周血血中Treg細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子TGF-β1和IL-10含量均明顯降低,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且高劑量藥物組中TGF-β1和IL-10含量顯著低于低劑量藥物組,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3.HE染色結(jié)果:宮頸癌對(duì)照組小鼠腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞排列較紊亂,細(xì)胞大小不均,核大漿少并可見(jiàn)有絲分裂。低劑量藥物處理之后,小鼠腫瘤組織結(jié)構(gòu)不清且區(qū)域性壞死,間質(zhì)明顯水腫,炎性細(xì)胞浸潤(rùn);高劑量藥物處理之后,小鼠腫瘤組織結(jié)構(gòu)不清且大面積區(qū)域性壞死,呈細(xì)胞水腫及核濃縮,深淺不同,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。4.中藥內(nèi)服治療宮頸HR-HPV感染的用藥規(guī)律分析:符合納入標(biāo)準(zhǔn)的共59首處方,115味中藥,使用頻次前十位的依次是:白術(shù)、薏苡仁、黃芪、黃柏、白花蛇舌草、甘草、黨參、土茯苓、蒼術(shù)、茯苓;藥性使用頻次按寒、溫、平、涼依次遞減,其中寒性藥物占主導(dǎo)作用。五味中頻次較前的是甘、苦、辛。藥物歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)中,使用頻次前三位的依次是脾、肝、胃,得到核心組合共12個(gè),推演出新處方6首。5.中藥外用治療宮頸HR-HPV感染藥規(guī)律分析:符合納入標(biāo)準(zhǔn)的共46首處方,85味中藥,使用頻次在10次及以上依次是黃柏、冰片、苦參、紫草、莪術(shù)。藥性使用頻次按寒、溫、平、涼依次遞減,其中寒性藥物占主導(dǎo)作用。五味中頻次較前的是甘、苦、辛。藥物歸經(jīng)使用頻次前三位的依次是脾、肝、胃。得到核心組合共10個(gè),推演出新處方5首。結(jié)論1.中藥清毒栓灌胃處理可以顯著降低宮頸癌荷瘤小鼠腫瘤體積和重量,中藥清毒栓具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。2.清毒栓可抑制荷瘤小鼠腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,從而起到治療作用,且濃度越高,療效越顯著。3.清毒栓能夠上調(diào)INF-γ水平,降低TGF-β1和IL-10含量,具有一定的抗病毒作用,可能逆轉(zhuǎn)微環(huán)境中的免疫抑制,待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。4.治療宮頸HR-HPV感染的口服中藥主要以扶正補(bǔ)虛聯(lián)合清熱解毒、清熱利濕類藥物為主,體現(xiàn)了扶正與祛邪相結(jié)合的治療思路;治療宮頸HR-HPV感染的外用藥物主要以清熱解毒涼血藥物為主,使用頻次較高的藥依次是黃柏、冰片、苦參、紫草、莪術(shù),為臨床遣方用藥提供參考。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

２．６．２第２８ｄ，與宮頸癌模型對(duì)照組相比較，低劑量藥物組和高劑量藥物組小鼠腫瘤體逡逑積均顯著減少，瘤重也顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜0．邋０１）。高劑量藥物組逡逑抑瘤率高于低劑量藥物組。（見(jiàn)表２、圖１－３）逡逑２８逡逑

圖２邋２８ｄ時(shí)各處理組小鼠的腫瘤外觀情況逡逑１０－１逡逑■邋Ｃｅｒｖｉｃａｌ邋ｃａｎｃｅｒ逡逑３邋８－邋－ｙ邐：邋ｉ邋Ｃｅｒｖｉｃａｌ邋ｃａｎｃｅｒ＋Ｌｏｗ邋Ｄｒｕｇ逡逑？邋ＨＨｊ邐ｆｌ邋Ｃｅｒｖｉｃａｌ邋ｃａｎｃｅｒ＋Ｈｉｇｈ邋Ｄｒｕｇ�。叮哌姡催姡掊义�

圖３邐２８ｄ時(shí)各處理組小鼠的腫瘤組織重量（＊＊Ｐ＜０．邋０１）逡逑

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