【摘要】：目的:本研究以張仲景《傷寒論》中記載的白芍甘草藥對為基礎(chǔ),應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和手段,對白芍甘草配伍的醇提取物進(jìn)行研究,通過薄層色譜與指紋圖譜法對其進(jìn)行鑒別及綜合評價,通過對芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、甘草苷、異甘草苷、甘草酸、異甘草素等指標(biāo)性成分進(jìn)行含量測定,建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),從而全面、綜合、有效地評價其質(zhì)量,為完善其質(zhì)量評價體系提供參考;通過對白芍甘草藥對醇提物的血清指紋圖譜及藥代動力學(xué)進(jìn)行研究,考察入血成分,并對相關(guān)指標(biāo)及藥代動力學(xué)參數(shù)進(jìn)行研究,闡述其在體內(nèi)代謝過程,探索其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。從而科學(xué)合理的闡明了白芍甘草配伍乙醇提取物為其最佳的極性提取部位,并且為其臨床應(yīng)用提供了更加科學(xué)合理的依據(jù)。材料與方法:1.采用硅膠G板,以三氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇:甲酸(40:5:10:0.2),環(huán)己烷:乙酸乙酯:冰醋酸(15:5:0.4),正丁醇:冰醋酸:水(20:3.5:4)為展開劑,以5%的香草醛硫酸溶液,10%的硫酸乙醇溶液為顯色劑,分別對白芍甘草藥對醇提物中的芍藥苷、甘草酸、甘草次酸進(jìn)行薄層鑒別。2.采用HPLC波長切換法對白芍甘草藥對醇提物的6種指標(biāo)性成分(芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、甘草苷、異甘草苷、甘草酸、異甘草素)進(jìn)行含量測定。3.采用HPLC波長切換法,建立白芍甘草藥對醇提物的指紋圖譜。4.采用HPLC波長切換法,對灌胃白芍醇提物、甘草醇提物、白芍甘草藥對醇提物的大鼠進(jìn)行腹主動脈取血,建立白芍醇提物、甘草醇提物、白芍甘草藥對醇提物的血清指紋圖譜。5.對用己烯雌酚和縮宮素造的原發(fā)性痛經(jīng)模型大鼠,灌胃白芍醇提物、甘草醇提物、白芍甘草藥對醇提物的大鼠進(jìn)行不同時間點眼底靜脈叢取血,采用HPLC色譜法,同時測定芍藥苷、甘草酸、甘草次酸成分,研究芍藥苷、甘草酸、甘草次酸的藥動學(xué)行為。結(jié)果:1.白芍甘草醇提物薄層色譜中,在與芍藥苷對照品相應(yīng)的位置上,顯示相同顏色斑點,陰性液無此斑點。置365 nm紫外燈下觀察,白芍甘草藥對醇提物色譜中與甘草次酸對照品色譜相應(yīng)位置上有相同橙黃色熒光顏色斑點出現(xiàn),陰性液沒有。置365 nm紫外燈下觀察,白芍甘草藥對醇提物色譜中與甘草酸對照品色譜相應(yīng)位置上有相同顏色斑點出現(xiàn),陰性液沒有。2.本實驗采用HPLC波長切換法測定6種指標(biāo)性成分含量,其中芍藥苷含量較高6.904~7.091 mg/g,異甘草素含量稍低0.2494~0.2568 mg/g,該方法穩(wěn)定可行,能夠使各指標(biāo)性成分均在最大吸收處被檢測。3.建立了白芍甘草藥對醇提物的指紋圖譜,取9個不同批次的白芍甘草藥對醇提物,依據(jù)指紋圖譜的整體性和特征性,共標(biāo)定了22個共有峰,其中9個峰來自白芍,15個峰來自甘草,有2個共有峰,結(jié)果顯示,白芍甘草藥對醇提物的指紋圖譜,有效成分的峰面積較大,而其它成分峰面積非常小。4.采用HPLC波長切換法建立白芍甘草藥對醇提物的血清指紋圖譜,在白芍甘草醇提物的含藥血清里共檢測出16個成分,其中14個峰來自甘草,8個峰來自白芍,6個共有峰,可以確定的成分有5個,通過對比對照品,這5個原型成分分別是芍藥內(nèi)酯苷,芍藥苷,甘草苷,甘草酸,甘草次酸。同樣色譜條件下,其中有6個峰在白芍甘草醇提物的體外供試品溶液沒有檢出(或低于檢出限),推測這6個成分可能為代謝產(chǎn)物。5.單獨灌胃白芍醇提物時Tmax為0.5 h,灌胃白芍甘草藥對醇提物時Tmax為0.625±0.21 h,單獨灌胃白芍醇提物時AUC0-t為9.239±0.47,Cmax為3.044±0.37,灌胃白芍甘草藥對醇提物時AUC0-t為7.751±0.52,Cmax為2.609±0.14,單獨灌胃白芍醇提物時T1/2為20.83±8.34 h,灌胃白芍甘草藥對醇提物時T1/2為18.71±5.43 h,單獨灌胃甘草醇提物時甘草酸的Tmax為4 h,灌胃白芍甘草藥對醇提物時Tmax為1 h,單獨灌胃甘草醇提物時甘草酸的AUC0-t為19.27±0.87,Cmax為2.665±0.23,T1/2為4.704±2.59 h,灌胃白芍甘草藥對醇提物時甘草酸的AUC0-t為11.72±0.60,Cmax為3.295±0.42,T1/2為20.56±13.92 h,單獨灌胃甘草醇提物時甘草次酸的AUC0-t為27.82±0.68,Cmax為2.628±0.26,T1/2為8.873±1.02 h,灌胃白芍甘草藥對醇提物時甘草次酸的AUC0-t為31.56±1.36,Cmax為3.064±0.24,T1/2為5.347±0.36 h。結(jié)論:通過對白芍甘草藥對醇提物科學(xué)的研究,建立了白芍甘草藥對醇提物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),探討了白芍甘草藥對醇提物的藥代動力學(xué)行為,從而使對白芍甘草藥對醇提物的研究達(dá)到科學(xué)、準(zhǔn)確、完善。為白芍甘草藥對醇提物的配伍機(jī)制及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究作出了積極的探索。
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5;R284
【圖文】：

05 mg 加甲醇定容至 25 ml液。醇 10 ml，振搖 5 min，過國藥典 2015 通則 0502）分l、2 ul 點于硅膠 G 薄層板，展開劑，展至 12 cm 左右醇提物的薄層色譜中，在點，陰性液無此斑點。

加甲醇定容至 25 液。粉末 0.5 g，置具塞錐形瓶中濾過，濾液蒸干，加 1.5 m吸取供試品溶液，對照品溶環(huán)己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（乙醇溶液，105℃加熱 5 m 紫外燈下觀察，白芍甘草置上有相同橙黃色熒光顏色

粉末 0.5 g，加 40 ml 乙醚置30 ml 甲醇超聲處理 30 min20 ml 正丁醇溶液提取 3 次解。吸取供試品溶液，對照品溶正丁醇：冰醋酸：水 （20:3溶液，105℃加熱 5 min。 紫外燈下觀察，白芍甘草上有相同顏色斑點出現(xiàn)，陰

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本文編號：2778534