【摘要】：中藥化學成分十分復雜,且具有生物活性的部位含量較少,所以中藥成分的分離純化是中藥研究的重要內容。而色譜法作為中藥成分分離純化的核心技術,仍解決不了中藥化學成分的系統(tǒng)性分離,本論文以五味子為研究對象,并以自主研發(fā)的二維反相液相色譜儀-制備色譜工廠結合色譜專家系統(tǒng)軟件,建立了一種系統(tǒng)性、高通量的分離制備方法,也為其他中藥成分的分離制備提供參考。本文以五味子木脂素粗提物為研究對象,以TLC、HPLC為檢測手段,并對萃取溶劑及洗脫比例進行研究,對五味子活性成分-木脂素類化合物,進行初步分離。結果表明,萃取是簡單有效的色譜前處理技術,萃取劑選擇乙酸乙酯和石油醚,體積比為1:1,可以將五味子木脂素初步分離富集。以五味子萃取樣品為研究對象,以HPLC為檢測手段,色譜柱選擇C_(18)柱(250×4.6mm;5μm),水和甲醇作為流動相,選定30個色譜峰,采集4個不同洗脫梯度下的保留時間,峰高等色譜信息,通過Xtool色譜分離專家系統(tǒng),進行第一維、第二維色譜分離方法開發(fā)的模擬與優(yōu)化,結果發(fā)現(xiàn),五味子樣品色譜峰的保留時間與XTool軟件模擬的梯度洗脫條件下的色譜峰的一致,證明色譜分離專家系統(tǒng)預測二維色譜分離的方法具有可行性。制備分離采用線性放大方法,結果得到進樣濃度為80mg/mL,進樣量為2mL,流速為21ml/min,此時色譜峰具有明顯分離。第一維分離柱選擇C_(18)(250×30mm;10μm),水和甲醇作為流動相,富集柱選擇C_(18)(80×30mm;10μm),輔助泵以水為富集稀釋液,以色譜保留時間為考查指標,對五味子木脂素進行重現(xiàn)性驗證,3次一維分離后的色譜保留時間的相對標準偏差均小于3%,說明二維反相液相色譜分離具有良好的重現(xiàn)性。最后,五味子木脂素進行第一維色譜分離制備,得到了9個可重復獲得的組分。將PCP切換至二維分離模式,分離柱選擇C_(18)(250×30mm;10μm),進樣量和流速與一維分離相同,水和甲醇作為二維分離的流動相,最后,第二維分離得到20個可重復獲得的組分。在PCP一維分離模式下,將10個純度達90%的二維分離樣品利用制備色譜工廠進一步分離純化,采用HPLC、核磁氫譜、碳譜等波譜學測試手段,鑒定得到了5個木脂素類單體化合物五味子醇甲、戈米辛A、五味子甲素、戈米辛N、五味子丙素。實驗結果表明,以自主研發(fā)的制備色譜工廠系統(tǒng)為核心,結合色譜分離專家系統(tǒng)軟件優(yōu)化五味子木脂素分離制備條件,建立的分離制備五味子木脂素有效部位及單體化合物的方法,具有良好的重現(xiàn)性,能夠實現(xiàn)五味子木脂素類活性成分的系統(tǒng)性、可重復的分離制備。對五味子木脂素的分離純化及其它中藥成分的分離制備具有重要的意義。
【學位授予單位】：大連工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R284.2
【圖文】：

圖 1-1 PCP 一維分離(A)和二維分離(B)模式圖Figure 1-1 First dimensional pattern diagram (A) and second dimensional pattern diagram (B) of PC中藥化學成分復雜，其活性成分的分離一直是中藥研究的重點，制備型高效液相譜在載樣量大、分離度高的基礎上實現(xiàn)了高通量制備，而 PCP 系統(tǒng)為中藥、天然藥物供了可連續(xù)化、自動化運行的色譜分離平臺。先進的二維色譜分離-富集模式縮短了藥復雜成分的分離的過程，提高了工作效率。本論文選取五味子木脂素為研究對象探了自主研發(fā)的反相二維色譜儀-制備色譜工廠結合色譜專家系統(tǒng)模擬軟件對五味子木素類化學成分的分離制備方法1.3 五味子化學成分和分離方法研究進展五味子是木蘭科植物五味子Schisandra chfnensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果實、稱“北五味子”。是一味著名的中藥，有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心的功效。能夠

11圖 1-2 五味子木脂素母核結構及化合物Figure 1-2Figure 1-1 the structure and compound of lignans from Schisandra chinensis1.3.1.2 有機酸類五味子果實中含有豐富的檸檬酸、酒石酸和多種脂肪酸類等。如王麗微等[60]從五味子中分離得到了檸檬酸，胥春霞等[61]采用硅膠和重結晶的方法從五味子中得到了棕櫚酸，并首次分離得到了白樺脂酸。五味子中的有機酸類化合物的結構如圖1-3所示，由于五味子有機酸類化合物具有天然、無毒、無污染等優(yōu)點，通常應用于食品工業(yè)的矯味劑，早期在醫(yī)藥行業(yè)也有報道過其酸性成分能使小鼠氣管腺中中性粘多糖和酸性粘多糖減少，具有祛痰和鎮(zhèn)咳、血管舒張等作用[62]。

[61]采用硅膠和重結晶的方法從五味子中得到了棕櫚酸，并首次分離得到了白樺脂酸。五味子中的有機酸類化合物的結構如圖1-3所示，由于五味子有機酸類化合物具有天然、無毒、無污染等優(yōu)點，通常應用于食品工業(yè)的矯味劑，早期在醫(yī)藥行業(yè)也有報道過其酸性成分能使小鼠氣管腺中中性粘多糖和酸性粘多糖減少，具有祛痰和鎮(zhèn)咳、血管舒張等作用[62]。

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 張慶;茹慶國;林紅梅;劉艷;康倩;李輝;吳清;;基于PLSR分析當歸揮發(fā)油分子蒸餾餾分中化學成分與抗炎作用的相關性[J];環(huán)球中醫(yī)藥;2015年10期

2 姜恩平;李賀;于春艷;朱偉;;五味子乙素通過p38MAPK信號通路對結腸癌SW480細胞凋亡和侵襲的影響[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2015年04期

3 楊擎;曲曉波;李輝;金道明;律廣富;王建瑋;王保森;李娜;;五味子化學成分與藥理作用研究進展[J];吉林中醫(yī)藥;2015年06期

4 黃競怡;佟玲;丁黎;;二維液相色譜在中藥分析的應用[J];藥學進展;2015年05期

5 康婷;唐珊;張怡;謝晉;張之彌;劉華;;五味子對離體蛙心收縮力的影響及其作用機制的初探[J];四川生理科學雜志;2015年02期

6 劉芷;賈英;趙旭;張晨寧;吳博;畢開順;;五味子的UPLC指紋圖譜研究[J];中草藥;2014年11期

7 于曉禮;皮子鳳;胡秀麗;宋鳳瑞;劉志強;;高速逆流色譜結合電噴霧多級串聯(lián)質譜方法高效分離制備、鑒定五味子木脂素類成分[J];藥學學報;2014年01期

8 沈保家;秦昆明;劉啟迪;蔡皓;劉曉;蔡寶昌;;二維色譜技術及其在中藥領域中的應用[J];中國科學:化學;2013年11期

9 馬鴻雁;朱雅玲;杜憬生;李娟;楊全;;苦參中黃酮類成分薄層色譜鑒別研究[J];中國現(xiàn)代中藥;2013年08期

10 史琳;王志成;馮敘橋;;五味子化學成分及藥理作用的研究進展[J];藥物評價研究;2011年03期

本文編號：2777203