【摘要】：衰老一直是人們研究的重要方向,特別是抗衰老,更是從古至今研究的熱點(diǎn)。近年來(lái),衰老被證明主要由自由基所引起,與腸道菌群密切相關(guān)。而且腸道微生態(tài)的紊亂與衰老、疾病等密不可分。多糖作為膳食中含量豐富、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的成分之一,主要通過(guò)進(jìn)入胃腸道被微生物分解利用。因此,多糖對(duì)于維持腸道菌群穩(wěn)態(tài)等具有重要意義。而羊棲菜(Sargassum fusiforme)是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的藥食兩用海藻,從中提取的羊棲菜多糖主要包括褐藻膠、褐藻糖膠和褐藻淀粉,其中對(duì)褐藻糖膠活性的研究最為廣泛。近年來(lái)研究揭示,羊棲菜多糖是一種非常有潛力的天然抗氧化藥物,但在延緩衰老方面的研究較少,尤其在腸道菌群方面的研究罕有報(bào)道。本文以羊棲菜多糖為研究對(duì)象,通過(guò)鑒定其抗氧化活性,及對(duì)果蠅壽命的影響和對(duì)衰老小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)作用來(lái)解析羊棲菜多糖抗衰老的作用機(jī)制。結(jié)果顯示(1)喂食羊棲菜多糖數(shù)日,發(fā)現(xiàn)在氧化損傷環(huán)境下羊棲菜多糖可顯著提高果蠅的生存率、平均壽命等。而且各種與抗氧化相關(guān)的酶活都有所提升。Nrf2基因表達(dá)提高,Keap1基因表達(dá)降低,且不同程度的上調(diào)了下游抗氧化基因如SOD、GCLC、HO-1等的表達(dá),但存在性別差異,并清除果蠅體內(nèi)MDA的含量,增加機(jī)體抗氧化功能。(2)通過(guò)對(duì)不同組小鼠的腸蛋白和基因的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)與衰老小鼠相比,多糖給藥組小鼠的Nrf2及相關(guān)下游基因的表達(dá)顯著上調(diào),說(shuō)明羊棲菜多糖可通過(guò)激活Nrf2/ARE信號(hào)通路來(lái)保護(hù)衰老過(guò)程中的小腸。(3)用高通量測(cè)序?qū)π∈蟮哪c道菌群16SRNA測(cè)序并分析,發(fā)現(xiàn)喂食羊棲菜多糖不僅提高了衰老小鼠腸道微生物的多樣性,而且顯著降低老年小鼠中的厚壁菌門與擬桿菌門的相對(duì)豐度(F/B比值)。此外,還增加了腸道中部分有益菌(如:Atopostipes,Clostridium sensu stricto等)的豐度,同時(shí)抑制了有害菌(如:Thaumarchaeota,Cyanobacteria phyla等)的大量滋生。綜上所述,羊棲菜多糖具有較強(qiáng)的抗氧化活性,不僅延長(zhǎng)了果蠅的壽命,而且改善了衰老小鼠腸道菌群的組成。因而,推測(cè)改善腸道菌群結(jié)構(gòu)是羊棲菜延緩衰老的作用機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：溫州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：Q946;R285
【圖文】：

多糖結(jié)構(gòu)都非常的復(fù)雜加上它們種類的多樣。因此，人們對(duì)于不同解機(jī)制，腸道菌群在機(jī)體中的調(diào)控作用等方面的認(rèn)識(shí)才剛剛起步，究工作對(duì)其進(jìn)行深入研究。5 氧化劑—百草枯百草枯（paraquat，PQ）別名克蕪蹤、對(duì)草快，化學(xué)名為 1,10-二吡啶摀二氯化物。其不僅是一種非選擇性除草劑，而且是實(shí)驗(yàn)室常應(yīng)激的氧化劑。其主要分子機(jī)制是基于氧化還原反應(yīng)及細(xì)胞內(nèi)所產(chǎn)反應(yīng)[75]。如圖 1-1 所示，當(dāng)百草枯進(jìn)入體內(nèi)后，首先通過(guò)氧化煙酰苷磷酸 （NADPH）和巰基，前者產(chǎn)生 PQ 自由基，后者抑制了 G谷胱甘肽）的還原。隨后 PQ 自由基與氧反應(yīng)，產(chǎn)生大量的超氧陰S）和過(guò)氧化氫[76]。大量的 ROS 積累以及還原劑的消耗，使得機(jī)化應(yīng)激環(huán)境中，最終導(dǎo)致機(jī)體損傷。其中 ROS 積累會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)，蛋白的損傷。而且PQ引起的氧化損傷已在各種生物體中得到證實(shí)，如黑鼠[79,80]。而且 PQ 廣泛用于黑腹果蠅的氧化應(yīng)激損傷模型[81,82]。

2.3.1 氧化應(yīng)激損傷模型的建立及百草枯（PQ）濃度的確定生存曲線（Evidence-basedmedicine, EBM）是檢驗(yàn)百草枯對(duì)果蠅壽命影響的最直接體現(xiàn)。隨著百草枯的濃度增加，雌雄果蠅存活率顯著降低如圖2-2，雌雄樣 品 糖含量/% 糖醛酸含量/% 蛋白質(zhì)含量/%SFPS 81.93 4.27 2.39樣 品 分子量/Da單糖組成/%Glc Rha Xyl GlcA Man Fuc Gal GalASFPS 6.7 103<MW<3.1 10511.33 1.77 12.10 1.11 3.50 52.89 11.51 2.61

圖 2-3 羊棲菜多糖（SFPS）對(duì)黑腹果蠅壽命曲線的影響Fig.2-3 Effect of Effect of SFPS on the Cum survival of Drosophila表 2-5 羊棲菜多糖（SFPS）對(duì)黑腹果蠅最高壽命和平均壽命的影響Tab.2-5 Effect of SFPS on the most lifespan and mean lifespan of Drosophila.2.3.3 抗氧化酶的活性

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2775804