【摘要】:目的:通過建立重型顱腦損傷大鼠模型,觀察神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況,神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6含量的改變,探討甲狀腺素對重型顱腦損傷大鼠神經(jīng)組織修復(fù)的干預(yù)作用。方法:采用隨機(jī)數(shù)字表法將108只SD雄性大鼠隨機(jī)分為6組(18只/組):正常對照組、假手術(shù)組、模型非用藥組、左甲狀腺素鈉片低劑量組、左甲狀腺素鈉片中劑量組、左甲狀腺素鈉片高劑量組。造模成功后6h對大鼠行神經(jīng)功能缺損評分,分別給各用藥組大鼠2ml灌胃,每天一次;正常對照組、假手術(shù)組、模型非用藥組大鼠用等量生理鹽水于相同時間灌胃,每天一次。各組分別在灌胃后第24h、72h、168h三個時間段取材,每個時間段每組隨機(jī)取6只大鼠。取材時先于心臟采血4?m L,分別用NSE、IL-6ELISA試劑盒檢測NSE、IL-6;再經(jīng)內(nèi)固定后斷頭取腦,做成切片,用TUNEL試劑盒檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡,余切片用HE染色觀察腦組織的病理變化。結(jié)果:(1)模型非用藥組及各用藥組大鼠的神經(jīng)功能缺損評分值都大于2分。模型非用藥組與假手術(shù)組比較,神經(jīng)功能缺損評分明顯升高(P0.05);左甲狀腺素鈉片中劑量組在168h的神經(jīng)功能缺損評分明顯低于模型非用藥組(P0.05);左甲狀腺素鈉片高劑量組在72h、168h的神經(jīng)功能缺損評分明顯低于模型非用藥組(P0.05)。(2)病理切片顯示正常組、假手術(shù)組大鼠大腦皮質(zhì)細(xì)胞排列均勻,胞核呈藍(lán)色、且輪廓清楚,未看到神經(jīng)元變性壞死及炎癥細(xì)胞的浸潤,組織未見明顯的水腫。模型非用藥組、左甲狀腺素鈉片低劑量組大鼠大腦皮質(zhì)可看到細(xì)胞排列紊亂,大量細(xì)胞核固縮、炎癥細(xì)胞浸潤,可見明顯的組織細(xì)胞水腫及神經(jīng)元壞死。左甲狀腺素鈉片中、高劑量組大鼠大腦皮質(zhì)可見少量的細(xì)胞核固縮、炎癥細(xì)胞浸潤,部分細(xì)胞水腫。(3)重型顱腦損傷大鼠傷后出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞凋亡(P0.05),這種凋亡持續(xù)至168h。左甲狀腺素鈉片中、高劑量組大鼠的神經(jīng)細(xì)胞凋亡在傷后24h即明顯減少(P0.05),左甲狀腺素鈉片低劑量組大鼠的神經(jīng)細(xì)胞凋亡在168h才開始明顯減少(P0.05)。左甲狀腺素鈉片中劑量組與高劑量組在168h相比較,高劑量組的神經(jīng)細(xì)胞凋亡減少的更明顯(P0.05)。(4)大鼠血清NSE的含量在重型顱腦損傷后24h即明顯升高(P0.05),一直持續(xù)至168h。左甲狀腺素鈉片中、高劑量組大鼠的NSE含量在72h開始明顯降低(P0.05)。(5)大鼠血清IL-6的含量在重型顱腦損傷后24h即明顯升高(P0.05),一直持續(xù)至168h。左甲狀腺素鈉片中、高劑量組大鼠的IL-6含量在72h開始明顯降低(P0.05)。結(jié)論:甲狀腺素可通過降低神經(jīng)細(xì)胞凋亡、抑制NSE及IL-6含量的升高而對重型顱腦損傷大鼠神經(jīng)組織的修復(fù)發(fā)揮作用,其修復(fù)作用以中、高劑量明顯。目的:通過觀察重型顱腦損傷大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況,NSE、IL-6含量的變化,探討淫羊藿對重型顱腦損傷大鼠神經(jīng)組織修復(fù)的干預(yù)作用。方法:采用隨機(jī)數(shù)字表法將108只SD雄性大鼠隨機(jī)分為6組(18只/組):正常對照組、假手術(shù)組、模型非用藥組、淫羊藿水提取物低劑量組、淫羊藿水提取物中劑量組、淫羊藿水提取物高劑量組。造模成功后6h對大鼠行神經(jīng)功能缺損評分,分別給各用藥組大鼠2ml灌胃,每天一次;正常對照組、假手術(shù)組、模型非用藥組大鼠用等量生理鹽水于相同時間灌胃,每天一次。各組分別在灌胃后第24h、72h、168h三個時間段取材,每個時間段每組隨機(jī)取6只大鼠。取材時先于心臟采血4?m L,分別用NSE、IL-6ELISA試劑盒檢測NSE、IL-6;再經(jīng)內(nèi)固定后斷頭取腦,做成切片,用TUNEL試劑盒檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:(1)模型非用藥組及各用藥組大鼠的神經(jīng)功能缺損評分值均大于2分。模型非用藥組與假手術(shù)組比較,神經(jīng)功能缺損評分明顯升高(P0.05);淫羊藿水提取物高劑量組在168h的神經(jīng)功能評分明顯低于模型非用藥組(P0.05)。(2)重型顱腦損傷大鼠傷后出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞凋亡(P0.05),這種凋亡持續(xù)至168h。淫羊藿水提取物中、高劑量組大鼠的神經(jīng)細(xì)胞凋亡在傷后24h即明顯減少(P0.05),淫羊藿水提取物低劑量組大鼠的神經(jīng)細(xì)胞凋亡在168h才開始明顯減少(P0.05)。淫羊藿水提取物中劑量組與低劑量組在168h比較,淫羊藿水提取物中劑量組大鼠的神經(jīng)細(xì)胞凋亡減少的更明顯(P0.05)。(3)大鼠血清NSE的含量在重型顱腦損傷后24h即明顯升高(P0.05),一直持續(xù)至168h。淫羊藿水提取物高劑量組大鼠的NSE含量在24h即開始明顯降低(P0.05),且與時間呈正相關(guān);淫羊藿水提取物低劑量、中劑量組大鼠的NSE含量在72h才開始明顯降低(P0.05),且與時間呈正相關(guān)。(4)大鼠血清IL-6的含量在重型顱腦損傷后24h即明顯升高(P0.05),一直持續(xù)至168h。淫羊藿水提取物高劑量組大鼠的IL-6含量在72h開始明顯降低(P0.05),且與時間呈正比;淫羊藿水提取物中劑量組大鼠的IL-6含量在168h才開始明顯降低(P0.05);雖然淫羊藿水提取物低劑量組大鼠IL-6的濃度與模型非用藥組比較,無明顯差異(P0.05),但其含量隨著時間的延長呈明顯的下降趨勢(P0.05)。結(jié)論:淫羊藿可通過降低神經(jīng)細(xì)胞凋亡、抑制NSE及IL-6含量的升高而對重型顱腦損傷大鼠神經(jīng)組織的修復(fù)發(fā)揮作用,其修復(fù)作用與其濃度及用藥時間呈正比。
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R285.5
【圖文】:
16圖 1 HE 染色 100 倍光鏡大鼠腦組織病理表現(xiàn):A:正常對照組;B:假手術(shù)組;C:模型非用藥組 72h;D:左甲狀腺素鈉片低劑量組 72h;E:左甲狀腺素鈉片中劑量組 72h;F:左甲狀腺素鈉片高劑量組 72hFigurel 1 HE staining×100,The result of brain tissue pathology examinations: A: normal controlgroup;B: sham operation group;C: model group at 72h;D: Levothyroxine Sodium Tablets low dose group at
【參考文獻(xiàn)】
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9 隋靖U
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