【摘要】：山楂是一種大宗常用中藥材,為薔薇科植物山楂Crataegus pinnatifida Bge.及其變種山里紅Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.的干燥成熟果實(shí)。臨床上,山楂常用炮制品包括:生山楂、炒山楂、焦山楂和山楂炭,其性味、功效和主治顯著不同。通過檢索發(fā)現(xiàn),生山楂廣泛用于具有減肥功效的保健食品。那么,山楂其它炮制品是否具有減肥功效,至今尚無系統(tǒng)報道。本文首次利用肥胖動物模型并結(jié)合體外胰脂肪酶抑制實(shí)驗(yàn)對不同炮制品進(jìn)行了減肥功效評價,并對比分析了山楂不同炮制品主要黃酮類成分的含量差異。主要內(nèi)容如下:(1)利用生山楂飲片,按照傳統(tǒng)工藝制備了山楂不同炮制品,應(yīng)用HPLC法測定了其水提液中兒茶素、表兒茶素、牡荊素鼠李糖苷、金絲桃苷、槲皮素和異槲皮素含量,發(fā)現(xiàn)生山楂中相關(guān)成分含量分別為0.238%、0.029%、0.021%、0.393%、0.206%、0.064%,經(jīng)炮制其含量顯著下降,炒山楂分別下降了 13.31%、44.22%、11.25%、41.90%、42.73%、14.33%,焦山楂下降了25.05%、54.07%、31.74%、77.52%、94.74%、68.53%,山楂炭下降了 25.86%、82.03%、55.05%、82.72%、95.66%、72.34%。(2)利用體外抑制活性實(shí)驗(yàn),對比測定了山楂不同炮制品對胰脂肪酶的抑制活性。發(fā)現(xiàn)山楂不同炮制品對胰脂肪酶均有一定的抑制活性,其中焦山楂抑制活性最強(qiáng),其IC50為3.105mg/mL。(3)以正常飼料飼喂大鼠為正常對照,以高脂飼料飼喂制備單純性肥胖大鼠模型,分別灌胃生山楂、炒山楂、焦山楂和山楂炭,評價其對模型大鼠的影響,以奧利司他和辛伐他汀為陽性對照藥物。每周分兩次測定大鼠體重及攝食量,觀察大鼠一般狀態(tài),30天后測定Lee's指數(shù),取樣測定體脂率、臟器指數(shù),取血凝固后取血清測定TG、TC、LDL-C、HDL-C的含量及胰脂肪酶活性,取腎周、附睪脂肪進(jìn)行HE染色,取肝臟、胰臟進(jìn)行油紅O染色。實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠整體精神狀態(tài)良好,攝食量正常并未出現(xiàn)明顯差異,與模型組相比,山楂不同炮制品均能顯著減緩大鼠體重增長,其中焦山楂和山楂炭分別降低了31.2%、33.3%;焦山楂能顯著降低大鼠的Lee's指數(shù),降低了7.3%;炒山楂、焦山楂能顯著減少大鼠體內(nèi)脂肪堆積,分別降低了42.7%、45.5%;炒山楂、焦山楂能顯著降低大鼠的肝臟指數(shù),分別降低了 12.9%、13.9%,以及其脾臟指數(shù)分別降低了22.7%和18.2%。與模型組相比,焦山楂、山楂炭能極顯著降低大鼠血清中TC、TG含量,分別降低了31.3%、29.5%和38.4%、40.4%,且使大鼠血清中LDL-C的含量分別降低了36.5%、38.5%;各山楂給藥組均能極顯著地抑制胰脂肪酶活性,最高降低率達(dá)到95.4%。與模型組相比,同一視野下,山楂不同炮制品組大鼠脂肪細(xì)胞較小且數(shù)量多,其中尤以焦山楂效果最為顯著,其腎周、附睪脂肪細(xì)胞直徑分別降低了34.4%、21.0%;各給藥組肝臟中脂滴含量明顯減少,尤以焦山楂作用顯著,其脂滴含量降低了96.8%。本文結(jié)果說明:山楂不同炮制品均具有一定的肥胖抑制活性,其中焦山楂活性最強(qiáng),建議相關(guān)減肥保健食品或藥品選用焦山楂。根據(jù)炮制對山楂中六種黃酮類成分的影響,黃酮類成分可能與山楂減肥功效無關(guān)或與其降解產(chǎn)物有關(guān),建議進(jìn)一步對其進(jìn)行深入研究,以揭示其活性成分及其變化規(guī)律。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

Ｎ－末端含有的催化中心主要包括絲氨酸１５２、組氨酸２６３和天冬氨酸１７６。其中，逡逑絲氨酸１５２不管是在催化過程還是活性屮心的組成上都是必需的胰脂肪酶立逡逑體結(jié)構(gòu)見圖１－１。逡逑脂肪酶對腸道中脂肪的消化和吸收過程有著舉足輕重的作用。在人類的日常逡逑飲食中，大約９０％脂肪來源于混合甘油三酯，但是混合甘油三酯不能被人體直接逡逑吸收利用，首先要經(jīng)歷一個有胰脂肪酶催化的脂肪水解的過程使其轉(zhuǎn)化為小分子逡逑的甘油單酯和脂肪酸等后，才能被吸收入血，再被人體利用，多余的被儲存起來，逡逑成為其他組織利用的能量，能量攝入過度就會造成脂肪堆積，最終導(dǎo)致肥胖［８４］。逡逑１４逡逑

逑荊素鼠李糖苷、金絲桃苷、異槲皮素、槲皮素混合對照品溶液�；旌蠘�(biāo)準(zhǔn)品以及逡逑不同山楂樣品的色譜圖見圖２－１、２－２。與生山楂中各峰面積進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)６種逡逑成分均呈下降趨勢，其含量變化見表２－３。逡逑Ｑ０３－邐ｐ逡逑Ｑ０８－逡逑＝邐Ｅ逡逑。必邐Ａ邋１邐Ｃ邋Ｄ邋ＩＩ逡逑0ｇ0－邋邐ＩＬａ邐Ａ邋ｉｌ邐－—＿—邐邐邐逡逑ａｋ＇＇邋＇邋？ｚｍ邋３．００邋＇邋Ｖｏｃ邋＇＇邋ｅｃｏ邋？邋ｉｇｏ邋ｓｈｄ邋ｉｃｇｇ邋＇＇邋ｕ＇0２邋；２00邋＇邋＇邋ｔ邋ｓｍ邋？Ｖｉｉ邋ｔｓｅｃｉ邋＇邋ｆａｍ逡逑圖２－１黃酮混合標(biāo)準(zhǔn)品指紋圖譜逡逑注：圖中各色譜峰分別表示Ａ：兒茶素，Ｂ：表兒茶素，Ｃ：牡荊素鼠李糖苷，Ｄ：金絲桃苷，逡逑Ｅ：槲皮素，Ｆ：異槲皮素。（見實(shí)驗(yàn)記錄０００５５８５１－ｐ９５）逡逑？一邐Ｉ邐１邐Ｉ邋羼邐Ａ逡逑，；；■－：■邋－邋■邋＇邋．邋．邋－邋■逡逑ｉ邐ｖ邐（逡逑２逡逑■邋＊？？逡逑？？ＪＷ？邐＂＂邋ｍＩｗ＊邐＊邐＜？＊？＊？邐＊邋；＊邋＊＊ｗ邐ｓ－Ｔ＆ｏ逡逑Ｉ邋１邐ｈ邋ｉｓ邐Ｂ逡逑ｉ＇：逡逑－ｒ？邋ｗ？邋＊？－逡逑？？００邐Ｊｆ邋￥？Ｃ？邐－＊邋ｆｌｒ＊？邐Ｍ邋ＣＪＫ．Ｖ邐Ｍ邋＜Ｍ？邐ｗ0ｔ邋ＯＫ＞邐＊邋ｃ？＞邐？－？％？？＊邐？＊ｋＶ＊ｔ？逡逑—：邐Ｉ，邋１邐，，邐“，，、邐ｃ逡逑？邋？＊＞￣邋？逡逑？？￡？0：邐１１邋１１邋？（邋Ｉｍ＊邐１邋＂￣￣？＜？＊？？邐＊邋ｓ－ｋ＊？？邋１邐＊－？邋＇？＊0邐＊邐

濃度（Ｕｍｏｌ／ｍｌ）為橫坐標(biāo)（Ｚ），其吸光度（ＯＤ）為縱坐標(biāo)（Ｆ）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑并進(jìn)行線性回歸計算，得到回歸方程為Ｆ＝８．３２２８Ｘ－０．００７４，邋Ｒ２＝０．９９９８。表明ｐＮＰ逡逑在０．０２＾Ｍ？０．５０ｐＭ與吸光度具有良好的線性關(guān)系。結(jié)果見圖３－１。逡逑５邋邐邐邐邐邐邐逡逑ｙ＝８．３２２７８ｘ－０．００７４逡逑４邐Ｒ２＝０．９９９８邐９逡逑Ｉ邋３邐＂逡逑Ｓ邐，聲逡逑Ｂ邋２逡逑＜邋＾逡逑Ａ邐ｙ－逡逑１邐ｒ／逡逑0Ｕ邐逡逑０．０邐０．２邐０．４邐０．６逡逑ｐＮＰＢ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（｜ｍｏｌ／ｍｌ）逡逑圖３－１邋ｐＮＰ標(biāo)準(zhǔn)曲線圖逡逑（見實(shí)驗(yàn)記錄０００５８５２－ｐｌ９）逡逑３．４．２酶最適底物濃度篩選結(jié)果逡逑通過酶底物線性圖，我們觀察到底物濃度在１０ｍＭ以下時酶活隨著底物濃逡逑度的增加活力上升明顯，在１０ｍＭ出現(xiàn)拐點(diǎn)之后活力基本沒有產(chǎn)生變化。因此逡逑３５逡逑

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