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山楂不同炮制品對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠的預(yù)防作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-25 12:16
【摘要】:山楂是一種大宗常用中藥材,為薔薇科植物山楂Crataegus pinnatifida Bge.及其變種山里紅Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.的干燥成熟果實(shí)。臨床上,山楂常用炮制品包括:生山楂、炒山楂、焦山楂和山楂炭,其性味、功效和主治顯著不同。通過(guò)檢索發(fā)現(xiàn),生山楂廣泛用于具有減肥功效的保健食品。那么,山楂其它炮制品是否具有減肥功效,至今尚無(wú)系統(tǒng)報(bào)道。本文首次利用肥胖動(dòng)物模型并結(jié)合體外胰脂肪酶抑制實(shí)驗(yàn)對(duì)不同炮制品進(jìn)行了減肥功效評(píng)價(jià),并對(duì)比分析了山楂不同炮制品主要黃酮類成分的含量差異。主要內(nèi)容如下:(1)利用生山楂飲片,按照傳統(tǒng)工藝制備了山楂不同炮制品,應(yīng)用HPLC法測(cè)定了其水提液中兒茶素、表兒茶素、牡荊素鼠李糖苷、金絲桃苷、槲皮素和異槲皮素含量,發(fā)現(xiàn)生山楂中相關(guān)成分含量分別為0.238%、0.029%、0.021%、0.393%、0.206%、0.064%,經(jīng)炮制其含量顯著下降,炒山楂分別下降了 13.31%、44.22%、11.25%、41.90%、42.73%、14.33%,焦山楂下降了25.05%、54.07%、31.74%、77.52%、94.74%、68.53%,山楂炭下降了 25.86%、82.03%、55.05%、82.72%、95.66%、72.34%。(2)利用體外抑制活性實(shí)驗(yàn),對(duì)比測(cè)定了山楂不同炮制品對(duì)胰脂肪酶的抑制活性。發(fā)現(xiàn)山楂不同炮制品對(duì)胰脂肪酶均有一定的抑制活性,其中焦山楂抑制活性最強(qiáng),其IC50為3.105mg/mL。(3)以正常飼料飼喂大鼠為正常對(duì)照,以高脂飼料飼喂制備單純性肥胖大鼠模型,分別灌胃生山楂、炒山楂、焦山楂和山楂炭,評(píng)價(jià)其對(duì)模型大鼠的影響,以?shī)W利司他和辛伐他汀為陽(yáng)性對(duì)照藥物。每周分兩次測(cè)定大鼠體重及攝食量,觀察大鼠一般狀態(tài),30天后測(cè)定Lee's指數(shù),取樣測(cè)定體脂率、臟器指數(shù),取血凝固后取血清測(cè)定TG、TC、LDL-C、HDL-C的含量及胰脂肪酶活性,取腎周、附睪脂肪進(jìn)行HE染色,取肝臟、胰臟進(jìn)行油紅O染色。實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠整體精神狀態(tài)良好,攝食量正常并未出現(xiàn)明顯差異,與模型組相比,山楂不同炮制品均能顯著減緩大鼠體重增長(zhǎng),其中焦山楂和山楂炭分別降低了31.2%、33.3%;焦山楂能顯著降低大鼠的Lee's指數(shù),降低了7.3%;炒山楂、焦山楂能顯著減少大鼠體內(nèi)脂肪堆積,分別降低了42.7%、45.5%;炒山楂、焦山楂能顯著降低大鼠的肝臟指數(shù),分別降低了 12.9%、13.9%,以及其脾臟指數(shù)分別降低了22.7%和18.2%。與模型組相比,焦山楂、山楂炭能極顯著降低大鼠血清中TC、TG含量,分別降低了31.3%、29.5%和38.4%、40.4%,且使大鼠血清中LDL-C的含量分別降低了36.5%、38.5%;各山楂給藥組均能極顯著地抑制胰脂肪酶活性,最高降低率達(dá)到95.4%。與模型組相比,同一視野下,山楂不同炮制品組大鼠脂肪細(xì)胞較小且數(shù)量多,其中尤以焦山楂效果最為顯著,其腎周、附睪脂肪細(xì)胞直徑分別降低了34.4%、21.0%;各給藥組肝臟中脂滴含量明顯減少,尤以焦山楂作用顯著,其脂滴含量降低了96.8%。本文結(jié)果說(shuō)明:山楂不同炮制品均具有一定的肥胖抑制活性,其中焦山楂活性最強(qiáng),建議相關(guān)減肥保健食品或藥品選用焦山楂。根據(jù)炮制對(duì)山楂中六種黃酮類成分的影響,黃酮類成分可能與山楂減肥功效無(wú)關(guān)或與其降解產(chǎn)物有關(guān),建議進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行深入研究,以揭示其活性成分及其變化規(guī)律。
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R285.5
【圖文】:

胰脂肪酶,立體結(jié)構(gòu)


N-末端含有的催化中心主要包括絲氨酸152、組氨酸263和天冬氨酸176。其中,逡逑絲氨酸152不管是在催化過(guò)程還是活性屮心的組成上都是必需的胰脂肪酶立逡逑體結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1-1。逡逑脂肪酶對(duì)腸道中脂肪的消化和吸收過(guò)程有著舉足輕重的作用。在人類的日常逡逑飲食中,大約90%脂肪來(lái)源于混合甘油三酯,但是混合甘油三酯不能被人體直接逡逑吸收利用,首先要經(jīng)歷一個(gè)有胰脂肪酶催化的脂肪水解的過(guò)程使其轉(zhuǎn)化為小分子逡逑的甘油單酯和脂肪酸等后,才能被吸收入血,再被人體利用,多余的被儲(chǔ)存起來(lái),逡逑成為其他組織利用的能量,能量攝入過(guò)度就會(huì)造成脂肪堆積,最終導(dǎo)致肥胖[84]。逡逑14逡逑

指紋圖譜,混合標(biāo)準(zhǔn),指紋圖譜,黃酮


逑荊素鼠李糖苷、金絲桃苷、異槲皮素、槲皮素混合對(duì)照品溶液;旌蠘(biāo)準(zhǔn)品以及逡逑不同山楂樣品的色譜圖見(jiàn)圖2-1、2-2。與生山楂中各峰面積進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)6種逡逑成分均呈下降趨勢(shì),其含量變化見(jiàn)表2-3。逡逑Q03-邐p逡逑Q08-逡逑=邐E逡逑。必邐A邋1邐C邋D邋II逡逑0g0-邋邐ILa邐A邋il邐-—_—邐邐邐逡逑ak''邋'邋?zm邋3.00邋'邋Voc邋''邋eco邋?邋igo邋shd邋icgg邋''邋u'02邋;200邋'邋'邋t邋sm邋?Vii邋tseci邋'邋fam逡逑圖2-1黃酮混合標(biāo)準(zhǔn)品指紋圖譜逡逑注:圖中各色譜峰分別表示A:兒茶素,B:表兒茶素,C:牡荊素鼠李糖苷,D:金絲桃苷,逡逑E:槲皮素,F:異槲皮素。(見(jiàn)實(shí)驗(yàn)記錄00055851-p95)逡逑?一邐I邐1邐I邋羼邐A逡逑,;;■-:■邋-邋■邋'邋.邋.邋-邋■逡逑i邐v邐(逡逑2逡逑■邋*??逡逑??JW?邐""邋mIw*邐*邐<?*?*?邐*邋;*邋**w邐s-T&o逡逑I邋1邐h邋is邐B逡逑i':逡逑-r?邋w?邋*?-逡逑??00邐Jf邋¥?C?邐-*邋flr*?邐M邋CJK.V邐M邋<M?邐w0t邋OK>邐*邋c?>邐?-?%??*邐?*kV*t?逡逑—:邐I,邋1邐,,邐“,,、邐c逡逑?邋?*> ̄邋?逡逑??£?0:邐11邋11邋?(邋Im*邐1邋" ̄ ̄?<?*??邐*邋s-k*??邋1邐*-?邋'?*0邐*邐

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖


濃度(Umol/ml)為橫坐標(biāo)(Z),其吸光度(OD)為縱坐標(biāo)(F)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑并進(jìn)行線性回歸計(jì)算,得到回歸方程為F=8.3228X-0.0074,邋R2=0.9998。表明pNP逡逑在0.02^M?0.50pM與吸光度具有良好的線性關(guān)系。結(jié)果見(jiàn)圖3-1。逡逑5邋邐邐邐邐邐邐逡逑y=8.32278x-0.0074逡逑4邐R2=0.9998邐9逡逑I邋3邐"逡逑S邐,聲逡逑B邋2逡逑<邋^逡逑A邐y-逡逑1邐r/逡逑0U邐逡逑0.0邐0.2邐0.4邐0.6逡逑pNPB邋concentration(|mol/ml)逡逑圖3-1邋pNP標(biāo)準(zhǔn)曲線圖逡逑(見(jiàn)實(shí)驗(yàn)記錄0005852-pl9)逡逑3.4.2酶最適底物濃度篩選結(jié)果逡逑通過(guò)酶底物線性圖,我們觀察到底物濃度在10mM以下時(shí)酶活隨著底物濃逡逑度的增加活力上升明顯,在10mM出現(xiàn)拐點(diǎn)之后活力基本沒(méi)有產(chǎn)生變化。因此逡逑35逡逑

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本文編號(hào):2769817


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