【摘要】：隨著全球老齡化的進程加速,全世界衰老的人口數(shù)量增加,必然會對人類健康和社會經(jīng)濟有重大影響。對衰老的臨床和實驗研究表明,衰老進程中腦部會發(fā)生一系列的變化,包括神經(jīng)生成的減少,異常突觸的增加,體內(nèi)氧化應(yīng)激水平升高以及炎癥反應(yīng)的擴大。衰老動物模型表明,衰老帶來的變化包括認知水平的下降,神經(jīng)行為的遲鈍以及免疫應(yīng)激反應(yīng)應(yīng)答的增強。大量研究表明,在衰老進程中,炎癥對于腦部衰老及損傷具有十分重要的作用。七葉皂苷是從七葉樹科植物歐馬栗的干燥成熟種子中提取得到的五環(huán)三萜皂苷,具有抗炎、消水腫的功效。本研究探討了七葉皂苷對D-半乳糖致衰老小鼠的腦保護作用。模型組通過持續(xù)每天給小鼠腹腔注射一定劑量D-半乳糖來建立衰老模型,藥物干預組小鼠在每日腹腔注射D-半乳糖的基礎(chǔ)上口服給藥不同劑量七葉皂苷(4mg/kg,10mg/kg,25mg/kg)進行藥物干預。通過通道式水迷宮來對小鼠的空間學習和記憶能力進行評價。通過檢測小鼠腦組織乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性,晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycosylation end products,AGEs)含量,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性,腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量,誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性這些指標來評價七葉皂苷的腦保護作用。本研究通過行為學的測試和生理生化指標的檢測,取得了如下的成果:(1)連續(xù)給小鼠腹腔注射D-半乳糖540mg·kg~(-1)·d~(-1) 12周可以使得正常小鼠腦組織AGEs、MDA、TNF-α、IL-1β含量升高,AchE、iNOS活性升高,SOD活性降低,海馬區(qū)神經(jīng)元數(shù)目減少,細胞排列疏松紊亂,從而導致明顯的腦組織衰老損傷,表明D-半乳糖致小鼠衰老模型構(gòu)建成功。(2)七葉皂苷可以降低D-半乳糖致衰老小鼠腦組織AGEs、MDA、TNF-α、IL-1β的含量,降低iNOS活性,提高SOD活性,改善海馬區(qū)神經(jīng)元數(shù)目減少、細胞排列疏松紊亂的狀態(tài)。以上結(jié)果表明七葉皂苷對D-半乳糖致衰老小鼠腦組織具有明顯的保護作用,其保護作用機制與其抗炎和拮抗氧化應(yīng)激損傷有關(guān)。(3)本研究中,D-半乳糖并沒有明顯導致正常小鼠學習和記憶能力的障礙,七葉皂苷雖然可以對D-半乳糖致衰老小鼠起到明顯的腦保護作用,但其在改善D-半乳糖致衰老小鼠學習和記憶方面的作用仍有待進一步探究。(4)不同濃度七葉皂苷對D-半乳糖致衰老小鼠的腦保護作用程度不相同。綜上所述,本研究探討了七葉皂苷對D-半乳糖致衰老模型小鼠的腦保護作用,對其作用機制進行了初步探究。結(jié)果顯示,七葉皂苷對D-半乳糖致衰老小鼠腦組織具有明顯的保護作用,其保護作用機制與其抗炎和拮抗氧化應(yīng)激損傷有關(guān)。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖 1-1 七葉皂苷結(jié)構(gòu)式Fig.1-1 The structural formulas of escin通過查閱文獻，對七葉皂苷藥理作用進行綜述。1.2.1 七葉皂苷在緩和血管、改善靜脈曲張方面的作用Raffetto, Joseph D 通過構(gòu)建鼠下腔靜脈（inferior vena cave，IVC）模型，發(fā)現(xiàn)鼠 IVC 模型中，七葉皂苷可以誘導細胞外鈣離子依賴性血管收縮，但是會破壞 α-上腺素能以及 AT（1）R 受體介導的信號通路，由此發(fā)現(xiàn)了七葉皂苷的靜脈保護制，佐證了七葉皂苷具有保護血管、緩和靜脈曲張的作用[27]。Zhang Fenglan 以視膜缺血鼠為模型，探究七葉皂苷與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合用藥對于視網(wǎng)膜缺血障礙是否有協(xié)同保護作用，發(fā)現(xiàn)低劑量七葉皂苷和曲安奈德單獨用藥不會影響 BRB（blooretinal barrier）滲透率，兩者聯(lián)合用藥能顯著降低 BRB 滲透率。這些結(jié)果表明七皂苷和糖皮質(zhì)激素聯(lián)合用藥對視網(wǎng)膜缺血障礙具有協(xié)同保護作用，分子機制可能

B1 B2圖 2-9 D-半乳糖對正常小鼠腦組織海馬區(qū)細胞數(shù)目和形態(tài)的影響Fig.2-9 Effect of D-gal on neuron number and morphology in hippocampus of normal miceA1，A2 代表空白對照組；B1，B2 代表模型組。A1，B1 表示放大 200 倍，圖中標尺為 100μm；A2，B2 表示放大 400 倍，圖中標尺為 50μm2.4 討論本研究所采用的 D-半乳糖致衰老模型是國內(nèi)公認的衰老及腦老化動物模型。早期研究表明，一段時間內(nèi)連續(xù)注射一定劑量 D-半乳糖可以使得機體細胞內(nèi)半乳糖濃度上升。D-半乳糖在醛糖還原酶催化下會被還原成半乳糖醇，半乳糖醇這種物質(zhì)并不能被細胞進一步分解，因此，會滯留堆積在細胞內(nèi)，引起代謝的紊亂，最終導致衰生[46]。大量研究表明，D-半乳糖可以導致正常小鼠空間學習和記憶障礙。研究還發(fā)現(xiàn)，D-半乳糖模型大鼠腦內(nèi) MDA 含量增加, SOD 活力下降，脂質(zhì)過氧化水平升

C1 C2圖 4-8 七葉皂苷對 D-半乳糖致衰老小鼠腦組織海馬區(qū)細胞數(shù)目和形態(tài)的影響Fig.2-12 Effect of escin on neuron number and morphology in hippocampus of D-gal miceA1，A2 代表空白對照組；B1，B2 代表模型組；C1，C2 代表七葉皂苷低劑量組A1，B1，C1 表示放大 200 倍，圖中標尺為 100μm；A2，B2，C2 表示放大 400 倍，圖中標尺為 50μm4.4 討論4.4.1 多奈哌齊對衰老鼠抗炎和抗氧化的作用研究表明多奈哌齊對老年癡呆病人記憶和學習能力的改善不僅僅從提高神經(jīng)遞質(zhì)濃度這一層面起作用，還可以通過其他機制共同改善記憶，比如激活小膠質(zhì)細胞釋放神經(jīng)營養(yǎng)因子、與 Ca2+通道的作用等。第 3 章已經(jīng)證明多奈哌齊可以顯著性降低 D-半乳糖致衰老模型鼠腦組織 AchE 的活性（p<0.01）。

【參考文獻】

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本文編號：2769461