【摘要】：目的:研究紅景天苷(Salidroside,Sal)抗血小板活性及在體內(nèi)、體外的抗血栓作用,探索其可能的機(jī)制。方法:(1)體外抗血栓實(shí)驗(yàn):取昆明小鼠,麻醉,下腔靜脈采血,離心制備小鼠洗滌血小板,進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):通過(guò)乳酸脫氫酶(LDH)法檢測(cè)紅景天苷對(duì)血小板的毒性;預(yù)先以生理鹽水、紅景天苷(25μmol/L、50μmol/L)孵育血小板,并以凝血酶誘導(dǎo)血塊回縮,觀察紅景天苷對(duì)血塊回縮的作用;采用比濁法測(cè)定洗滌血小板在ADP、凝血酶誘導(dǎo)下產(chǎn)生的聚集,在聚集達(dá)到最大時(shí)停止實(shí)驗(yàn),部分血小板樣品取出懸液于顯微鏡下觀察,另一部分血小板樣品迅速裂解,制備蛋白樣品,檢測(cè)Akt、GSK3β蛋白的磷酸化水平,同時(shí)預(yù)留部分血小板作為空白對(duì)照用于制樣;血小板在凝血酶刺激后,迅速制樣取上清,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別檢測(cè)血小板的cAMP、TXB_2的含量。(2)體內(nèi)抗血栓實(shí)驗(yàn):取健康清潔級(jí)昆明小鼠40只,雌雄各半,隨機(jī)分為4組,分別腹腔注射給予生理鹽水、阿司匹林(100 mg/kg)、紅景天苷低劑量組(50 mg/kg)和紅景天苷高劑量組(100 mg/kg),每日1次,連續(xù)7 d,末次給藥30 min后,下腔靜脈采血,檢測(cè)小鼠血細(xì)胞數(shù)目;取健康清潔級(jí)昆明小鼠40只,雌雄各半,分組同上,末次給藥30 min后,采血,檢測(cè)小鼠凝血四項(xiàng);取健康清潔級(jí)昆明小鼠40只,雌雄各半,分組同上,末次給藥30 min后,麻醉小鼠,用斷尾流血法檢測(cè)小鼠的出血時(shí)間;取40只健康清潔級(jí)雄性昆明小鼠,在連續(xù)給藥5 d后,腹腔注射角叉菜膠復(fù)制小鼠尾部血栓模型,之后繼續(xù)給藥2 d,在造模12 h,24h,48 h時(shí)記錄各組小鼠黑尾發(fā)生率以及黑尾長(zhǎng)度。結(jié)果:(1)與空白對(duì)照組相比,不同劑量紅景天苷作用于血小板后,對(duì)乳酸脫氫酶(LDH)釋放量無(wú)顯著性差異(P0.05);與模型組相比,預(yù)先孵育紅景天苷的血小板,血塊回縮明顯受到抑制(P0.05);預(yù)先孵育紅景天苷的血小板,在不同誘導(dǎo)劑作用下,聚集率明顯降低,顯微鏡下見(jiàn)聚集體減小,蛋白檢測(cè)表明紅景天苷可以有效抑制AKT和GSK3β的磷酸化;經(jīng)紅景天苷孵育的血小板cAMP含量明顯高于模型組(P0.05),TXB_2含量明顯低于模型組(P0.05)。(2)紅景天苷對(duì)小鼠的生長(zhǎng)以及血細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)顯著性影響(P0.05);紅景天苷對(duì)小鼠的凝血四項(xiàng)無(wú)顯著性影響(P0.05);紅景天苷可以延長(zhǎng)小鼠斷尾流血時(shí)間,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);紅景天苷可明顯減少角叉菜膠誘導(dǎo)尾部血栓,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:紅景天苷對(duì)體外和體內(nèi)血栓具有良好的抗血栓作用,其作用機(jī)制可能是通過(guò)升高血小板cAMP含量,減少血小板TXA_2的含量,并抑制PI3K/Akt信號(hào)通路發(fā)揮作用的。
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

洗滌血小板的毒性作用的影響試劑盒檢測(cè)紅景天苷對(duì)小鼠洗滌血小板可紅景天苷各個(gè)劑量組孵育血小板后，對(duì)乳酸組無(wú)明顯差異（P>0.05）。al 對(duì)小鼠洗滌血小板 LDH 釋放量的影響( x±s, ns of Sal on the LDH release of washed platelets in m（μmol/L） LDH 活性（U/L） LDH 相 120.71 ± 9.96 112.5 121.78 ± 11.76 125 129.21 ± 7.51 150 122.08 ± 10.36 1100 127.06 ± 17.91 1200 135.94 ± 17.66 1— 1022.08 ± 30.70

空白對(duì)照組 模型組 替羅非班組 Sal 低劑量 Sal 高劑量圖 2-2-1 在 15 min 時(shí)，不同組的血塊回縮Fig. 2-2-1 Clot retraction of different groups at 15 min表 2-2-1 在 15 min 時(shí)，不同組的血塊比例( x±s, n=3 )Tab. 2-2-1 Clot ratio of different groups at 15 min( x±s, n=3照組相比，**P<0.01，與模型組相比，#P<0.05，##P<0.01k control group ,**P<0.01，vs. model group#P<0.05，##P<0.01組別 劑量 血塊比例對(duì)照組 — 100型組 — 38.35 ±非班組 0.5 μg/mL 82.70 ±Sal 25 μmol/L 58.16 50 μmol/L 70.66 ±

組 模型組 替羅非班組 Sal 低劑量 Sal 高劑量圖 2-2-1 在 15 min 時(shí)，不同組的血塊回縮2-2-1 Clot retraction of different groups at 15 min-1 在 15 min 時(shí)，不同組的血塊比例( x±s, n=3 )1 Clot ratio of different groups at 15 min( x±s, n=3**P<0.01，與模型組相比，#P<0.05，##P<0.01oup ,**P<0.01，vs. model group#P<0.05，##P<0.01劑量 血塊比例— 100— 38.35 ±0.5 μg/mL 82.70 ±25 μmol/L 58.16 ±50 μmol/L 70.66 ±

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本文編號(hào)：2768404