【摘要】：目的:本研究通過對不同月份辣蓼、夜關(guān)門的微量元素含量進(jìn)行分析測定,為其質(zhì)量控制及開發(fā)利用提供依據(jù)。研究黔產(chǎn)夜關(guān)門提取物對釀酒酵母INVSC1的促增殖作用影響及其機(jī)制的初步探討。方法:采用微波消解并電感耦合等離子體發(fā)射光譜法(ICP-OES)對辣蓼、夜關(guān)門中的(鈣(Ca),鉀(K),鎂(Mg),鋅(Zn),錫(Sn),銅(Cu),汞(Hg),砷(As),鎘(Cd),鋇(Ba),銀(Ag),鋁(Al),錳(Mn),鉬(Mo),銻(Sb),鈷(Co),鎵(Ga),鍺(Ge),鉛(Pb),鋰(Ni),鉻(Cr),鐵(Fe))等22種金屬元素進(jìn)行含量測定。將夜關(guān)門提取物配制成0.5、1、2、4、8、16mg/mL等不同濃度,采用比色法(OD_(600))檢測不同濃度夜關(guān)門提取物干預(yù)釀酒酵母INVSC1細(xì)胞3、6、9、12、24h后對細(xì)胞增殖的影響,根據(jù)比色法結(jié)果設(shè)置夜關(guān)門提取物(4mg/mL、8mg/mL、16mg/mL)低、中、高三個(gè)劑量組和陰性對照組;于倒置顯微鏡下觀察不同濃度夜關(guān)門提取物對釀酒酵母INVSC1細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響;運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)定量檢測釀酒酵母INVSC1中cAMP、PKA、tpk2的mRNA表達(dá);采用蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測釀酒酵母INVSC1中cAMP、PKA的蛋白表達(dá)。結(jié)果:檢測出辣蓼、夜關(guān)門中Ca、Mg、Al、K、Fe、Mn、Ag、Zn等元素較高,其精密度RSD為0.244%~2.681%,回收率89.9%~107.0%,辣蓼與夜關(guān)門中的Pb、As,Cu、Hg、Cd等有害重金屬元素含量均未超標(biāo),符合《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。比色法(OD_(600))檢測發(fā)現(xiàn)夜關(guān)門提取物對釀酒酵母INVSC1有一定的增殖作用;倒置顯微鏡觀察經(jīng)夜關(guān)門提取物處理后釀酒酵母菌體變小、變圓;經(jīng)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測到經(jīng)夜關(guān)門提取物處理9 h后夜關(guān)門中、高劑量組可引起cAMP的mRNA上調(diào),夜關(guān)門中劑量組可引起Tpk2的mRNA上調(diào),與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);經(jīng)蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測到cAMP、PKA的蛋白表達(dá)量上調(diào),與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.不同月份辣蓼和夜關(guān)門Pb、As、Cu、Hg、Cd含量均符合標(biāo)準(zhǔn)。2.不同濃度夜關(guān)門提取物可促進(jìn)釀酒酵母INVSC1的增殖,并能改變細(xì)胞的形態(tài)。3.夜關(guān)門提取物可上調(diào)釀酒酵母INVSC1中cAMP、PKA、Tpk2基因的表達(dá)。4.夜關(guān)門提取物可上調(diào)cAMP、PKA蛋白的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R284;R285
【圖文】：

酵母菌增殖相關(guān)信號通路示意圖

圖 1 釀酒酵母 INVSC1 生長曲線Fig.1The growth curve of Saccharomyces cerevisiae INVS2.2 夜關(guān)門提取物對釀酒酵母 INVSC1 增殖的影響由圖 2 可知，夜關(guān)門提取物可以促進(jìn)停滯期和對數(shù)期釀酒酵

圖 2 夜關(guān)門提取物對釀酒酵母 INVSC1 增殖率的影響（ x s，n=6）Fig.2 Effect of the extract in Indigofera Pseudotinctioria Mats on the proliferatiSaccharomyces Cerevisiae INVSC1（ x s，n=6）2.3 夜關(guān)門提取物對釀酒酵母 INVSC1 細(xì)胞形態(tài)的影響倒置顯微鏡下觀察，空白對照組中，細(xì)胞呈不規(guī)則的卵圓形或橢圓

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;金屬陽離子對釀酒酵母J-31發(fā)酵影響研究[J];中外酒業(yè)·啤酒科技;2017年13期

2 ;中國科學(xué)家人工合成4條酵母染色體[J];生物學(xué)教學(xué);2017年08期

3 欒曉東;;由釀酒酵母開啟的重塑生命計(jì)劃[J];科學(xué)大眾(中學(xué)生);2017年05期

4 陳芳;董瑞豐;;中國“編寫生命密碼”將如何改變未來?[J];創(chuàng)新時(shí)代;2017年05期

5 K.Kavanagh,汪開治;釀酒酵母與疾病[J];生物技術(shù)通報(bào);2001年03期

6 陳奇;;用解淀粉酵母和釀酒酵母的互補(bǔ)混合物進(jìn)行淀粉酒精發(fā)酵[J];微生物學(xué)雜志;1988年01期

7 李京培;;用釀酒酵母表達(dá)的抗原制備HBsAg多肽微膠粒[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;1988年01期

8 婁競;;釀酒酵母高密度發(fā)酵產(chǎn)生IFN-γ的調(diào)控表達(dá)及純化[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;1988年05期

9 毛小洪;蔡金科;;用重組DNA方法構(gòu)建分解淀粉釀酒酵母的新進(jìn)展[J];生物工程學(xué)報(bào);1989年03期

10 楊艷卿;劉玉方;郭子劍;蔡金科;;釀酒酵母磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)的分子克隆和特性研究[J];生物工程學(xué)報(bào);1989年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 周峻崗;祁慶生;王鵬;;釀酒酵母糖基化過程基因工程改造[A];中國資源生物技術(shù)與糖工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

2 曹丹燕;劉欣;許琳;嚴(yán)明;;釀酒酵母醛糖還原酶的表達(dá)條件優(yōu)化及純化[A];第三屆全國化學(xué)工程與生物化工年會(huì)論文摘要集（上）[C];2006年

3 張梁;石貴陽;王正祥;章克昌;;具有纖維二糖代謝途徑的重組釀酒酵母的構(gòu)建[A];中國資源生物技術(shù)與糖工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

4 陳曉峰;江賢章;吳松剛;黃建忠;;脂肪酸碳鏈延長酶與脫飽和酶在釀酒酵母中共表達(dá)[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2010年

5 趙廣厚;林逸驄;戴俊彪;;釀酒酵母rDNA區(qū)的合成與功能研究[A];第九屆中國模式真菌研討會(huì)摘要集[C];2016年

6 王春曉;Braulio Esteve-Zarzoso;Luca Cocolin;Albert Mas;Kalliopi Rantsiou;;酒精發(fā)酵過程中非釀酒酵母的生存能力檢測[A];中國生物工程學(xué)會(huì)第二屆青年科技論壇暨首屆青年工作委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2017年

7 楊浣漪;張國華;何國慶;;釀酒酵母和舊金山乳桿菌在酸面團(tuán)發(fā)酵過程中的互作研究[A];益生菌：技術(shù)及產(chǎn)業(yè)化——第十三屆益生菌與健康國際研討會(huì)摘要集[C];2018年

8 陸勇軍;;以釀酒酵母為模型研究天然產(chǎn)物和細(xì)菌效應(yīng)蛋白的功能[A];第九屆中國模式真菌研討會(huì)摘要集[C];2016年

9 謝能中;王青艷;朱綺霞;秦艷;曹薇;;基于代謝工程理論構(gòu)建釀酒酵母抗逆高產(chǎn)乙醇菌株[A];第九屆中國酶工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2013年

10 龔婷;何飛;廖媛;高向東;;釀酒酵母Rho4 GTP酶調(diào)控機(jī)制的研究[A];2012年第五屆全國微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前6條

1 通訊員 李春園 李冰淞 李天一 秦琴 張維民;清華生命學(xué)院戴俊彪研究組發(fā)文報(bào)道釀酒酵母十二號染色體的設(shè)計(jì)合成[N];新清華;2017年

2 ;首份完整線粒體蛋白質(zhì)圖繪成[N];科技日報(bào);2017年

3 本報(bào)記者 黃海華;有的時(shí)候，需要把自己置之死地[N];解放日報(bào);2018年

4 秦迪 煙臺張?jiān)Ｆ咸厌劸乒煞萦邢薰?關(guān)于非釀酒酵母在葡萄酒中的研究[N];華夏酒報(bào);2015年

5 治;釀酒酵母部分蛋白組圖譜公布[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

6 于佳淼 李成群;安琪超級釀酒酵母及其應(yīng)用技術(shù)[N];中國食品質(zhì)量報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 趙方龍;重組釀酒酵母生產(chǎn)20（S）-原人參二醇的途徑構(gòu)建與優(yōu)化[D];天津大學(xué);2017年

2 張偉平;釀酒酵母氮代謝物阻遏效應(yīng)系統(tǒng)生物學(xué)解析和全局調(diào)控[D];江南大學(xué);2018年

3 熊春江;木聚糖乙醇代謝工程釀酒酵母菌的構(gòu)建[D];暨南大學(xué);2015年

4 程誠;改造釀酒酵母內(nèi)源基因表達(dá)提高木糖利用和乙酸脅迫耐受性[D];大連理工大學(xué);2018年

5 張明明;乙酸脅迫耐性基因挖掘及高活性釀酒酵母構(gòu)建[D];大連理工大學(xué);2017年

6 謝澤雄;釀酒酵母V號染色體設(shè)計(jì)與構(gòu)建[D];天津大學(xué);2017年

7 楊浣漪;傳統(tǒng)酸面團(tuán)中釀酒酵母和舊金山乳桿菌的種內(nèi)多樣性及其互作研究[D];浙江大學(xué);2018年

8 劉增然;利用淀粉的釀酒酵母工程菌的構(gòu)建[D];四川大學(xué);2004年

9 金承濤;Al～（3+）、高溫對釀酒酵母的脅迫作用及其耐性機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2005年

10 劉延琳;酒酒球菌mleA和mleP基因的克隆及其在釀酒酵母中的轉(zhuǎn)化與表達(dá)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 阿曼妮薩·艾海提;新疆葡萄與葡萄酒釀酒酵母遺傳多樣性研究[D];塔里木大學(xué);2019年

2 王東艷;黔產(chǎn)辣蓼、夜關(guān)門微量元素含量分析及夜關(guān)門對釀酒酵母的影響研究[D];貴州醫(yī)科大學(xué);2019年

3 明明;基于GC-MS代謝組學(xué)方法的建立及對釀酒酵母乙醇耐受性機(jī)制研究[D];吉林化工學(xué)院;2019年

4 劉亞楠;蛋白乙�；瘜︶劸平湍柑即x的影響初探[D];山東大學(xué);2019年

5 荊雄;柿子酒釀造條件優(yōu)化及其非釀酒酵母的應(yīng)用[D];陜西科技大學(xué);2019年

6 喬慧聰;Elp3經(jīng)Yap1參與釀酒酵母氧化應(yīng)激的分子機(jī)制研究[D];河南師范大學(xué);2018年

7 陳靚;釀酒酵母中利用Rev-RRE元件跨核膜運(yùn)輸T7轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的初步研究[D];北京化工大學(xué);2018年

8 郝歡歡;延長釀酒酵母壽命的研究[D];河北大學(xué);2018年

9 賈海燕;提高釀酒酵母CRISPR系統(tǒng)編輯效率的探究[D];河北大學(xué);2018年

10 李莎莎;釀酒酵母對糠醛耐受性的數(shù)量性狀定位[D];江南大學(xué);2018年

本文編號：2767195