發(fā)布時(shí)間：2020-07-17 02:06

【摘要】：目的:觀察鈣結(jié)合蛋白D28K(calbindin-D28K)在抑郁癥模型小鼠海馬CA1區(qū)的表達(dá)及分布情況,探討化濁解毒疏肝方對(duì)小鼠海馬細(xì)胞calbindin-D28K表達(dá)的影響,為抑郁癥的臨床治療,開辟新的思路。方法:雄性ICR小鼠60只,適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為6組,每組10只。分別為空白對(duì)照組組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組(氟西汀組)、化濁解毒疏肝方組低、中、高劑量組(3.9 g·kg~(-1)·d~(-1)、7.8 g·kg~(-1)·d~(-1)、15.6g·kg~(-1)·d~(-1))。除空白對(duì)照組外,其他各組小鼠采取慢性不可預(yù)見性溫和刺激(CUMS)法復(fù)制抑郁癥模型。CUMS包括夾尾1 min、日夜顛倒24 h、噪音2 h,搖晃5 min、禁食24 h、異物24 h、異味24 h、潮濕24 h、禁水24 h、傾斜24 h、熱刺激2 h、束縛2 h、空籠24 h、冰水游泳5 min。每天隨機(jī)從其中抽取兩種,連續(xù)21天。制模的同時(shí),空白對(duì)照組、模型組小鼠每天以0.3 mL生理鹽水灌胃,化濁解毒疏肝方低、中、高劑量組小鼠分別以3.9 g·kg~(-1)·d~(-1)、7.8 g·kg~(-1)·d~(-1)、15.6 g·kg~(-1)·d~(-1)的生藥量灌胃,氟西汀組小鼠以2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)的氟西汀灌胃。制模結(jié)束后,分別用糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、新奇攝食抑制實(shí)驗(yàn)等方法分析動(dòng)物的抑郁樣行為;用免疫組化法分別檢測(cè)小鼠海馬CA1區(qū)calbindin-D28K的表達(dá)和細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1.行為學(xué)測(cè)試結(jié)果(1)與空白對(duì)照組相比,模型組小鼠的糖水偏愛(ài)分?jǐn)?shù)顯著降低(P0.01);與模型組相比,氟西汀組、化濁解毒疏肝方低、中、高劑量組小鼠糖水偏愛(ài)分?jǐn)?shù)顯著提高(P0.01);與氟西汀組相比,化濁解毒疏肝方中、高劑量組小鼠的糖水偏愛(ài)分?jǐn)?shù)無(wú)顯著性差異(P0.05)。(2)與空白對(duì)照組相比,模型組小鼠懸尾總不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P0.01);與模型組相比,氟西汀組、化濁解毒疏肝方低中高劑量組小鼠懸尾總不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P0.01);與氟西汀組相比,化濁解毒疏肝方高劑量組小鼠懸尾總不動(dòng)時(shí)間無(wú)顯著差異(P0.05)。(3)與空白對(duì)照組相比,模型組小鼠新奇抑制攝食量顯著減少(P0.01);與模型組相比,化濁解毒疏肝方中、高劑量小鼠新奇抑制攝食量顯著增多(P0.05,P0.01);與氟西汀組相比,化濁解毒疏肝方高劑量組小鼠新奇抑制攝食量顯著增多(P0.01)。(4)與空白對(duì)照組相比,模型組小鼠強(qiáng)迫游泳總不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P0.01);與模型組相比,氟西汀組、化濁解毒疏肝方低、中、高劑量組小鼠強(qiáng)迫游泳總不動(dòng)時(shí)間顯著縮短(P0.01);與氟西汀組相比,化濁解毒疏肝方中、高劑量組小鼠強(qiáng)迫游泳總不動(dòng)時(shí)間相當(dāng)(P0.05)。2.免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示與空白對(duì)照組相比,模型組小鼠海馬CA1區(qū)的calbindin-D28K的表達(dá)顯著減少(P0.01);與模型組相比,氟西汀組、化濁解毒疏肝方低、中、高劑量組小鼠海馬CA1區(qū)calbindin-D28K的表達(dá)顯著增多(P0.01);與氟西汀組相比,化濁解毒疏肝方中、高劑量組小鼠海馬CA1區(qū)calbindin-D28K的表達(dá)相當(dāng)(P0.05)。3.細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示與空白對(duì)照組相比,模型組海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的數(shù)量顯著增多(P0.01);與模型組相比,氟西汀組、化濁解毒疏肝方低、中、高劑量組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量顯著減少(P0.01);與氟西汀組相比,化濁解毒疏肝方中、高劑量組小鼠細(xì)胞凋亡數(shù)量相當(dāng)(P0.05)。結(jié)論:1.化濁解毒疏肝方可以有效地緩解抑郁癥模型小鼠的各種抑郁癥狀,改善其學(xué)習(xí)記憶能力。2.化濁解毒疏肝方可以促進(jìn)小鼠海馬細(xì)胞calbindin-D28K的表達(dá),減少海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量。3.化濁解毒疏肝方在緩解抑郁癥模型小鼠抑郁癥狀方面存在劑量依賴關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：河北中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

圖 1 各組小鼠海馬 CA1 區(qū) calbindin-D28K 表達(dá)情況（×200，免疫組化染色）Fig.1 Expression of calbindin-D28K in hippocampal CA1 region of eacgroup (×200, immunohistochemical staining)Note: The calbindin-D28K positive cells are indicated by the arrows. A. blacontrol group B. model group C. fluoxetine group D. Huazhuo Jiedu ShugRecipe low dose group E. Huazhuo Jiedu Shugan Recipe middle dose groupHuazhuo Jiedu Shugan Recipe High dose group

圖 2 各組小鼠海馬 CA1 區(qū)細(xì)胞凋亡情況（×400，TUNEL 法染色）Fig.2 Apoptosis of hippocampal CA1 region of each group of mice (×400,TUNEL staining)Note: The apoptotic cells are indicated by the arrows. A. blank control groupB. model group C. fluoxetine group D. Huazhuo Jiedu Shugan Recipe lowdose group E. Huazhuo Jiedu Shugan Recipe middle dose group F. HuazhuoJiedu Shugan Recipe High dose group

圖 3 各組小鼠糖水偏愛(ài)分?jǐn)?shù)Fig.3 Sugar water preference scores in each groupNote：vs blank control group,aP＞0.05,bP＜0.05,cP＜0.01; vs model group,dP＞0.05,＜0.05,fP＜0.01; vs fluoxetine group,gP＞0.05,hP＜0.05,gP＜0.01.

【參考文獻(xiàn)】

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1 向月;張雄;楊軍;戴頌陽(yáng);李昱;;miR-124-3p通過(guò)負(fù)調(diào)控Caveolin-1表達(dá)N2a/APPswe細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年05期

2 盧汝梅;潘立衛(wèi);韋建華;鐘振國(guó);;絞股藍(lán)化學(xué)成分的研究[J];中草藥;2014年19期

3 張園;劉學(xué)軍;;海馬神經(jīng)元凋亡與抑郁癥[J];國(guó)際精神病學(xué)雜志;2014年03期

4 王睿;費(fèi)洪新;李曉明;劉韓;牛英才;劉向民;黃樹明;;石菖蒲的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2013年07期

5 陳麗平;;黃芩有效化學(xué)成分及抑菌作用的研究分析[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2011年10期

6 任愛(ài)華;何欣;夏薇;趙華;張艷華;;尾部靜脈注射5-HTP對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元放電頻率的影響[J];北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年04期

7 林益強(qiáng);;關(guān)于區(qū)域精神衛(wèi)生發(fā)展的若干思考[J];中國(guó)衛(wèi)生資源;2010年02期

8 裴林;李佃貴;曹東義;劉啟泉;王彥剛;;濁毒淺識(shí)[J];河北中醫(yī);2010年01期

9 趙秋振;薄愛(ài)華;賈勇圣;;鈣離子抑制劑對(duì)腦缺血再灌注損傷神經(jīng)元凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2009年04期

10 黃開顏;張志國(guó);;荷葉研究概況[J];中國(guó)藥業(yè);2008年11期

本文編號(hào)：2758832