【摘要】：研究目的:以人工手術(shù)導(dǎo)致小鼠黃疸為模型,以中小強度運動及虎紋克胰素尾靜脈注射為干預(yù)手段。觀察虎紋克胰素聯(lián)合中等強度有氧運動對小鼠阻塞性黃疽的干預(yù)研究,探討阻塞性黃疸繼發(fā)性肝損傷中可能的作用及分子機制。研究方法:50只KM小鼠隨機分為5組:健康小鼠,模型對照組、虎紋克胰素組(0.3μg/g)、有氧運動組、運動聯(lián)合虎紋克胰素組。其中除正常組外都以總膽管懸掛至腹壁48小時構(gòu)建小鼠阻塞性黃疸致重癥肝損傷模型。從高中低劑量組的血生化指標(biāo)中判斷出最佳劑量,以此參與到運動與克胰素聯(lián)合用藥組中。應(yīng)用蘇木精一伊紅染色(HE染色)對各組小鼠肝臟組織損傷情況進行顯微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)觀察;生物化學(xué)法測定白蛋白,谷酰胺轉(zhuǎn)肽酶(R-GT)、堿性磷酸酶(AKP)、總膽紅素(TBIL)含量,免疫組化法檢測肝臟組織TNF-α IL-6、NF-κB的蛋白表達;RT-PCR技術(shù)檢測TNF-α、IL-6、NF-κB表達;RNAseq技術(shù)掃描mRNA表達譜。研究結(jié)果:①HE染色顯示:正常組肝索排列整齊;模型組小鼠肝細(xì)胞大量纖維化,可見大片狀肝細(xì)胞變性、壞死,乃至出現(xiàn)核質(zhì)分離空泡;虎紋克胰素組、單純運動組可見肝細(xì)胞少量點、片狀壞死,肝小葉結(jié)構(gòu)改變,肝索排列欠整齊;虎紋克胰素+運動組無明顯組織壞死,肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常,肝索排列較整齊。②血清學(xué)結(jié)果:虎紋克胰素+運動組TBIL、AKP、R-GT水平較模型組顯著降低(P0.01),虎紋克胰素組、單純運動組TBIL、AKP、R-GT水平也顯著下降(P0.05)。③免疫組化顯示TNF-α IL-6、NF-κB陽性表達最低;肝組織內(nèi)TNF-α、IL-6、NF-κB表達較模型對照組低。④RT-PCR結(jié)果顯示:與模型組比較,虎紋克胰素+運動組小鼠血清TNF-α NF-KB、IL-6表達降低(P0.01)。⑤RNAseq結(jié)果顯示:主要涉及細(xì)胞外基質(zhì)受體作用、細(xì)胞黏附分子、黏著斑、代謝途徑、氨基酸等。結(jié)論:中等強度有氧運動聯(lián)合虎紋克胰素尾靜脈注射對小鼠阻塞性黃疸的有良好的促進修復(fù)的作用,能增強阻塞性黃疸致重癥肝損傷小鼠的免疫功能,從而明顯減輕阻黃致小鼠肝損傷的程度。
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5
【圖文】：

ＨＷＴＸ－１１與運動干預(yù)下阻塞性黃疸肝細(xì)胞損傷修復(fù)機制的研究３結(jié)果逡逑阻黃造模情況逡逑與健康小鼠相比，手術(shù)２４ｈ后，模型組小鼠尿液顏色明顯加深，約４及耳尖開始出現(xiàn)黃染。隨膽管阻塞時間的延長，癥狀逐漸加重，小鼠狀態(tài)逐漸惡化。建模過程中，未發(fā)生意外死亡情況。后隨機抽取小鼠膽管畸形與膽囊腫大，血液生化顯示膽紅素水平超標(biāo)，肝臟微結(jié)構(gòu)觀紊亂。以此判斷造模成功。逡逑

邐１邐１．２逡逑圖３－２不同劑量虎紋克胰素對黃疸量效曲線逡逑得出虎紋克胰素量效曲線，從中看出在0．３ｕｇ／ｇ時，出現(xiàn)較高藥效強度，并逡逑篩選出最佳劑量為0．３ｕｇ／ｇ。逡逑３．３肝臟形態(tài)學(xué)觀察逡逑ＨＥ染色結(jié)果顯示：健康小鼠的肝索清晰完整（圖五Ａ）；模型組小鼠肝逡逑細(xì)胞出現(xiàn)核膜溶解空泡（圖五Ｂ）；克胰素組與純運動組可見肝細(xì)胞少量點、逡逑片狀壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)改變，肝索排列欠整齊（圖五Ｃ＼Ｄ）；虎紋克胰素＋運動逡逑組組無明顯壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常，肝索排列較整齊（圖五Ｂ）。逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１逡逑Ａ．邐八逡逑圖３－３：各組小鼠肝組織病理切片ＨＥ染色圖（２００Ｘ）逡逑注：圖Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ分別表示健康小鼠、模型組、虎紋克胰素組、運動組、虎紋克胰逡逑素＋運動組。逡逑１３逡逑

．邐八逡逑圖３－３：各組小鼠肝組織病理切片ＨＥ染色圖（２００Ｘ）逡逑注：圖Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ分別表示健康小鼠、模型組、虎紋克胰素組、運動組、虎紋克胰逡逑素＋運動組。逡逑１３逡逑

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

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本文編號：2758755