【摘要】：腸促胰素是胃腸道的內(nèi)分泌細胞及神經(jīng)元釋放至體內(nèi)的激素肽類,其生理功能包括調(diào)節(jié)食欲、血糖、胃腸蠕動和生長、外分泌細胞分泌和脂肪細胞等,是影響機體能量代謝的重要因子。葡萄糖依賴性促胰島素釋放肽(GIP)是體內(nèi)重要的腸促胰素之一,由近端小腸K細胞分泌,能夠在體內(nèi)發(fā)揮促胰島素分泌作用,促進胰島β細胞的增殖和存活。改善GIP及其受體的功能可提高胰島功能或胰島素敏感性,這一方法可能成為治療2型糖尿病的一種新策略。茶(Camelliasinensis)籽皂苷因其具有調(diào)節(jié)胃腸道功能、抗癌、抗炎、抗微生物、抗氧化、神經(jīng)保護、降血脂、表面活性等多種生物活性,已受到廣泛關(guān)注,但對其深入的生物學機制研究較少。本文采用小鼠模型和小鼠小腸內(nèi)分泌細胞(STC-1),研究了茶籽總皂苷和皂苷單體化合物TheasaponinE1對刺激小鼠小腸GIP分泌的作用和分子機制,主要研究結(jié)果如下:(1)茶籽總皂苷和TheasaponinE1能夠在體內(nèi)外刺激GIP分泌:對小鼠一次性灌胃給藥茶籽總皂苷65mg/kgBW,采用實時熒光定量PCR(RT-PCR)和酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定不同時間點GIP mRNA和蛋白水平的表達。結(jié)果顯示二者均出現(xiàn)先升高后降低的現(xiàn)象,但表達最高時間點不同,分別為1和3小時。TheasaponinE1在無毒劑量范圍內(nèi)處理細胞,同樣能夠誘導GIPmRNA和蛋白表達的升高。(2)鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白-1(SGLT1)在茶籽皂苷誘導GIP分泌中具有重要作用:采用SGLT-1抑制劑根皮苷與TheasaponinE1同時處理STC-1細胞,能夠抑制TheasaponinE1誘導的胞內(nèi)鈣離子濃度升高,同時減緩GIP mRNA表達的上升,表明Theasaponin E1至少部分通過激活SGLT1誘導GIP的表達。(3)G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體Gpbar1(TGR5)在茶籽皂苷誘導GIP分泌中具有重要作用:Western Blot和ELISA分析表明Theasaponin E1能夠誘導STC-1細胞中TGR5蛋白表達和胞內(nèi)cAMP水平的升高。采用RNA沉默技術(shù)敲除細胞TGR5,能夠抑制Theasaponin E1誘導GIP的mRNA表達上升。這一結(jié)果表明TGR5在Theasaponin E1調(diào)節(jié)GIP表達中具有重要作用。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)茶籽皂苷能夠通過SGLT-1和TGR5相關(guān)通路刺激GIP的表達,提示該類物質(zhì)可能在調(diào)節(jié)改善二型糖尿病等代謝性疾病方面具有進一步研究價值和應用前景。
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖１．１山茶屬植物籽皂苷的化學結(jié)構(gòu)逡逑Ｆｉｇ．邋１．１邋Ｃｈｅｍｉｃａｌ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｓａｐｏｎｉｎｓ邋ｆｒｏｍ邋ｔｈｅ邋ｇｅｎｕｓ邋Ｃａｍｅｌｌｉａ邋ｓｅｅｄｓ．逡逑６逡逑

２．３．１．１茶籽總皂苷對小鼠小腸ＧＩＰ邋ｍＲＮＡ表達的影響逡逑通過灌胃給予茶籽總皂苷，在不同時間點（０，邋０．５，１，邋２，邋３，４，邋６，１２，２４ｈ）處死逡逑小鼠并收集小腸組織，利用ＲＴ－ＰＣＲ定量檢測ＧＩＰ邋ｍＲＮＡ的表達水平。由圖２．１所示，一次逡逑性給予６５邋ｍｇ／ｋｇＢＷ劑量總皂苷后，ＧＩＰ的ｍＲＮＡ表達出現(xiàn)整體先升高后降低的現(xiàn)象，并逡逑在ｌｈ內(nèi)徶到最高值，約為對照組的７倍，統(tǒng)計學差異顯著（ｐ＜０．０５）。逡逑８００－逡逑．邐Ａ逡逑７００－逡逑ｆ邐＇邐ｂ逡逑Ｃ邋＜；００－邐Ｔ逡逑■邐Ｉ逡逑Ｉ０邋５邋ｊ邐＾邋＾邐＾逡逑ｌ邋Ｉ邋１邋■逡逑Ｉ邋ｆ逡逑■邋＾逡逑、：ｕ邋……：ｈNB逡逑０邐０．邋ｎ邋１邐２邐３邐４邐１２邐２－１逡逑Ｔｉｍｅｓ邋ａｆｔｅｒ邋ａｄｍｉｎｉｓｌｒａｌｉｏｎ邋ｏｆ邋ｌｏｔａ！邋ｓａｐｏｎｉｎｓ邋ｆｒｏｉｎ邋ｔｅａｓｅｃｄ＾ｈ）逡逑圖２．１茶籽總皂苷對小鼠小腸ＧＩＰ邋ｍＲＮＡ表徸的影響。數(shù)據(jù)結(jié)果用平均數(shù)土標準偏差表示。逡逑不同的字母表示顯著性差異（ｐ＜０．０５）。逡逑Ｆｉｇ．２．１邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｔｅａ邋ｓｅｅｄ邋ｔｏｔａｌ邋ｓａｐｏｎｉｎｓ邋ｏｎ邋ｔｈｅ邋ＧＩＰ邋ｍＲＮＡ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｓｍａｌｌ邋ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ邋ｏｆ逡逑ｍｉｃｅ．邋Ｄａｔａ邋ａｒｅ邋ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ邋ａｓ邋ｍｅａｎｓ邋士邋ＳＤ邋ｆｒｏｍ邋ｔｈｒｅｅ邋ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ．邋Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ邋ｂｅｔｗｅｅｎ逡逑ｄｉ

通過灌胃給予６５ｍｇ／ｋｇＢＷ劑量茶籽總皂苷后，在不同時間點（0，０．５，１，２，邋３，邋４，逡逑６，１２，邋２４ｈ）處死小鼠并收集小腸組織，利用酶聯(lián)免疫法（ＥＬＩＳＡ）定量測定ＧＩＰ蛋白的逡逑表徸水平。由圖２．２所示，ＧＩＰ蛋白表達同樣出現(xiàn)整體先升高后降低的情況，在３ｈ時徸到最逡逑大值，約為對照組的３．５倍。逡逑４００邋－逡逑ａ逡逑３５０邋＿逡逑＾邋３００邋－邐Ｉ逡逑■邋Ｉ逡逑Ｉ２００邋：邐ｔ邋１邐■邋Ｃｄ逡逑ｄｒ邋ｒ邋ｌｌｌｌｉ邋ｅ逡逑ｉｉｉＢＥＳｌｉＢ逡逑０邋０．５邋１邐２邋３邐４邋６邋１２邋２４逡逑Ｔｉｍｅｓ邋ａｆｔｅｒ邋ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｔｏｔａｌ邋ｓａｐｏｎｉｎｓ邋ｆｒｏｍ邋ｔｅａ邋ｓｅｅｄ（ｈ）逡逑圖２．２茶籽總皂苷對小鼠小腸ＧＩＰ蛋白表達的影響。數(shù)據(jù)結(jié)果用平均數(shù)土標準偏差表示。逡逑不同的字母表示顯著性差異（ｐ＜０．０５）。逡逑Ｆｉｇ．２．２邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｔｅａ邋ｓｅｅｄ邋ｔｏｔａｌ邋ｓａｐｏｎｉｎｓ邋ｏｎ邋ｔｈｅ邋ＧＩＰ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｓｍａｌｌ邋ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ邋ｏｆ逡逑ｍｉｃｅ．邋Ｄａｔａ邋ａｒｅ邋ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ邋ａｓ邋ｍｅａｎｓ邋士邋ＳＤ邋ｆｒｏｍ邋ｔｈｒｅｅ邋ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ．邋Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ邋ｂｅｔｗｅｅｎ逡逑ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐｓ邋ａｒｅ邋ｓｈｏｗｅｄ邋ｂｙ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｌｅｔｔｅｒｓ邋（ｐ邋＜邋０．０５）．逡逑２．３．２邋ＴＳＥ１對ＳＴＣ－１細胞中

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 盧江,李淑榮,石華,周洪杰,李瑞松,吳坤,哈益明;應用HACCP理念建立食品輻照企業(yè)GIP管理體系的探討[J];核農(nóng)學報;2005年03期

2 陳彥長;譚力文;;基于HACCP和GIP的輻照食品管理體系探討[J];中國科技論壇;2011年05期

3 王躍生;韓俊嶺;;胃旁路術(shù)對2型糖尿病大鼠空腹血糖及GIP分泌的影響[J];黑龍江醫(yī)藥科學;2012年02期

4 王琛;高宏凱;韓承新;張新國;;葡萄糖依賴性促胰島素激素(GIP)表達變化對血糖穩(wěn)態(tài)的影響[J];實用醫(yī)技雜志;2008年01期

5 蔡春沉;王洪璽;王肅;;地黃多糖對肥胖糖尿病大鼠模型的治療作用及對血清中GLP-1、GIP水平的影響[J];中國老年學雜志;2013年18期

6 黨珊;楊飛;呂宏軍;吳友偉;張健;易默;史麗萍;施秉銀;;GIP受體抑制劑對誘導的糖尿病小鼠糖脂代謝的研究[J];現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志;2017年05期

7 程紹臣;張劍南;鐘宇;李娟;王亞軍;;豬抑胃肽/葡萄糖依賴性促胰島素釋放肽(GIP)基因的克隆與組織表達分析[J];四川大學學報(自然科學版);2017年01期

8 孫雨晴;郭瑞娟;李俊發(fā);王云;;鞘內(nèi)應用GIP受體拮抗劑抑制大鼠切口痛的敏化[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2019年04期

9 王思雨;;高校乒乓球教學中的GIP動畫應用[J];當代體育科技;2014年08期

10 李世平;陳鎧;;一種用于GIP的并行流水浮點排序算法設(shè)計[J];科技經(jīng)濟導刊;2016年18期

相關(guān)會議論文 前1條

1 陳超鳳;沈潔;陳志;潘燕飛;謝敏;;不同糖代謝狀態(tài)人群OGTT條件下血漿GIP及GC水平變化[A];中華醫(yī)學會第二屆糖尿病及性腺疾病學術(shù)會議論文集[C];2012年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 本報記者 陳植;新加坡批量拒簽GIP投資移民 FIS、創(chuàng)業(yè)簽證曲線突進[N];21世紀經(jīng)濟報道;2012年

相關(guān)碩士學位論文 前9條

1 郭娜;茶（Camellia sinensis）籽皂苷誘導小鼠腸促胰素GIP分泌的作用機制[D];浙江大學;2019年

2 晉夢詩;GIP及GIPR基因多態(tài)性與腹型肥胖及代謝綜合征的相關(guān)性研究[D];浙江大學;2014年

3 鐘小全;基于J2EE的政務(wù)信息平臺（GIP）的研究與實現(xiàn)[D];南昌大學;2007年

4 宋文程;GIP衍生物的克隆、表達、純化及生物學活性研究[D];華東師范大學;2011年

5 盧茜;基于不同證型NAFLD相關(guān)因素的Logistic回歸分析及NAFLD血清GIP的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

6 宋紀強;胃轉(zhuǎn)流和胃袖狀切除術(shù)對正常Wistar大鼠血糖及GIP、ghrelin影響的研究[D];泰山醫(yī)學院;2012年

7 黃穎娟;基于因子和聚類分析的NAFLD（肝癖）證候及與血清GIP含量關(guān)系的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2010年

8 王偉;電子政務(wù)架構(gòu)的設(shè)計與實現(xiàn)[D];西北工業(yè)大學;2004年

9 徐常國;改良膽胰轉(zhuǎn)流術(shù)對非肥胖性2型糖尿病模型鼠血糖的影響及其機制的研究[D];福建醫(yī)科大學;2012年

本文編號：2756687