【摘要】：桔梗為重要的藥食兩用大宗藥材,來源于桔�？浦参锝酃latycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根,臨床常用于咳嗽痰多、胸悶不暢、咽痛音啞、肺癰吐膿等,現(xiàn)代研究表明桔梗具有鎮(zhèn)咳祛痰、抗炎、抗腫瘤等藥理活性。在1990~2005年版《中國藥典》中曾規(guī)定含總皂苷含量不得少于6.0%,之后(2010~2015版)則修訂為含桔梗皂苷D含量不得少于0.10%。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)因桔梗栽培產(chǎn)地分布較廣,其藥材質(zhì)量受到種源(遺傳)、生態(tài)、產(chǎn)地加工方法等多方面因素的影響,不同產(chǎn)地桔梗質(zhì)量存在較大差異,桔梗總皂苷含量與桔梗皂苷D含量間也并無明顯的關(guān)聯(lián)性;在最低有效劑量(0.2g·kg~(-1))下,不同產(chǎn)地樣品的鎮(zhèn)咳或祛痰作用存在較大差異,且并未顯示出與藥材中的總皂苷、桔梗皂苷D含量間的明確相關(guān)性或規(guī)律,說明桔�？傇碥湛赡懿⒎墙酃Ｋ幉逆�(zhèn)咳祛痰活性部位,桔梗皂苷D也可能并非桔梗藥材的主要活性成分,或桔梗鎮(zhèn)咳祛痰活性與桔梗皂苷成分之間可能存在復(fù)雜的關(guān)聯(lián)性。這種結(jié)果同時提示僅以總皂苷或桔梗皂苷D作為桔梗質(zhì)量評價與控制指標并不科學(xué)。另一方面,《中國藥典》中桔梗藥材薄層色譜鑒別方法用語模糊性高且在藥材提取及成分展開過程中大量使用氯仿。闡釋桔梗鎮(zhèn)咳祛痰活性與桔梗成分的科學(xué)內(nèi)涵是構(gòu)建更為科學(xué)合理的質(zhì)量控制方法的先決條件,而如何進一步明確薄層鑒別方法操作要求并降低氯仿使用量對于桔梗藥材的安全可靠鑒別具有重要研究意義�；诖�,本論文以不同產(chǎn)地桔梗藥材為研究對象,首先研究桔梗藥材鎮(zhèn)咳祛痰活性與其成分關(guān)聯(lián)性的科學(xué)內(nèi)涵,并對桔梗藥材的薄層鑒別方法進行了優(yōu)化,最后基于研究結(jié)果為提出了更為科學(xué)合理的桔梗藥材質(zhì)量評價與控制方法。主要方法與成果如下:1、采用氨水噴霧法及小鼠氣管酚紅排泄法研究了桔梗不同提取物部位的鎮(zhèn)咳祛痰活性,同時應(yīng)用UPLC/Q-TOF-MS/MS分析了不同部位皂苷成分及豐度分布,探討了桔梗鎮(zhèn)咳祛痰活性與桔梗成分之間的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)桔梗鎮(zhèn)咳祛痰活性與桔梗皂苷成分之間存在明顯的相關(guān)性,說明桔�？傇碥沾_為桔梗藥材的鎮(zhèn)咳祛痰活性主要部位。這提示是桔�？傇碥帐墙酃Ｋ幉馁|(zhì)量控制與評價的重要屬性,而其鎮(zhèn)咳活性與可能與其眾多皂苷成分的組成、含量分布均密切相關(guān)。2、采用HPLC-UV方法研究了全國10個省市產(chǎn)區(qū)31批桔梗藥材總皂苷指紋圖譜,并應(yīng)用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2012)”對指紋圖譜相似度進行了分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)全國不同產(chǎn)地桔�？傇碥罩讣y圖譜相似度介于0.673-0.985之間,其中相似度高于0.9的樣品共有23個,占樣品總數(shù)的74.19%;相似度在0.88以上的樣品共25個,占樣品總數(shù)的80.65%,說明全國不同產(chǎn)地桔梗樣品總皂苷成分雖有一定差異,但組成具有較高的相似性。此結(jié)果提示應(yīng)用桔�？傇碥兆鳛榻酃Ｋ幉馁|(zhì)量控制與評價指標存在可行性,但桔梗藥材的鎮(zhèn)咳祛痰活性可能與桔梗皂苷成分的含量分布密切相關(guān)。3、采用高效液相色譜法(HPLC-UV)方法對全國10個省市產(chǎn)區(qū)31批桔梗藥材的7個主要皂苷成分桔梗皂苷D、桔梗皂苷D2及D3、去芹糖桔梗皂苷D及D3、遠志皂苷D及D2的含量進行了測定,同時應(yīng)用2005版《中國藥典》規(guī)定方法分析了桔梗藥材的總皂苷含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),31批藥材桔梗總皂苷含量高于6%的樣品占93.55%,總皂苷含量平均值11.99%。7種皂苷的總含量在0.2182%~1.0218%之間,平均為0.5096%,說明桔梗中尚含有大量其它皂苷類成分且含量甚微。另外,7種皂苷成分各自的含量在各樣品間的差異均較大,與樣品中總皂苷的含量同樣未顯示出正相關(guān)性。因此,桔梗藥材大量皂苷成分含量較低且分布較寬的特點,導(dǎo)致使最低起效劑量下許多皂苷成分達不到起效劑量且起效成分的組成與總皂苷及桔梗皂苷D含量并不正相關(guān),最終使桔梗鎮(zhèn)咳祛痰活性與桔梗總皂苷及桔梗皂苷D并不正相關(guān)。這同時說明桔梗藥材質(zhì)量控制方法應(yīng)兼顧總皂苷及多種桔梗皂苷成分。4、對2015版《中國藥典》規(guī)定桔梗藥材薄層鑒別方法中的薄層板、樣品制備方法、上樣及展開溶劑系統(tǒng)以及加熱溫度等條件進行了優(yōu)化考察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用硅膠H板、應(yīng)用石油醚-乙酸乙酯展開體系、上樣量10μl并在105℃下燒烤150s可達到良好的鑒別效果,從而明確了薄層鑒別用語要求,降低了氯仿用量。
【學(xué)位授予單位】：江西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5;R284.1
【圖文】：

按照 2.4 項下方法分析桔梗提取物及部位群中的皂苷成分，（-）ES-MS 質(zhì)譜總離子流圖（TIC）結(jié)果見圖 1-1。由圖1-1可知，各部位總離子流圖在成分數(shù)目與強度兩方面存在顯著性差異，表明桔�？偺崛∥锍煞纸�(jīng)大孔樹脂得到了較好的分離。應(yīng)用 Peak View 1.6 軟件分析其中各皂苷成分的保留時間（Retention Time，RT）、強度（Intensity）及精確分子量（M-H-）信息，結(jié)果見表 1-4 及圖 1-2。A

圖 1-1 桔梗提取物各部位群在負離子模式下的總離子流圖. A.總提取物B.10%乙醇部位 C.30%乙醇部位 D.60%乙醇部位 E.95%乙醇部位Fig.1-1 Total ion chromatogram of the various fractions from P. grandiflorum(Jacq.) A. DC by UPLC-Q-TOF/MS in negative mode. A-E Represent the total ionchromatogram of total sapoins and 10%, 30%, 60% 95% fraction, respectively.圖 1-2 桔梗皂苷成分在不同部位的分布. A 桔梗皂苷成分在不同部位中的26226 2670102030梗皂苷成分數(shù)量桔0.0958550.00050.2211981.1715980.000800.511.5梗皂苷桔D收強度吸萬百

圖 2-3 不同色譜柱樣品色譜圖。A.COSMOSIL C18-MS0II；B. Diamonsil C18；C.YMC Hydrosphere C18Fig. 2-3 sample chromatogram of different chromatographic column. A.COSMOSILC18-MS0II；B. Diamonsil C18；C. YMC Hydrosphere C182.2.2.4 不同流速、柱溫及進樣量的考察采用 YMC Hydrosphere C18 作為色譜分析柱，以梯度 3 作為流動相洗脫梯度，分別對 0.6、0.8、1.0 ml·min-1三個不同的流速，25°C、30°C、35°C 三個不同柱溫和 5μl、10μl、20μl 三個不同進樣量在 210nm 波長處液相色譜峰的影響進行了考察。結(jié)果見圖 2-4A

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉曉穎;李勇樸;;不同劑量奧亭止咳露鎮(zhèn)咳祛痰療效比較[J];中國藥業(yè);2008年05期

2 王愛宇;;鎮(zhèn)咳祛痰藥的分類和使用原則[J];實用醫(yī)技雜志;2007年32期

3 許啟泰,杜鋼軍;咳安的鎮(zhèn)咳祛痰作用研究[J];河南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2001年04期

4 付超美,李萍,賈國夫;鎮(zhèn)咳祛痰膠囊質(zhì)量標準研究[J];中成藥;1997年08期

5 張振家;張冬青;;介紹一種新的鎮(zhèn)咳祛痰合劑[J];藥學(xué)情報通訊;1987年02期

6 曾頌;李書淵;吳志堅;黃玉梅;陳艷芬;楊全;陳偉民;蘇彬;;半夏鎮(zhèn)咳祛痰的成分-效應(yīng)關(guān)系研究[J];中國現(xiàn)代中藥;2013年06期

7 陳艷芬;江濤;唐春萍;李書淵;房志堅;;小葉榕不同提取物鎮(zhèn)咳祛痰作用的比較研究[J];中醫(yī)藥導(dǎo)報;2010年07期

8 陳世兵;張娜;;護理干預(yù)對復(fù)方甘草口服液鎮(zhèn)咳祛痰效果的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2010年19期

9 黃小平,張莉,楊大堅;露木爾鎮(zhèn)咳祛痰有效部位研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2005年01期

10 蔡光先;鎮(zhèn)咳祛痰合劑的實驗研究[J];中國醫(yī)藥學(xué)報;1997年02期

相關(guān)會議論文 前8條

1 任東波;譚文敏;何忠梅;;兔膽粉和熊膽粉的鎮(zhèn)咳祛痰藥理作用研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會養(yǎng)兔學(xué)分會成立大會暨第一屆學(xué)術(shù)交流大會論文集[C];2015年

2 王建華;侯艷鵬;蔡少青;譚煥然;阮元;;旋覆花素鎮(zhèn)咳祛痰作用的實驗研究[A];中國中醫(yī)藥研究促進會專業(yè)委員會成立大會暨“全國中藥關(guān)鍵技術(shù)研討會”資料匯編[C];2003年

3 單鳴秋;高靜;丁安偉;;柏科藥用植物研究進展[A];全國第8屆天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

4 向輝;邱云波;;五味子藥效與臨床應(yīng)用研究[A];2011年全國醫(yī)藥學(xué)術(shù)論壇交流會暨臨床藥學(xué)與藥學(xué)服務(wù)研究進展培訓(xùn)班論文集[C];2011年

5 李創(chuàng)軍;薛清春;楊敬芝;張東明;;瓜子金的化學(xué)成分研究(摘要)[A];第十屆全國中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

6 趙華;;淺談冬蟲夏草藥理作用及食用方法[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會2013年藥房管理分會學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2013年

7 瞿偉菁;朱欣華;黃曉菁;王燕;胡彤;毛述永;;金耳及發(fā)酵產(chǎn)物的生藥學(xué)研究[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

8 吳彥;田兆福;孟冬玲;杜樹山;王萍娟;朱茂祥;白家峰;黃東業(yè);;復(fù)方中藥萃液對卷煙的生物學(xué)減害作用研究[A];廣西煙草學(xué)會2013年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

相關(guān)重要報紙文章 前9條

1 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院呼吸科 陳小東 張有志;使用鎮(zhèn)咳祛痰藥的注意事項[N];家庭醫(yī)生報;2003年

2 成言;“問題藥”出現(xiàn)以后[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

3 ;咳嗽時吃水果有講究[N];蚌埠日報;2009年

4 李惠明;治咳嗽可對癥吃水果[N];科技日報;2006年

5 賈源隆;甘草片含化效果好[N];健康時報;2006年

6 醫(yī)師 王開珍;冬季話“咳嗽”[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

7 山東中醫(yī)藥高等�？茖W(xué)校 蘇新民;含服甘草片，止咳效更佳[N];中國醫(yī)藥報;2015年

8 趙美法;加入WTO我國TMB產(chǎn)業(yè)亟需提升競爭力[N];中國化工報;2002年

9 李春來;對癥選擇咳嗽藥[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 謝雄雄;桔梗鎮(zhèn)咳祛痰藥效物質(zhì)闡釋與質(zhì)量控制方法優(yōu)化研究[D];江西中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 霍妍;細葉杜香對小鼠鎮(zhèn)咳祛痰抗炎作用的有效部位及化學(xué)成分研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2014年

3 劉薇;福建翅莖香青化學(xué)成分及藥效學(xué)研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2012年

4 巴音吉日嘎拉;牛磺酸的抗炎及其鎮(zhèn)咳祛痰平喘作用研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

5 安然;白術(shù)潛在功能的邏輯發(fā)現(xiàn)與實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2010年

6 曾頌;基于灰色關(guān)聯(lián)分析法的半夏質(zhì)效評價研究[D];廣東藥學(xué)院;2013年

7 朝魯門;蒙藥材懸鉤子木鎮(zhèn)咳祛痰作用的藥理研究[D];內(nèi)蒙古民族大學(xué);2013年

8 譚文敏;兔膽粉和熊膽粉成分分析及藥理作用比較研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

本文編號：2754581