【摘要】：中藥刺五加為五加科(Araliaceae)五加屬(Acanthopanax)植物刺五加(Acanthopanax senticosus(Rupr.Et Maxim.)Harms)的干燥根和根莖或莖。近年來,刺五加化學(xué)成分和藥理作用的研究熱點(diǎn)主要集中在皂苷類和黃酮類化合物上,且在心腦血管疾病的臨床治療中已得到了較為廣泛的應(yīng)用。刺五加多糖作為刺五加的重要活性成分之一,由于多糖類成分純化過程十分繁瑣,純化工藝復(fù)雜,純度不理想等因素限制了刺五加多糖在組分、構(gòu)效關(guān)系以及作用機(jī)制等方面的確證。本試驗(yàn)通過對長白山刺五加多糖(ASPS)化學(xué)組分的分析,并對其抗炎作用、鎮(zhèn)痛作用、藥物性肝損傷保護(hù)作用、結(jié)核性胸膜炎輔助治療作用、抗腫瘤作用、延緩衰老作用以及提高學(xué)習(xí)記憶能力作用的深入研究,同時(shí)對長白山刺五加多糖膠囊的制備工藝進(jìn)行了探討,以期為刺五加多糖的臨床應(yīng)用開發(fā)提供有利參考。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.本試驗(yàn)通過對長白山刺五加多糖的提取和分離,并采用高效液相色譜法和氣相色譜法對其化學(xué)成分進(jìn)行分析。結(jié)果表明,經(jīng)提取分離分析,刺五加苷E得率為93.1%;ASPS得率為96.7%,相對分子量為10KD。經(jīng)高效液相色譜分析,ASPS具有均勻?qū)ΨQ單一峰,表明其純度、極性及均一性均較好。經(jīng)氣相色譜分析,其單糖組分為阿拉伯糖:木糖:葡萄糖:甘露糖,摩爾比為7.1:22.3:7.6:1.0。2.本試驗(yàn)以二甲苯致小鼠耳廓腫脹、角叉菜膠致小鼠足趾腫脹、醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性提高以及棉球致小鼠肉芽腫為模型,對ASPS的抗炎作用進(jìn)行了研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,ASPS能夠有效抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹,角叉菜膠致小鼠足趾腫脹,醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性提高以及棉球致小鼠肉芽腫。同時(shí),對于不同抗炎模型,ASPS均能夠有效改善小鼠免疫器官狀況,對機(jī)體免疫細(xì)胞因子水平起到調(diào)節(jié)作用。3.本試驗(yàn)通過熱刺激對痛閾值的影響和醋酸致扭體反應(yīng),對ASPS的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,ASPS能夠提高熱刺激小鼠的痛閾值和鎮(zhèn)痛率,降低醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的扭體次數(shù),提高扭體反應(yīng)抑制率。同時(shí),對于不同鎮(zhèn)痛模型,ASPS均能使得小鼠免疫器官狀況得到明顯改善,細(xì)胞因子水平得到有效調(diào)節(jié)。4.本試驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)性結(jié)核小鼠為模型,對ASPS抗結(jié)核藥物性肝損傷作用及其機(jī)制進(jìn)行了研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,ASPS對抗結(jié)核治療的實(shí)驗(yàn)性結(jié)核小鼠表現(xiàn)出較好的保肝護(hù)肝效果,其機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)性結(jié)核小鼠血清細(xì)胞免疫因子水平和脾細(xì)胞T淋巴亞群免疫水平而提高實(shí)驗(yàn)性結(jié)核小鼠的免疫能力,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)其保肝護(hù)肝的作用。5.本試驗(yàn)以結(jié)核性胸膜炎大鼠為模型,對ASPS的治療效果極其機(jī)制進(jìn)行了研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,ASPS能降低結(jié)核胸膜炎大鼠胸腔積液及胸膜厚度,并能夠改善結(jié)核性胸膜炎大鼠胸腔積液白細(xì)胞計(jì)數(shù)及生化指標(biāo)。另外,ASPS還能夠改善和調(diào)節(jié)結(jié)核性胸膜炎大鼠的細(xì)胞免疫因子,這可能是其治療結(jié)核性胸膜炎的作用機(jī)制之一。6.本試驗(yàn)以肉瘤S180、肝癌H22和宮頸癌U14小鼠實(shí)體瘤和腹水瘤為模型,對ASPS的抗腫瘤作用及其機(jī)制進(jìn)行研究,并對其毒性進(jìn)行考察。結(jié)果表明,ASPS對肉瘤S180、肝癌H22和宮頸癌U14荷瘤小鼠的實(shí)體瘤質(zhì)量均具有較好的抑制作用,使得荷瘤小鼠的抑瘤率得到顯著改善,同時(shí)還能夠提高荷瘤小鼠的免疫器官指數(shù),調(diào)節(jié)荷瘤小鼠的免疫細(xì)胞因子,從而提高機(jī)體免疫能力,增強(qiáng)其抗病能力。另外,ASPS還能夠延長肉瘤S180、肝癌H22和宮頸癌U14腹水瘤小鼠的存活天數(shù),積極改善其生命延長率。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明,ASPS屬實(shí)際無毒物級物質(zhì)。7.本試驗(yàn)以D-半乳糖所致衰老小鼠為模型,對ASPS延緩衰老作用及其機(jī)制進(jìn)行研究。結(jié)果表明,ASPS能夠有效提高D-半乳糖所致衰老小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù),使得機(jī)體狀況得到改善;還能夠有效提高模型小鼠血清、腦、肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性、過氧化氫酶(CAT)活性,而降低血清、腦、肝組織中丙二醛(MDA)含量,進(jìn)一步證實(shí)了ASPS在增強(qiáng)機(jī)體抗氧化酶活性的同時(shí),降低了脂質(zhì)過氧化對細(xì)胞的損傷,從而起到了延緩衰老的作用。8.本試驗(yàn)以東莨菪堿所致急性記憶障礙大鼠為模型,采用避暗實(shí)驗(yàn)和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)對ASPS增強(qiáng)記憶能力及其機(jī)制進(jìn)行研究。結(jié)果表明,在避暗實(shí)驗(yàn)中,ASPS能夠有效延長記憶障礙大鼠的避暗潛伏期和明箱停留時(shí)間,減少避暗錯(cuò)誤次數(shù);而在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中,ASPS能夠延長記憶障礙大鼠的避暗潛伏期和原平臺停留時(shí)間,增多平臺探索次數(shù),同時(shí)還能有效提高模型大鼠腦組織和血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、降低丙二醛(MDA)含量,并對中樞膽堿能系統(tǒng)的乙酰膽堿酯酶(AChE)活性和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChAT)活性起到改善作用,從而起到增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶能力的作用。9.本試驗(yàn)通過輔料篩選、制粒工藝條件篩選、藥粉成型性研究、膠囊制備以及膠囊制劑的檢測等方面的考察,對ASPS膠囊制劑的工藝進(jìn)行研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,玉米粉更適合作為ASPS的輔料應(yīng)用于膠囊劑型的制備。90%的乙醇濃度,1:1的料液比,60℃的干燥溫度,1h的干燥時(shí)間可以使ASPS的顆粒外形和制粒效果呈現(xiàn)較好狀態(tài)。在ASPS膠囊的生產(chǎn)和貯存過程中,應(yīng)將相對濕度嚴(yán)格控制在62%以下以確保藥粉的質(zhì)量。ASPS膠囊內(nèi)容物含水量為7.04%,平均內(nèi)容物裝量為0.4315g,平均崩解時(shí)限為17.43min,均符合《中國藥典》(2015版)的相關(guān)規(guī)定。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285;R284
【圖文】：

圖 1-1 長白山刺五加多糖高效液相色譜圖Fig.1-1 The HPLC of ASPS白山刺五加多糖的單糖組分氣相色譜分析驗(yàn)結(jié)果見圖 1-2，從圖 1-2 中可以看出，經(jīng)氣相色譜分析，長白山刺五組成，通過與標(biāo)準(zhǔn)單糖保留時(shí)間的比較，長白山刺五加多糖由阿拉伯糖甘露糖組成。通過計(jì)算圖 1-2 中每個(gè)峰所占峰面積，可知長白山刺五加爾比為，阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：甘露糖=7.1：22.3：7.6：1.0。

圖 1-1 長白山刺五加多糖高效液相色譜圖Fig.1-1 The HPLC of ASPS刺五加多糖的單糖組分氣相色譜分析果見圖 1-2，從圖 1-2 中可以看出，經(jīng)氣相色譜分析，長白，通過與標(biāo)準(zhǔn)單糖保留時(shí)間的比較，長白山刺五加多糖由阿糖組成。通過計(jì)算圖 1-2 中每個(gè)峰所占峰面積，可知長白山為，阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：甘露糖=7.1：22.3：7.6：1

Note: compared with control group, *P < 0.05，**P < 0.012.2.1.2 長白山刺五加多糖對二甲苯致小鼠耳腫脹免疫器官的影響本試驗(yàn)結(jié)果見圖2-1，從圖2-1中可以看出，與正常組和對照組相比，刺五加多糖高、中劑量組小鼠脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)均明顯提高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；而陽性對照組小鼠脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)均有所降低，但差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與陽性對照組小鼠相比，刺五加多糖高劑量組脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)，中劑量組脾臟指數(shù)均明顯提高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。圖2-1 長白山刺五加多糖對二甲苯致小鼠耳腫脹免疫器官的影響Fig. 2-1 Effects of ASPS on immune organs of ear auricle swelling of mice caused by xylene注：與對照組比較 *P < 0.05，**P < 0.01；與正常組比較

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2754444