【摘要】：目的:采用HPLC法探究何首烏(Polygonum multiflorum Thunb.)九蒸九曬炮制過程中指標(biāo)性成分二苯乙烯苷、游離蒽醌和結(jié)合蒽醌含量的變化規(guī)律;同時(shí)對(duì)影響何首烏炮制品質(zhì)量的因素進(jìn)行考察,采用正交試驗(yàn)優(yōu)化何首烏九蒸九曬炮制工藝,為何首烏的炮制提供新的工藝參數(shù);在優(yōu)化工藝的基礎(chǔ)上對(duì)何首烏進(jìn)行質(zhì)量方面的考察研究,擬定相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案,以更好地揭示何首烏九蒸九曬炮制的內(nèi)涵。最后采用細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對(duì)何首烏各炮制品的肝細(xì)胞活性做初步研究,探究何首烏九蒸九曬的合理性,為何首烏炮制減毒和臨床用藥安全性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.經(jīng)典與現(xiàn)代兩種炮制方法指標(biāo)性成分含量變化規(guī)律的研究結(jié)合文獻(xiàn),采用HPLC法測(cè)定何首烏九蒸九曬炮制品中指標(biāo)性成分的含量,并與藥典法何首烏比較,分析其變化規(guī)律。2.九蒸九曬炮制工藝的研究確定因素和水平,以指標(biāo)性成分的含量為考察指標(biāo),采用正交試驗(yàn),優(yōu)選何首烏最佳炮制工藝。3.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究依照2015版《中國(guó)藥典》的檢測(cè)方法,對(duì)不同批次的何首烏炮制品的性狀、顯微、薄層、水分、總灰分、浸出物和指標(biāo)性成分的含量進(jìn)行考察,對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。最后,依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,擬定何首烏九蒸九曬質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。4.何首烏各炮制品對(duì)肝細(xì)胞活性作用的研究采用CCK-8法測(cè)定九蒸九曬何首烏及正交實(shí)驗(yàn)各炮制品對(duì)正常人L02肝細(xì)胞的抑制率的影響,探究何首烏九蒸九曬的合理性。結(jié)果:1.經(jīng)典與現(xiàn)代兩種炮制方法指標(biāo)性成分含量變化規(guī)律的研究九蒸九曬炮制品中,二苯乙烯苷的含量隨蒸曬次數(shù)的增加呈明顯下降趨勢(shì),結(jié)合蒽醌和總蒽醌含量整體呈下降趨勢(shì),游離蒽醌的含量逐漸增加。藥典法何首烏各成分的含量與九蒸九曬品中的四蒸四曬品接近。2.九蒸九曬炮制工藝的優(yōu)化通過前期實(shí)驗(yàn),確定蒸制時(shí)間(A)、曬制時(shí)間(B)和蒸曬次數(shù)(C)三個(gè)因素,并分別設(shè)置三水平,以二苯乙烯苷、游離蒽醌及結(jié)合蒽醌含量為考察指標(biāo)進(jìn)行正交試驗(yàn)。結(jié)果顯示A_3B_1C_3為何首烏最佳炮制工藝,即蒸制4 h、曬制4 h、蒸曬11次。其中,影響何首烏九蒸九曬炮制工藝因素的主次順序?yàn)?ACB,即蒸制時(shí)間蒸曬次數(shù)曬制時(shí)間。3.何首烏九蒸九曬質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案的擬定對(duì)14個(gè)批次的何首烏進(jìn)行外觀性狀、水分、顯微、薄層、總灰分、浸出物及指標(biāo)性成分含量的檢測(cè),評(píng)價(jià)何首烏炮制品的質(zhì)量。其中,水分的平均值是13.51%,范圍9.15~16.35%;總灰分的平均值是2.75%,范圍2.12~4.98%;浸出物含量的平均值是5.07%,范圍0.77~10.39%;二苯乙烯苷含量的平均值是1.43%,范圍0.49~3.12%;游離蒽醌含量的平均值是0.295%,范圍0.147~0.611%;結(jié)合蒽醌含量的平均值是0.009%,范圍0.001~0.024%。最終,何首烏九蒸九曬質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案確立。4.何首烏各炮制品對(duì)肝細(xì)胞活性作用的研究炮制程度越深,何首烏對(duì)肝細(xì)胞的抑制率越弱。結(jié)論:1.經(jīng)典與現(xiàn)代兩種炮制方法指標(biāo)性成分含量變化規(guī)律的研究炮制對(duì)指標(biāo)性成分含量產(chǎn)生影響,可能與何首烏炮制減毒作用相關(guān)。2.優(yōu)化何首烏九蒸九曬的炮制工藝擬定炮制工藝參數(shù)為“蒸制4h、曬制4h、蒸曬11次”,在提升產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí),為大規(guī)模生產(chǎn)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。3.擬定的何首烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合性狀、顯微及薄層鑒別的要求,二苯乙烯苷含量不得少于0.40%,游離蒽醌含量不得少于0.100%,結(jié)合蒽醌的含量不得高于0.020%。4.何首烏各炮制品對(duì)肝細(xì)胞活性作用的研究細(xì)胞抑制率與炮制程度呈現(xiàn)一定的相關(guān)性,何首烏九蒸九曬具有一定的合理性。
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R283
【圖文】：

素、大黃素甲醚混合對(duì)照品；B. 何首烏及各炮制品游離蒽醌含量疊加圖；C. 何測(cè)疊加圖 1. 大黃素；2.大黃素甲醚；S1-S9. 一蒸一曬品至九蒸九曬品；S10. 藥S11. 何首烏生品圖 2 （制）何首烏蒽醌類含量測(cè)定 HPLC 色譜圖第二節(jié) 正交試驗(yàn)水平的確定文獻(xiàn)查閱及前期對(duì)何首烏九蒸九曬主要化學(xué)成分變化規(guī)律的制時(shí)間、曬制時(shí)間及炮制次數(shù)對(duì)其主要成分含量變化有較大素進(jìn)行考察。對(duì)于水平的確定，蒸制時(shí)間多參考古代文獻(xiàn)。豆半碗煮熟去豆”、“用竹刀刮去黑皮，米泔浸二日，切片，每豆三斗，每次用三升三合三勺，以水浸過甑內(nèi)，鋪豆一層藥一鍋上蒸之，豆熟為度。去豆用，九蒸九曬為佳�！薄ⅰ懊足锼�，切片，黑豆五升同首烏滾水浸一時(shí)，蒸熟去豆”、“水浸一

湖北 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕色 氣香微湖北野生 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕色 氣香微貴州 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕色 氣香微貴州 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕褐色 氣香微云南 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕色 氣香微云南 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕紅色 氣香微湖南 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕褐色 氣香微湖南 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕褐色 氣香微廣東 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕褐色 氣香微高橋藥材市場(chǎng) 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕褐色 氣香微高橋藥材市場(chǎng) 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕色 氣香微高橋藥材市場(chǎng) 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 黑褐色 氣香微高橋藥材市場(chǎng) 1 cm3見方的皺縮小塊 黑色 堅(jiān)硬 棕褐色 氣香微

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱云;劉樹紅;王伽伯;宋海波;李永綱;何婷婷;馬驍;王仲霞;王麗蘋;周坤;白云峰;鄒正升;肖小河;;何首烏及其制劑導(dǎo)致藥物性肝損傷的臨床分析[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志;2015年12期

2 楊文宇;陳祥貴;石泓;石一丁;;何首烏九蒸九曬炮制過程中質(zhì)量指標(biāo)的變化[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2015年10期

3 馬致潔;李曉菲;呂e

本文編號(hào)：2732141