【摘要】：目的:基于核磁共振(~1H-NMR)代謝組學(xué)技術(shù),結(jié)合生化指標(biāo)分析,研究交泰丸對(duì)失眠模型大鼠的干預(yù)作用,探討交泰丸干預(yù)失眠的作用機(jī)制。方法:將雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組和交泰丸組。交泰丸組灌胃交泰丸水提液,每天1次,連續(xù)5天,正常組和模型組灌胃等體積生理鹽水。實(shí)驗(yàn)第3天,模型組和交泰丸組一次性腹腔注射PCPA甲酯鹽酸鹽(564 mg·kg-1,相當(dāng)于PCPA 450mg·kg-1)建立失眠模型,正常組一次性腹腔注射等體積生理鹽水。實(shí)驗(yàn)期間觀察大鼠自發(fā)活動(dòng)變化。基于~1H-NMR代謝組學(xué)技術(shù)測(cè)定尿液樣本、血清樣本和海馬組織的代謝物圖譜,對(duì)代謝物圖譜進(jìn)行正交偏最小二乘判別分析(Orthogonal Partial Least-Squares Discriminant Analysis,OPLS-DA),運(yùn)用變量重要性投影(Variable Importance in the Projection,VIP)和t檢驗(yàn)篩選出組間具有顯著差異的代謝物。用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)大鼠下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中神經(jīng)保護(hù)因子如腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)生長因子(NGF)水平,凋亡相關(guān)因子如B細(xì)胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)及其相關(guān)X蛋白(Bax),神經(jīng)遞質(zhì)如谷氨酸(Glu)、膽囊收縮素8(CCK-8)水平,細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-6和膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)水平,并采用考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)測(cè)定組織樣品蛋白含量。結(jié)果:1.交泰丸能明顯抑制失眠大鼠自發(fā)活動(dòng)。2.(1)與正常組相比,模型組大鼠尿液中N-乙酰糖蛋白、丙酮、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、二甲胺水平顯著降低(P0.05),二甲基甘氨酸、�；撬帷⒈揭阴８拾彼崴斤@著升高(P0.05),與模型組比較,交泰丸組大鼠尿液中N-乙酰糖蛋白、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、二甲胺水平顯著升高(P0.05),二甲基甘氨酸、�；撬�、苯乙酰甘氨酸水平顯著降低(P0.05);(2)與正常組相比,模型組大鼠血清中LDL/VLDL、不飽和脂肪酸、異亮氨酸、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、O-乙酰糖蛋白、膽堿、磷酸膽堿、氧化三甲胺水平顯著升高(P0.05),與模型組比較,交泰丸大鼠血清中LDL/VLDL、異亮氨酸、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、膽堿、磷酸膽堿水平顯著降低(P0.05);(3)與正常組比較,模型組大鼠海馬中丙氨酸、γ-氨基丁酸、肌醇水平顯著降低(P0.05),N-乙酰天冬氨酸、肌酸/磷酸肌酸、甘油磷酸膽堿、�；撬崴斤@著升高(P0.05),與模型組比較,交泰丸大鼠丙氨酸、γ-氨基丁酸、肌醇水平顯著升高(P0.05),甘油磷酸膽堿、�；撬崴斤@著降低(P0.05)。3.與正常組比較,模型組大鼠下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中IL-2、IL-6、BDNF、NGF、CCK-8水平顯著降低(P0.05),下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中GFAP、Glu水平顯著升高(P0.05),下丘腦、海馬和前額葉皮質(zhì)中的Bcl-2/Bax比值顯著降低(P0.05),血清中Bcl-2/Bax比值沒有顯著差異;與模型組比較,交泰丸組大鼠下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中IL-2、IL-6、BDNF、NGF、CCK-8水平顯著升高(P0.05),下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中GFAP、Glu水平顯著降低(P0.05),同時(shí)交泰丸組大鼠下丘腦、海馬和前額葉皮質(zhì)中的Bcl-2/Bax比值顯著升高(P0.05),但血清中Bcl-2/Bax比值沒有明顯改變。結(jié)論:1.交泰丸能明顯抑制失眠大鼠自發(fā)活動(dòng)。2.交泰丸干預(yù)失眠的機(jī)制可能與調(diào)節(jié)機(jī)體脂質(zhì)代謝、能量代謝、氨基酸代謝、膽堿代謝和腸道菌群代謝有關(guān)。3.交泰丸干預(yù)失眠的機(jī)制可能與調(diào)節(jié)神經(jīng)保護(hù)因子BDNF、NGF,凋亡相關(guān)因子Bcl-2、Bax,神經(jīng)遞質(zhì)Glu、CCK-8和細(xì)胞因子IL-2、IL-6水平,抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞增生活化有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

10圖 2-1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖Fig 2-1 Schematic representation of experiment2.3 大鼠的自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)開始前將大鼠置于干凈的飼養(yǎng)籠中提前適應(yīng) 3 min，記錄各組大鼠 2 min 內(nèi)自主活動(dòng)時(shí)間和前肢離地舉立次數(shù)作為正�；顒�(dòng)反應(yīng)指標(biāo)。末次給藥后 1 h 再次測(cè)量各組大鼠上述指標(biāo)[59]。

圖 2-2 交泰丸對(duì)大鼠自發(fā)活動(dòng)的影響（ ±s, n=6）與模型組比較，*P<0.05。Fig 2-2 Effect of Jiao-Tai-Wan on the locomotor activity of rats ( ±s, n=6)*P<0.05 compared with the model group.3.2 大鼠的尿液樣本1H-NMR 代謝物圖譜分析3.2.1 尿液樣本1H-NMR 代謝物圖譜

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2730263