【摘要】：目的乳腺癌是目前最常見的女性惡性腫瘤之一,全球發(fā)病率正在逐年上升。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為乳腺癌屬本虛標(biāo)實(shí)之證,本虛為主,乳腺癌患者普遍存在氣血虧虛,故乳腺癌應(yīng)以扶正固本為總則,施以益氣補(bǔ)血法治療。然而益氣補(bǔ)血方藥對惡性腫瘤的臨床療效一直存在爭議,部分臨床醫(yī)生懼用補(bǔ)益類中藥�；谥嗅t(yī)扶正固本治則指導(dǎo)和課題組前期研究,本實(shí)驗(yàn)擬通過4T1乳腺癌荷瘤小鼠造模后給予當(dāng)歸、黃芪治療,探討益氣補(bǔ)血法對4T1乳腺癌小鼠血清及腫瘤組織IL-10、TGF-β1的影響。方法選取健康的BALB/c小鼠,通過皮下種植4T1乳腺癌細(xì)胞,建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型。將小鼠分為9組:空白對照組(N)、模型組(M)、當(dāng)歸低劑量組(DL)、當(dāng)歸中劑量組(DM)、當(dāng)歸高劑量組(DH)?黃芪低劑量組(HL)、黃芪中劑量組(HM)、黃芪高劑量組(HH)、環(huán)磷酰胺組(CTX)。分別依次給予生理鹽水(0.2m L)、生理鹽水(0.2m L)、低劑量當(dāng)歸(10mg/kg)、中劑量當(dāng)歸(30mg/kg)、高劑量當(dāng)歸(100mg/kg)、低劑量黃芪(30mg/kg)、中劑量黃芪(100mg/kg)、高劑量黃芪(300mg/kg)、CTX(30mg/kg)治療。造模48h后開始給藥,每3天給藥1次,空白對照組、模型對照組和中藥組采用灌胃給藥,CTX組采用腹腔注射給藥。每周觀察小鼠的精神狀態(tài)、皮毛光澤度等基本情況,測量并記錄體重和腫瘤長短徑,運(yùn)用公式計(jì)算腫瘤體積,繪制體重增長曲線和腫瘤生長曲線。造模當(dāng)天記為第1天,第28天進(jìn)行眼眶取血,剖取原位瘤、胸腺、腫瘤同側(cè)腋窩下淋巴結(jié)、肺臟及脾臟,稱重并計(jì)算各臟器指數(shù);肉眼觀察臟器的質(zhì)地、大小,并拍照記錄;用10%福爾馬林固定肺臟48h后,肉眼觀察并記錄各組的肺轉(zhuǎn)移灶大小,分別記錄數(shù)目;解剖后將各組的胸腺和腫瘤組織放入10%福爾馬林中固定,通過蘇木素-伊紅(HE)染色,觀察當(dāng)歸、黃芪對胸腺組織形態(tài)學(xué)的影響;目內(nèi)眥取血后,采用血常規(guī)檢測和血涂片法,觀察當(dāng)歸、黃芪對外周血象和細(xì)胞形態(tài)的影響;通過ELISA法,分析當(dāng)歸、黃芪對血清及腫瘤組織IL-10和TGF-β1水平的影響;通過免疫組化(IHC)法,分析當(dāng)歸、黃芪對胸腺組織CD3和腫瘤組織IL-10和TGF-β1表達(dá)的影響。結(jié)果與模型組相比,低劑量當(dāng)歸組顯著升高淋巴細(xì)胞數(shù)LYMPH、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)EO。中劑量當(dāng)歸組顯著升高淋巴細(xì)胞數(shù)LYMPH、大未染細(xì)胞數(shù)LCU。顯著降低了嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)BASO、嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%、平均紅細(xì)胞血紅蛋白MCH、血紅蛋白分布寬度CHDW。與模型組相比,低劑量黃芪組顯著降低嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量MCH、血紅蛋白分布寬度HDW。中劑量黃芪組顯著降低嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%、血紅蛋白分布寬度HDW;高劑量黃芪組顯著降低單核細(xì)胞數(shù)MONO、單核細(xì)胞百分比MONO%、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)BASO、嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%、平均紅細(xì)胞體積MCV。與正常組相比,模型組小鼠的胸腺重量、胸腺指數(shù)明顯下降。與模型組相比,高劑量當(dāng)歸組胸腺重量、胸腺指數(shù)顯著升高,并接近正常組。低劑量黃芪組和高劑量黃芪組胸腺重量明顯增加,胸腺指數(shù)顯著升高。與正常組相比,模型組小鼠的肺、脾、淋巴結(jié)重量明顯增加,肺、脾、淋巴結(jié)指數(shù)明顯升高。與模型組相比,低劑量當(dāng)歸組淋巴結(jié)、肺重量明顯增加,淋巴結(jié)、肺指數(shù)顯著升高。中劑量當(dāng)歸組肺指數(shù)明顯升高。中劑量黃芪組(P0.05)肺指數(shù)較模型組明顯升高。模型組小鼠普遍發(fā)生肺轉(zhuǎn)移。與模型組相比,低劑量當(dāng)歸組、中劑量當(dāng)歸組、高劑量當(dāng)歸組、低劑量黃芪組和高劑量黃芪組的肺大轉(zhuǎn)移灶數(shù)明顯下降。低劑量黃芪組和高劑量黃芪組的肺總轉(zhuǎn)移灶數(shù)和肺轉(zhuǎn)移率也明顯下降。正常組小鼠的胸腺組織,淋巴細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,輪廓清楚,分布均勻;模型組小鼠的胸腺組織,淋巴細(xì)胞形態(tài)、大小不一,量少而稀疏;CTX組小鼠的胸腺組織,淋巴細(xì)胞大小不一,排列紊亂,細(xì)胞核形態(tài)各異;當(dāng)歸和黃芪組胸腺組織淋巴細(xì)胞有不同程度的改善。與正常組相比,模型組CD3陽性表達(dá)顯著降低。CTX組CD3陽性表達(dá)較模型組增多。與模型組相比,低、中、高劑量當(dāng)歸組和低、中、高劑量黃芪組胸腺的CD3陽性表達(dá)均有不同程度的增加。模型組血清IL-10水平與正常組相比顯著升高。中、高劑量黃芪組和CTX組小鼠血清IL-10水平均顯著低于模型組。模型組血清TGF-β1水平與正常組相比顯著升高。與模型組相比,低、中劑量當(dāng)歸組小鼠血清TGF-β1水平顯著降低;低、中劑量黃芪組小鼠血清TGF-β1水平顯著降低;CTX組小鼠血清TGF-β1水平顯著降低。乳腺癌腫瘤組織IL-10和TGF-β1表達(dá)陽性,模型組腫瘤組織呈現(xiàn)IL-10高表達(dá)。CTX組腫瘤的IL-10陽性表達(dá)較模型組明顯降低。與模型組相比,低、中、高劑量當(dāng)歸組和低、中、高劑量黃芪組腫瘤的IL-10陽性表達(dá)均有減少。其中,各劑量黃芪組減少更明顯。模型組腫瘤組織呈現(xiàn)TGF-β1高表達(dá)。CTX組腫瘤的TGF-β1陽性表達(dá)較模型組明顯降低。與模型組相比,各劑量當(dāng)歸組和黃芪組腫瘤的TGF-β1陽性表達(dá)均減少。結(jié)論1.當(dāng)歸、黃芪能改善4T1乳腺癌小鼠外周血淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞異常,改善胸腺結(jié)構(gòu),增加胸腺重量和指數(shù),減少肺轉(zhuǎn)移,具有一定的抗乳腺癌作用。2.IL-10和TGF-β1可能是當(dāng)歸、黃芪改善4T1乳腺癌小鼠外周血象、降低肺轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖 5 當(dāng)歸、黃芪對 4T1 乳腺癌小鼠肺、脾和腫瘤重量的影響注：與正常組比較，#P<0.05,##P<0.01；與模型組比較，*P<0.05,**P<0.010200400600800100012001400N M DL DM DH HL HM HH CTX量（重gm）肺重量 脾重量 腫瘤重量##*****##

塵樣的紫紅色顆粒，胞核大，核形不規(guī)則，呈腎形、馬蹄形等，常折疊彎曲，淡紫紅色，染色質(zhì)細(xì)致、疏松如網(wǎng)狀。由圖9可見，乳腺癌荷瘤小鼠的中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞增多

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 夏永潮;;重用岷當(dāng)歸組方治療心腦疾病探討[J];天津中醫(yī);1989年01期

2 林春龍,張珍祥,徐永健,倪望,陳仕新;當(dāng)歸抑制人肺血管平滑肌細(xì)胞黏著斑激酶的表達(dá)[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2005年16期

3 劉煜敏,章軍建,姜健,黃朝云,任善玲,高永哲;當(dāng)歸注射液治療急性腦梗塞患者的臨床療效觀察[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2004年03期

4 林濤;王濤;蔣學(xué)俊;;當(dāng)歸對高糖所致內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J];微循環(huán)學(xué)雜志;2008年03期

5 周琴;廖維靖;楊萬同;;當(dāng)歸與阿魏酸鈉對促進(jìn)局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)功能恢復(fù)作用的比較[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年03期

6 付曉艷;姚楠;王志旺;鞏子漢;韋凌霞;程小麗;段海婧;李雪燕;;當(dāng)歸與激素對小鼠哮喘的影響[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;2018年18期

7 鄧毅;寧紅霞;任鵬飛;張艷萍;;甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸對小鼠肝臟功能及組織形態(tài)影響的比較研究[J];中醫(yī)研究;2013年09期

8 蔣玉宇;曹世宏;孫子凱;;當(dāng)歸抗大鼠肺間質(zhì)纖維化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國微循環(huán);2006年05期

9 熊希凱,蔡秋云,張艷,彭漢林,周潔萍,羅和生,李少白,過晉源;當(dāng)歸對D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝損害保護(hù)作用的組織化學(xué)觀察[J];武漢醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1982年04期

10 李悅山,張建龍,薛磊;黃芪與當(dāng)歸對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖及VEGF表達(dá)的影響[J];新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期

相關(guān)會議論文 前2條

1 林濤;王濤;蔣學(xué)俊;;當(dāng)歸對高糖培養(yǎng)環(huán)境中的內(nèi)皮細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

2 廖成榮;盛小倩;;腦病治療常用中藥藥對舉隅(摘要)[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會2014第七次臨床中藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 杭州市第四人民醫(yī)院 李立安;治便秘的良方[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 潘珍珍;基于益氣補(bǔ)血法探究當(dāng)歸、黃芪醇提物對4T1乳腺癌小鼠血清及腫瘤組織IL-10和TGF-β1的影響[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 陳蓓蓓;當(dāng)歸揮發(fā)油對自發(fā)性高血壓大鼠miRNA差異表達(dá)譜的影響[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 石威;從益氣活血方拆方對健康人血小板聚集功能的影響探討其組方原理[D];華中科技大學(xué);2008年

4 李曉斌;大黃、木香、當(dāng)歸組合抗腫瘤作用的最佳配伍比例研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2006年

5 湯宇;大黃當(dāng)歸木香的不同配伍抑瘤作用的藥效學(xué)研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2008年

6 叢麗娜;當(dāng)歸補(bǔ)血湯拮抗環(huán)磷酰胺毒副反應(yīng)的配伍規(guī)律研究[D];遼寧中醫(yī)學(xué)院;2005年

7 張小琦;復(fù)方當(dāng)歸穴位注射減輕分娩疼痛的臨床研究[D];福建中醫(yī)學(xué)院;2009年

8 張明;甘肅不同產(chǎn)地當(dāng)歸質(zhì)量及補(bǔ)血活血作用的比較研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

9 吳仕澤;無憂湯常用藥對干預(yù)抑郁大鼠模型行為及中樞遞質(zhì)的實(shí)驗(yàn)研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2013年

本文編號：2729727