【摘要】：目的:觀察淫羊藿苷和寶藿苷I干預(yù)氣管切開模型大鼠,在早期不同時間點(24 h、72 h、168 h)肺組織病理形態(tài)學(xué)、肺組織中?防御素-2(rBD2)mRNA相對表達量,肺泡灌洗液中IL-6、TNF-?和sIgA,外周血T細胞亞群和IL-6以及肺泡灌洗液和外周血中rBD2含量的變化。探討淫羊藿苷和寶藿苷I對氣管切開大鼠早期肺部炎癥的干預(yù)效果。方法:將72只SPF級雄性SD大鼠隨機分成空白對照組(A)、模型非用藥組(B)、模型+寶藿苷I組(C)和模型+淫羊藿苷組(D),每組18只。參照經(jīng)典文獻制備大鼠氣管切開模型。成功造模約6 h后,C組灌胃寶藿苷I、D組灌胃淫羊藿苷,A、B組灌胃等量生理鹽水。觀察并記錄實驗大鼠一般情況。每組分別在第24 h、72 h、168 h采集6只大鼠外周血、肺泡灌洗液及肺組織。應(yīng)用流式細胞技術(shù)檢測外周血T細胞亞群(CD3~+,CD4~+,CD8~+),并計算CD4~+/CD8~+值;實時熒光定量PCR(qPCR)檢測肺組織中rBD2 mRNA相對表達量;ELISA檢測肺泡灌洗液中rBD2、sIgA、IL-6、TNF-?及血清中rBD2、IL-6含量;HE染色肺組織切片,光鏡下觀察肺組織病理形態(tài)學(xué)變化,并進行肺組織病理評分。結(jié)果:(1)實驗大鼠一般情況A組大鼠一般情況良好。B組大鼠開始階段活動量增加、精神狀態(tài)明顯較A組活躍且易激惹,但隨著時間延長,活動量減少、精神狀態(tài)逐漸倦怠,氣管導(dǎo)管內(nèi)以及口鼻可見黃色粘稠分泌物,呼吸急促,伴有痰鳴,進食、飲水量減少,皮毛干燥、無光澤。C、D組開始易激惹,隨著用藥時間延長,精神狀態(tài)、進食飲水逐漸恢復(fù),導(dǎo)管及口鼻分泌物較少,呼吸逐漸均勻,皮毛可見光澤。(2)肺組織病理形態(tài)學(xué)變化及病理評分B組肺組織損傷隨時間延長逐漸加重,病理評分均明顯高于A組正常大鼠(均P(27)0.05),呈升高趨勢;C組損傷程度較B組輕,隨著時間延長,肺泡融合數(shù)目減少,間隔變窄,肺泡腔、支氣管管腔及周圍炎性細胞逐漸減少,病理評分在168 h明顯低于B組(P(27)0.05);D組肺組織病理損傷程度輕于B、C組,且隨著時間延長,肺組織結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)至正常組水平,在72 h、168 h病理評分明顯低于B組(均P(27)0.05),且D組在24 h、168 h病理評分明顯低于C組(均P(27)0.05)。(3)肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α含量B組肺泡灌洗液中IL-6和TNF-?含量在三個時段均明顯高于A組(均P(27)0.05)。C、D兩組在72 h、168 h均明顯低于B組同時段水平(均P(27)0.05);且C、D組組內(nèi)IL-6和TNF-?含量在72 h、168 h均明顯低于24 h(均P(27)0.05);且D組TNF-α在72 h、168 h均明顯低于C組(均P(27)0.05)。(4)肺泡灌洗液中sIgA含量B組肺泡灌洗液中sIgA含量在第24 h明顯高于A組(P(27)0.01),隨后逐漸降低;C、D兩組sIgA含量在72 h、168h明顯高于B組(P(27)0.05);且D組在168 h明顯高于C組(P(27)0.01)。(5)肺組織中rBD2 mRNA表達B組氣切大鼠第24 h rBD2 mRNA表達明顯升高(P(27)0.01),隨后逐漸降低,72 h、168 h明顯低于A組(P(27)0.05);C組在168 h明顯高于B組(P(27)0.05);D組在第72 h、168 h明顯高于B、C組(均P(27)0.05)。(6)肺泡灌洗液和外周血中rBD2含量B組肺泡灌洗液rBD2含量在168 h明顯低于A組(P(27)0.05),而血清中rBD2與A無明顯統(tǒng)計學(xué)差異;C、D兩組BALF中rBD2含量在72 h、168 h明顯高于B組(P(27)0.05);且D組rBD2含量在168 h明顯高于C組(P(27)0.01)。血清中rBD2,C組在168 h明顯高于B組(P(27)0.01),D在72 h、168 h均明顯高于B組(P(27)0.05),且D組三個時段均明顯高于C組(P(27)0.05)。(7)外周血血清中IL-6含量B組在72h明顯降低(P(27)0.01),C、D兩組IL-6含量在三個時段均明顯低于A、B組(P(27)0.05)。且D組在168h明顯低于C組(P(27)0.05)。C、D兩組組內(nèi)各時段IL-6含量無明顯變化。(8)外周血中T細胞亞群B組外周血T細胞亞群CD3~+在24 h明顯降低(P(27)0.05),但是CD4~+、CD8~+與A組無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P(29)0.05)。C組CD3~+在24 h明顯高于B組(P(27)0.05),D組CD3~+在24 h、168 h明顯高于B組(P(27)0.01),C組CD4~+在168 h明顯高于B組(P(27)0.05),D組CD4~+在72 h、168 h明顯高于B組(均P(27)0.05);且D組CD3~+、CD4~+在168 h均明顯高于C組(P(27)0.05)。C組CD8~+在72 h、168 h明顯低于B組(均P(27)0.05);D組與B組無顯著性差異(P(29)0.05);C組CD4~+/CD8~+值與B組無顯著性差異(P(29)0.05);D組CD4~+/CD8~+值在168 h明顯高于A、B、C三組(均P(27)0.05)。結(jié)論:淫羊藿苷和寶藿苷I對氣管切開大鼠早期肺部炎癥具有一定的治療作用。該作用可能與降低肺泡灌洗液中IL-6、TNF-?及外周血IL-6含量,減輕肺組織病理損傷,提高肺泡灌洗液中sIgA含量,肺部和外周血中rBD2表達,降低外周血CD8~+百分比,提高CD4~+、CD4~+/CD8~+比值有關(guān)。從各指標結(jié)果綜合來看,淫羊藿苷效果優(yōu)于寶藿苷I。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

組大鼠肺組織病理變化（HE 染色, 100）athological changes of lung tissue in each group of rats (HE staining, 100)常對照組，B：模型非用藥組，C：模型+寶藿苷 I 組，D：模型+淫羊藿苷組。ormal control group, B : Model non-medication group, C: Model+baohuoside I group, D:riin group.灌洗液中 IL-6、TNF-α含量組大鼠氣管切開插管后肺泡灌洗液中 IL-6 和 TNF- 含量在三個時高于 A 組，且有顯著性差異（P = 0.003、0.000、0.003；0.004、0.0C、D 兩組分別用寶藿苷 I 和淫羊藿苷干預(yù)后， IL-6、TNF-α 含、168 h 均明顯低于 B 組，差異有顯著性（P 0.05）；且 C、D 組 和 TNF- 含量在 72 h、168 h 均明顯低于 24 h，有顯著性差異（D 組與 C 組相比，IL-6 含量差異無顯著性（P 0.05）。D 組 TN

43圖 5-2 各組外周血 T 細胞亞群A：正常對照組，B：模型非用藥組，C：模型+寶藿苷 I 組，D：模型+淫羊藿苷組Figure 5-2 Peripheral blood T cell subsets of each groupA: Normal control group, B: Model non-drug group, C: Model + Baohuoside I treatment group,D: Model + Icariin treatment group

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本文編號：2728391