【摘要】：目的:通過觀察葛根素對缺氧型肺動脈高壓大鼠在體模型中缺氧指標(biāo)和細(xì)胞模型中細(xì)胞增殖的影響,探討其可能的作用機制,為臨床的應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法:采用實驗室自行組裝的常壓低氧培養(yǎng)箱培養(yǎng)大鼠建立大鼠的缺氧模型:選取清潔級大鼠60只,隨機分成三組,即正常對照組、缺氧模型組、葛根素治療組,在實驗室正常環(huán)境下進行正常組培養(yǎng),于缺氧環(huán)境下進行缺氧組培養(yǎng),按計劃培養(yǎng)3 d、7 d、14 d、21 d后進行相關(guān)的檢測。測定的項目包括:肺動脈平均壓力(mPAP)、右心室肥厚指數(shù)(RVHI)、肺組織中超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛(MDA)含量等。采用膠原酶消化法培養(yǎng)大鼠原代肺動脈平滑肌細(xì)胞(PASMC),培養(yǎng)成功后建立大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞的高C02低02缺氧模型。實驗分組為模型組和葛根素不同濃度(50μ mol/L、100 μ mol/L、200 μ mol/L)干預(yù)組,分別放置于缺氧環(huán)境進行培養(yǎng),培養(yǎng)24h后進行數(shù)據(jù)檢測。數(shù)據(jù)監(jiān)測采用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),MTT法檢測PASMC活性,觀察對缺氧導(dǎo)致的細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果:1.肺動脈平均壓力結(jié)果比較:缺氧模型組大鼠隨著缺氧時間的增加mPAP明顯升高,14 d、21 d時mPAP高于正常對照組明顯,差異具有顯著性(P0.05);與缺氧模型組比較,14d、21d時葛根素組的mPAP明顯升高(P0.05)。2.右心室肥厚指數(shù)結(jié)果比較:缺氧模型組大鼠的右心肥厚指數(shù)隨著缺氧時間的增加明顯增高,差異具有顯著性(P0.05);葛根素組大鼠的右心肥厚指數(shù)也有一定的升高,14 d時與缺氧組比較,差異具有顯著性(P0.05);葛根素組21 d數(shù)值的升高開始均勻的減緩,與缺氧組比較具有顯著性差異(P0.01)。3.超氧化物歧化酶活性數(shù)值比較:缺氧模型組大鼠中SOD活性會隨著缺氧時間的增加而明顯降低,從14 d開始分析發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)差異具有顯著性(P0.05);葛根素治療組大鼠的超氧化物歧化酶活性也有一定程度上的降低,14d時的數(shù)值與缺氧組比較,差異具有顯著性(P0.05);葛根素組21 d的數(shù)值的降低開始均勻減緩,與缺氧模型組比較具有顯著性差異(P0.01)。4.丙二醛含量的結(jié)果比較:缺氧模型組大鼠中丙二醛含量會隨著缺氧時間的增加而明顯升高,14d開始測定數(shù)值與正常對照組相比,差異具有顯著性(P0.05);葛根素治療組大鼠的丙二醛含量也有一定程度的升高,14d的數(shù)值與缺氧組分析比較,差異具有顯著性(P0.05);葛根素治療組21 d的數(shù)值升高開始均勻減慢,與缺氧模型組數(shù)值統(tǒng)計比較,具有顯著性差異(P0.01)。5.PASMCs的培養(yǎng)和形態(tài)觀察:采用膠原酶消化法培養(yǎng)肺動脈平滑肌細(xì)胞成功率,可行性很強。采用倒置顯微鏡進行顯微觀察:細(xì)胞貼壁生長良好,細(xì)胞呈不規(guī)則的三角形或長梭形,符合肺動脈平滑肌細(xì)胞的生理特點,呈并行排列或簇狀生長(表1A),生長繁殖達(dá)到90%融合時,表現(xiàn)出典型血管平滑肌細(xì)胞"峰、谷"狀生長的特點(表1B)。6.葛根素對缺氧誘導(dǎo)的PASMC增殖的作用比較:葛根素干預(yù)的最佳濃度為100μg/mL。葛根素可以顯著的抑制缺氧導(dǎo)致的PASMC的增殖,從而減輕缺氧導(dǎo)致的肺血管重構(gòu),對缺氧性肺動脈高壓的治療有指導(dǎo)作用。結(jié)論:葛根素能有效抑制缺氧導(dǎo)致的肺動脈平均壓力增加及氧自由基增加,減輕其肺血管重構(gòu)的程度,對缺氧性肺動脈高壓有良好的治療作用和預(yù)防保護作用。葛根素對肺動脈平滑肌細(xì)胞有保護作用,對于缺氧導(dǎo)致的PASMC增殖和肺血管的重構(gòu),葛根素有明顯的抑制和減輕效果,證明其對缺氧性肺動脈高壓有良好的保護和治療效果。
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 謝靖;高惠春;鄭璽;;黃芪甲苷對急性腦出血大鼠神經(jīng)功能的影響[J];中國病理生理雜志;2016年10期

2 張國富;劉宏宇;;肺動脈高壓治療的進展[J];中國胸心血管外科臨床雜志;2015年12期

3 譚曉明;李燕明;;肺動脈高壓藥物治療進展[J];臨床藥物治療雜志;2015年02期

4 顏王鑫;宋冬;陳海娥;陳亮;何金波;陳丹;王萬鐵;;葛根素對再灌注損傷肝能量代謝的保護作用及機制[J];中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志;2014年10期

5 吳嘉瑞;張曉朦;張冰;;葛根素注射液輔助治療急性前壁心肌梗死的系統(tǒng)評價[J];中國實驗方劑學(xué)雜志;2014年11期

6 鄭亞國;熊長明;;左心疾病相關(guān)性肺動脈高壓診斷和治療進展[J];心血管病學(xué)進展;2014年02期

7 張亞西;李俊峰;鄭愛華;;葛根素治療老年冠心病不穩(wěn)定性心絞痛療效分析[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2013年24期

8 馬文東;袁媛;楊奕;徐洪;鄧海靜;于婉瑩;孫月;魏中秋;楊方;;TGF-β_1介導(dǎo)的RhoA/ROCK通路在大鼠肺肌成纖維細(xì)胞分化中的調(diào)節(jié)作用[J];中國病理生理雜志;2013年10期

9 陳果;何建國;柳志紅;顧晴;倪新海;熊長明;;不同類型肺動脈高壓患者臨床特征和血流動力學(xué)的比較分析[J];中國循環(huán)雜志;2013年04期

10 Shuang Ren;Hua Zhang;Yongping Mu;Mingyu Sun;Ping Liu;;Pharmacological effects of Astragaloside IV: a literature review[J];Journal of Traditional Chinese Medicine;2013年03期

本文編號：2728049