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發(fā)酵蟲草菌粉多糖理化性質(zhì)及其保肝活性研究

發(fā)布時間:2020-06-22 13:02
【摘要】:已往大量研究證實,蟲草多糖具有抗腫瘤、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、肝和腎保護等藥理作用。發(fā)酵蟲草菌粉(Cs-4)由我國科研人員從天然冬蟲夏草分離獲得Cs-4菌株,經(jīng)人工發(fā)酵培養(yǎng)制成的菌粉。本實驗以發(fā)酵蟲草菌粉為材料,經(jīng)水提醇沉、復(fù)溶、透析、濃縮、冷凍干燥得到粗多糖。粗多糖用DEAE-纖維素離子交換柱、sephadex-G-100柱多次分離純化,用苯酚-硫酸法測糖含量,用高效凝膠滲透色譜法測相對分子量,用毛細管電泳測單糖組成。以小鼠腹腔脾細胞為靶細胞,探討粗多糖在體外對脾細胞增殖及分泌IFN-γ的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),能夠增強腹腔脾細胞的增殖活性,有提高細胞因子IFN-γ分泌水平的趨勢;以小鼠腹腔巨噬細胞為靶細胞,探討粗多糖在體外對巨噬細胞分泌TNF-a的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),能夠明顯提高細胞因子TNF-a的分泌水平;以L-O_2細胞及高濃度ConA誘導(dǎo)L-O_2細胞損傷模型為研究對象,探究多糖組分和多糖成分對L-O_2細胞增殖及這種損傷作用的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),多糖組分和多糖成分能促進L-O_2細胞增殖,高濃度ConA能有效抑制L-O_2細胞增殖,而加入多糖組分和多糖成分后,這種抑制作用大大減弱,而且在一定范圍內(nèi),呈現(xiàn)量-效關(guān)系?傊,發(fā)酵蟲草菌粉多糖通過影響腹腔巨噬細胞和脾淋巴細胞能發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,關(guān)于免疫調(diào)節(jié)及其機制還需要深入研究;發(fā)酵蟲草菌粉多糖對L-O_2細胞有促進增殖作用及對ConA損傷的L-O_2細胞具有保護作用,關(guān)于促增殖作用及保護作用的機制還需要深入研究。
【學(xué)位授予單位】:貴州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R285.5
【圖文】:

洗脫曲線,粗多糖,洗脫曲線,柱層析


法檢測洗出液吸光度值(A490),收集主要糖峰,用蒸餾水透析至中性,至少量、冷凍干燥,得 CSMP-60-A、CSMP-60-B、CSMP-60-C 三個含糖組分圖 2-4 為洗脫示意圖。

洗脫曲線,柱層析,洗脫曲線,重復(fù)操作


圖 2-5 CSMP-60-B 經(jīng) Sephadex-G-100 柱層析洗脫曲線圖)CSMP-60-B-a 經(jīng) Sephadex G-100 柱層析CSMP-60-B-a,同上操作,合并 39 管→65 管,合并液透析至沒有 Cl-后,至適量,冷凍干燥,重復(fù)操作兩次,合并液透析至沒有 Cl-后,濃縮至適量干燥最終得到均一多糖 CSMP-60-B-Ⅰ。如圖 2-6 所示吸光度A管數(shù)

【參考文獻】

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本文編號:2725709

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