【摘要】：佛手為蕓香科植物佛手Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle.的干燥果實(shí),是嶺南地區(qū)的道地藥材,具有疏肝理氣、和胃止痛、燥濕化痰的功效。本研究擬建立佛手藥材HPLC指紋圖譜,將指紋圖譜結(jié)合模式識別方法分析不同產(chǎn)地佛手藥材,對佛手藥材的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行系統(tǒng)研究,并探討不同產(chǎn)地佛手藥材的特征成分,并從含量測定角度完善佛手的質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合近紅外建立質(zhì)量快速評價(jià)方法,實(shí)現(xiàn)佛手藥材的快速質(zhì)量評價(jià)。1.本章建立佛手HPLC指紋圖譜,并首次將佛手指紋圖譜結(jié)合模式識別方法分析不同產(chǎn)地佛手,結(jié)果表明同一產(chǎn)地佛手相似度較高,不同產(chǎn)地佛手具有差異。其中廣東、廣西相似度較為相近,四川佛手與兩廣佛手略有差異,浙江金佛手與兩廣、四川佛手均具有明顯差異。2.本章運(yùn)用LC-MS,建立了佛手快速定性的方法,最終共鑒定出24個(gè)化學(xué)成分,其中12個(gè)黃酮類成分、10個(gè)香豆素類成分和2個(gè)檸檬苦素類。采用GC-MS分析廣東、廣西、江西、四川、浙江的揮發(fā)性成分,總的揮發(fā)油含量分別達(dá)到93.91%、74.79%、85.06%、99.15%和91.96%。從其成分上分析,其中含氧單萜是主要的共有成分。單萜類,倍半萜,含氧倍半萜是導(dǎo)致不同產(chǎn)地佛手產(chǎn)生差異的主要成分。將非靶向代謝組學(xué)的方法用于不同產(chǎn)地佛手的研究,通過LC-Q TOF MS獲得大量的數(shù)據(jù),經(jīng)過一系列的統(tǒng)計(jì)篩選方法,最終篩選得到28個(gè)化合物,并確認(rèn)東莨菪亭是區(qū)別不同產(chǎn)地佛手的特征成分之一。PCA結(jié)合28個(gè)化合物實(shí)現(xiàn)佛手的產(chǎn)地判別。PLSDA基于28個(gè)化合物建立了一個(gè)良好的預(yù)測模型,實(shí)現(xiàn)佛手的產(chǎn)地識別。3.通過對63批佛手水分及浸出物的含量測定,可按國家藥典委員會的要求初步擬定,佛手藥材的含水量不得過15%和醇溶性熱浸出物不得少于15%;采用紫外分光光度法測定總黃酮和多糖含量,比較四個(gè)產(chǎn)地佛手藥材中總黃酮和多糖含量,結(jié)果表明浙江佛手總黃酮含量的整體水平最高,四川佛手總黃酮含量次之;市售不同產(chǎn)地佛手多糖含量存在差異,廣東佛手的多糖量最高,廣西次之,四川和浙江的多糖量較為接近,但四川佛手含量波動較大,浙江佛手的波動范圍最小,相對穩(wěn)定;建立了HPLC-DAD同時(shí)測定佛手中的6個(gè)化學(xué)成分的方法,該方法簡單,線性關(guān)系良好,并對六個(gè)化學(xué)成分含量進(jìn)行分析,結(jié)果表明圣草次苷,橙皮苷,異莨菪亭,濱蒿內(nèi)酯在四川佛手中含量最高,但是四川佛手中的化學(xué)成分的含量差異較大,可能與其本地環(huán)境等因素有關(guān)。廣東佛手的整體化學(xué)成分含量均一,波動較小。浙江佛手的野漆樹苷的含量最大,而甲氧基香豆素在四個(gè)產(chǎn)地的佛手中的含量無顯著性差異。綜合以上考慮,佛手的含量均接近或大于平均值,且含量分布穩(wěn)定,表明廣東佛手的質(zhì)量較佳。4.本章將近紅外光譜通過光預(yù)處理及波段選擇之后,結(jié)合佛手中的水分、浸出物、總黃酮、多糖含量建立快速含量測定模型。所建模型實(shí)現(xiàn)預(yù)測值與真實(shí)值有較小的偏差,并且能夠?qū)崿F(xiàn)快速無損測定,對佛手質(zhì)量的快速評價(jià)具有現(xiàn)實(shí)意義。本課題較為系統(tǒng)的研究了佛手的物質(zhì)基礎(chǔ),對佛手進(jìn)行佛手全面定性分析,篩選得到了不同產(chǎn)地佛手的特征成分,并對其化學(xué)成分進(jìn)行定量分析并建立近紅外含量測定模型為佛手質(zhì)量評價(jià)及其應(yīng)用提供依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284.1
【圖文】：

圖 2-2 佛手 HPLC 對照指紋圖譜及共有峰表 2-3 25 佛手相似度評價(jià)結(jié)果編號 產(chǎn)品名稱 相似度 序號 產(chǎn)品名稱 相似度S1 GD01 0.963 S14 GX03 0.938S2 GD02 0.968 S15 GX04 0.970S3 GD03 0.942 S16 GX05 0.959S4 GD04 0.846 S17 GX06 0.959S5 GD05 0.959 S18 SC01 0.924S6 GD06 0.878 S19 SC02 0.934S7 GD07 0.920 S20 SC03 0.926S8 GD08 0.968 S21 SC04 0.811S9 GD09 0.966 S22 SC05 0.945S10 GD10 0.978 S23 ZJ01 0.739S11 GD11 0.957 S24 ZJ02 0.822S12 GX01 0.861 S25 ZJ03 0.857S13 GX02 0.917

圖 2-3 25 批佛手聚類分析結(jié)果2.6.2 主成分分析（principal components analysis，PCA）將 25 批佛手樣品所得峰面積導(dǎo)入 SIMCA-P+13.0（Demo），采用 PCA 方行分析，25 批樣品的得分圖見圖 2-4。表明樣品間的聚類情況，25 批樣品可 4 組，其中浙江與廣東、廣西、四川偏離較遠(yuǎn)，四川與廣東、廣西有略微差異西、廣東聚類程度較高，GD05 和 GD08 為廣東產(chǎn)地的離群點(diǎn)，此結(jié)果與 CA一致。

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本文編號：2725530