【摘要】：目的:中藥在抗肝損傷動物模型的作用已得到廣泛學者的認可,但單一藥物起效慢,真正在臨床上得到充分應用的很少。目前國內外對中藥抗肝損傷的研究,特別是對多種藥物混合后的相互作用與作用機理的研究尚缺乏,直接局限了中藥在臨床疾病治療的應用。本研究意在探究姜黃素、生態(tài)動力素(多種微量元素)抗急、慢性肝損傷的作用,且兩者聯(lián)合用藥后有無協(xié)同抗肝損傷的作用,并進一步探討其抗肝纖維化的機制。方法:第一部分:研究姜黃素和生態(tài)動力素的抗急性肝損傷作用提前1周給予BALB/c小鼠姜黃素、3個不同劑量的生態(tài)動力素混懸液灌胃干預,末次灌胃給藥后給予腹腔注射0.2%CC14油劑建立急性肝損傷模型。分別檢測各組小鼠的血清谷丙轉氨酶(ALT)和谷草轉氨酶(AST)水平;進行小鼠肝組織HE染色,初步評價姜黃素和生態(tài)動力素的抗急性肝損傷作用。第二部分:探討姜黃素聯(lián)合生態(tài)動力素通過調節(jié)Nrf2氧化應激通路抗肝纖維化的作用及機制BALB/c小鼠被反復腹腔注射20%CC14油劑,每周2次,連續(xù)6周。建立肝纖維化模型的同時給予姜黃素、生態(tài)動力素及聯(lián)合藥物的混懸液灌胃給藥。檢測各組小鼠血清ALT、AST和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(G SH-PX)、丙二醛(MDA)水平;行小鼠肝組織HE染色、天狼猩紅染色,評價姜黃素、生態(tài)動力素及聯(lián)合給藥的抗肝纖維化效果。Real Time PCR檢測小鼠肝組織內Nrf2、GSH-PX的mRNA表達,探討姜黃素聯(lián)合生態(tài)動力素通過調節(jié)Nrf2氧化應激通路抗肝纖維化的機制。結果:第一部分:研究姜黃素和生態(tài)動力素的抗急性肝損傷作用0.2%CC14油劑單次腹腔注射可造成小鼠明顯的急性肝損傷模型,表現(xiàn)為CC14注射24h后小鼠血清ALT、AST水平較正常組明顯增高(P0.01);肝組織經(jīng)HE染色鏡下觀察示小鼠肝組織內細胞呈現(xiàn)大量壞死的狀態(tài)。姜黃素、生態(tài)動力素干預治療后較模型組顯著降低小鼠血清ALT、AST水平,組織學上減輕小鼠急性肝細胞壞死的程度。第二部分:探討姜黃素聯(lián)合生態(tài)動力素通過調節(jié)Nrf2氧化應激通路抗肝纖維化的作用及機制20%CC14油劑持續(xù)的注射可有效的誘導小鼠肝纖維化模型的形成,表現(xiàn)為較正常組小鼠分離血清中ALT、AST水平模型組明顯增高;肝組織HE染色呈現(xiàn)出肝細胞有大量片狀的壞死,細胞脂肪樣病變,小葉結構紊亂,并且伴隨炎癥細胞的浸潤,脈管區(qū)纖維組織增生并蔓延,肝實質內纖維組織增生顯著;姜黃素、生態(tài)動力素及聯(lián)合給藥能顯著減低(P0.01)小鼠血清ALT、AST水平,組織學上明顯減輕小鼠肝細胞損傷和炎癥細胞浸潤。天狼猩紅染色示小鼠肝纖維化程度較模型組同步明顯減輕。姜黃素、生態(tài)動力素及聯(lián)合給藥組小鼠血清SOD、GSH-PX水平較模型組明顯增高(P0.01),MDA水平較模型組減低。RealTime PCR檢測結果示姜黃素、生態(tài)動力素及聯(lián)合給藥組小鼠肝組織內Nrf2、GSH-PX mRNA表達水平較模型組明顯升高(P0.05)。但聯(lián)合給藥組與姜黃素組比較小鼠血清學檢測結果無明顯差異,肝纖維化程度差異不明顯。結論:1.姜黃素和生態(tài)動力素均有抗急性肝損傷的作用。2.姜黃素和生態(tài)動力素均有抗肝纖維化的作用。3.姜黃素聯(lián)合生態(tài)動力素抗肝纖維化的作用機制可能與Nrf2介導的氧化應激通路有關。4.聯(lián)合用藥未能明顯增強姜黃素的抗肝纖維化作用。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

２．１邋ＥＬＩＳＡ試劑盒檢測血清ＡＬＴ、ＡＳＴ的含量逡逑ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔注射ＣＣ１４邋２４ｈ后，ＣＣ１４模型組小鼠血清ＡＬＴ（６１５．５３５６．８５Ｕ／Ｌ）及邋ＡＳＴ（２７８．７４±９．７２Ｕ／Ｌ）水平較正常對照組邋ＡＬＴ（１７．９４±５．１８邋Ｕ、ＡＳＴ（１６．８４±０．５２Ｕ／Ｌ）明顯升高，有顯著差異（Ｐ＜０．０１）。說明ＣＣ１４單次可導致小鼠急性肝細胞的損傷。姜黃素組小鼠ＡＬＴ邋（３８８．０８邋±邋１２．４０Ｕ／ＬＡＳＴ（１５０．０８±３５．３５Ｕ／Ｌ）水平較模組明顯降低，有統(tǒng)計學意義（／＞＜0．00。低生態(tài)動力素小鼠ＡＬＴ（５２８．３５±４０．６７Ｕ／Ｌ）水平略低于ＣＣ１４模型組，但無明計學差異（Ｐ＞0．0５）邋，邋ＡＳＴ（１６６．９０±６．９６Ｕ／Ｌ）水平較模型組明顯降低，有差異（Ｐ＜０．０１）。中劑量生態(tài)動力素組小鼠ＡＬＴ（４１９．１６±邋４３．７４Ｕ／ＬＡＳＴ（１６８．０５±７．００Ｕ／Ｌ）邋ｚＫ平也較模型組明顯降低，有統(tǒng)計學差異（尸＜0．0１）劑量生態(tài)動力素組小鼠邋ＡＬＴ（４１８．５６±３９．１８Ｕ／Ｌ）與邋ＡＳＴ（１７５．２５±１２．３３Ｕ／Ｌ平較模型組明顯降低，有統(tǒng)計學差異（Ｐ＜０．０１）。逡逑Ａ邐＊＊邐Ｂ逡逑￣￣

圖２生態(tài)動力素對ＣＣ１４誘導的實驗性急性肝損傷小鼠血清ＡＬＴ（Ｃ）和ＡＳＴ（Ｄ）水響，＊＊尸＜０．０１。ＣＣ１４＋Ｌ：低劑量生態(tài)動力素；ＣＣ１４＋Ｍ：中劑量生態(tài)動力素；ＣＣ１４＋Ｈ量生態(tài)動力素逡逑２．２姜黃素和生態(tài)動力素對ＣＣ１４誘導的急性肝損傷小鼠肝態(tài)的影響逡逑ＣＣ１４腹腔注射２４ｈ后，取小鼠肝組織用４％多聚甲醛溶液固定，ＨＥ染色。ＨＥ染色鏡下觀察（Ｘ邋１００）示正常對照組小鼠（圖３－Ａ）肝小葉，肝細胞無腫脹壞死，肝細胞索排列整齊，肝細胞核大而圓。匯管區(qū)結無炎性細施浸潤。而ＣＣ１４注射后小鼠（圖３－Ｂ）肝組織局部區(qū)域出現(xiàn)大細胞變性壞死，大量炎性細胞的浸潤。姜黃素組小鼠肝組織ＨＥ染色可亦有小片狀壞死，可見少許炎性細胞，但程度均明顯輕于模型組（圖３－Ｃ）

【參考文獻】

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1 Wei Tang;Yong-Fang Jiang;Murugavel Ponnusamy;Mamadou Diallo;;Role of Nrf2 in chronic liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2014年36期

2 Halina Cichoz-Lach;Agata Michalak;;Oxidative stress as a crucial factor in liver diseases[J];World Journal of Gastroenterology;2014年25期

3 徐彭;談偉鋒;劉波;謝珍;曹怡;周年;;四氯化碳誘導的小鼠肝損傷模型比較[J];江西中醫(yī)藥大學學報;2014年03期

4 Daniela Gordillo-Bastidas;Edén Oceguera-Contreras;Adriana Salazar-Montes;Jaime González-Cuevas;Luis Daniel Hernández-Ortega;Juan Armendáriz-Borunda;;Nrf2 and Snail-1 in the prevention of experimental liver fibrosis by caffeine[J];World Journal of Gastroenterology;2013年47期

5 Gang Li;Jun-Bao Chen;Chao Wang;Zhi Xu;Hao Nie;Xiao-Yan Qin;Xiao-Mei Chen;Quan Gong;;Curcumin protects against acetaminophen-induced apoptosis in hepatic injury[J];World Journal of Gastroenterology;2013年42期

6 李航;段惠軍;;Nrf2/ARE信號通路及其調控的抗氧化蛋白[J];中國藥理學通報;2011年03期

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本文編號：2716948