【摘要】：研究目的:本研究通過(guò)觀察腰腿痛膠囊對(duì)腰椎間盤突出癥模型大鼠下肢機(jī)械刺激痛閾、背根神經(jīng)節(jié)中腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β及白細(xì)胞介素-6的表達(dá)水平及其規(guī)律的影響,來(lái)探討腰腿痛膠囊治療腰椎間盤突出癥的作用靶點(diǎn),為臨床治療腰椎間盤突出癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法:將60只SPF級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白組(K)、模型組(M)、假手術(shù)組(J)、腰腿痛膠囊高劑量組(G)、中劑量組(Z)、低劑量組(D),每組10只。參照前期研究制備自體髓核移植硬膜外腰椎間盤突出癥大鼠模型,假手術(shù)組僅暴露出背根神經(jīng)節(jié);造模后藥物組每日給予腰腿痛膠囊與純凈水的懸濁液,根據(jù)人體與大鼠體表面積換算,劑量分別如下:G組1.728g/kg/只/天、Z組0.864g/kg/只/天、D組0.432g/kg/只/天,模型組與假手術(shù)組分別給予純凈水2ml/只/天,空白組不做干預(yù)。指標(biāo)檢測(cè)及記錄:(1)分別在造模前1天、造模后3、7、14天觀察各組大鼠的生存質(zhì)量;(2)分別測(cè)各組大鼠造模前1天、造模后3、7、14天右后肢機(jī)械刺激縮爪潛伏期,計(jì)算大鼠機(jī)械刺激痛閥的變化;(3)給藥14天后處死,運(yùn)用ELISA方法檢測(cè)余下大鼠背根神經(jīng)節(jié)、血清中腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β及白細(xì)胞介素-6的含量;(4)各組大鼠隨機(jī)抽取兩只取背根神經(jīng)節(jié)制作石蠟切片,行蘇木精-伊紅(HE)染色后光鏡觀察其神經(jīng)元細(xì)胞組織形態(tài)學(xué)變化。研究結(jié)果:1.生存質(zhì)量觀察:造模前1天各組大鼠精神狀態(tài)尚可,行動(dòng)自如,飲食可,大小便正常;造模后1天,除K組外,各組大鼠精神差,活動(dòng)減緩,右后肢出現(xiàn)跛行甚至拖拽現(xiàn)象,無(wú)大小便失禁,但J組僅為行動(dòng)減緩,無(wú)右后肢跛行;造模后3-7天,除K、J組,各組大鼠精神略好,易激怒,右后肢跛行及拖拽,飲食尚可,Z、G組大鼠出現(xiàn)不同程度的腹瀉;造模后8-14天,除G組外,各組大鼠精神尚可,G組大鼠精神一般,反應(yīng)遲緩,中藥干預(yù)組的下肢活動(dòng)較前好轉(zhuǎn),不過(guò)Z、G組仍見(jiàn)不同程度腹瀉,M組狀態(tài)基本同前。2.右后肢機(jī)械刺激痛閾測(cè)定:造模前1天各組大鼠右后肢機(jī)械刺激痛閾組間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且K組大鼠右后肢機(jī)械痛閾各觀察時(shí)間點(diǎn)兩兩對(duì)比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),可作為參考。從干預(yù)時(shí)間點(diǎn)比較,除K組,其余各組在造模后機(jī)械痛閾皆降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);造模后14天,與造模后3天比較,D、Z、G組大鼠痛閾均有提高,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),說(shuō)明治療有效,具有提升痛閾的作用。從干預(yù)分組比較,M組與K組在造模后各時(shí)間點(diǎn)比較痛閾均下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);造模后3天,M、D、Z、G組兩兩比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);造模后3天-14天,與M組比較,D、Z、G組大鼠機(jī)械刺激痛閾未再持續(xù)下降,并在造模后14天痛閾較造模后7天時(shí)有明顯提高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中G組痛閾提高最明顯。3.造模14天后,檢測(cè)各組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中腫瘤壞死因子-α、白介素-1β、白介素-6含量進(jìn)行比較,M組較K組明顯上升,有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);G組、Z組、D組較M組降低,有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);D、Z、G三組依次降低;J組較K組無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.造模14天后,檢測(cè)各組大鼠血清中腫瘤壞死因子-α、白介素-1β、白介素-6含量進(jìn)行比較,M組較K組明顯上升,有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);G組、Z組、D組較M組降低,有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);D、Z、G三組依次降低;J組較K組無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.大鼠背根神經(jīng)節(jié)HE染色顯微鏡下形態(tài)學(xué)觀察:空白組大鼠細(xì)胞核位于細(xì)胞中央,密度均勻,核仁較為清晰,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在密度均勻排列的顆粒狀物(尼氏小體);模型組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)元細(xì)胞明顯腫脹,部分細(xì)胞凋亡,細(xì)胞核呈不規(guī)則改變,細(xì)胞核仁不清晰,細(xì)胞漿呈空泡樣變化,胞漿中尼氏小體排列不均勻等改變。腰腿痛膠囊高、中、低三組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)元細(xì)胞可見(jiàn)少量核偏移,細(xì)胞核邊緣較模型組邊緣清晰,密度較均勻,核仁較為清晰,胞漿內(nèi)尼氏小體分布較為均勻,少數(shù)神經(jīng)元細(xì)胞胞漿中呈空泡樣變化。假手術(shù)組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)元細(xì)胞未見(jiàn)細(xì)胞核、核仁形態(tài)及密度改變,細(xì)胞內(nèi)尼氏小體密集,未見(jiàn)胞漿中空泡樣變化,未見(jiàn)細(xì)胞腫脹。結(jié)論:腰腿痛膠囊高、中、低三組劑量均能提升大鼠右后肢機(jī)械刺激痛閾,可能與降低背根神經(jīng)節(jié)/血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量相關(guān),降低背根神經(jīng)節(jié)/血清中炎癥因子含量可能是腰腿痛膠囊治療腰椎間盤突出癥疼痛效應(yīng)的機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

背根神經(jīng)節(jié)HE染色圖像觀察×400（K-空白組；M-模型組；D-中藥低劑量組；Z-中藥中劑量組；G-中藥高劑量組；J-假手術(shù)組）

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2716335