發(fā)布時(shí)間：2020-06-14 23:01

【摘要】：目的:觀察NADPH和NOX抑制劑Apocynin聯(lián)用對(duì)缺血/再灌注誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥和神經(jīng)元損傷的抑制作用。方法:采用小鼠短暫性大腦中動(dòng)脈阻塞再灌注(transient middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型觀察NADPH、Apocynin單獨(dú)用藥及NADPH聯(lián)合Apocynin用藥對(duì)小鼠腦梗死體積、腦水腫含量及急性期和長(zhǎng)期行為學(xué)癥狀的影響,并進(jìn)行病理組織學(xué)檢測(cè)。運(yùn)用DHE探針標(biāo)記檢測(cè)缺血大腦皮層ROS的變化及相關(guān)試劑盒檢測(cè)缺血大腦皮層的rGSH和NADPH含量。運(yùn)用免疫印跡法檢測(cè)小鼠缺血大腦皮層NOX2、NOX4、NF-?B信號(hào)通路相關(guān)蛋白和炎癥小體信號(hào)通路相關(guān)蛋白的含量變化。應(yīng)用免疫熒光法分析NF-?B的核轉(zhuǎn)位及NLRP3炎癥復(fù)合物、炎癥因子細(xì)胞分布和表達(dá)情況。結(jié)果:小鼠腦缺血再灌注后,NOX2和NOX4的蛋白水平明顯升高,在16h達(dá)到高峰。DHE染色法檢測(cè)ROS水平結(jié)果顯示:NADPH、Apocynin、NADPH聯(lián)合Apocynin均可抑制小鼠腦缺血再灌后ROS水平的升高,且NADPH聯(lián)合Apocynin組抑制效果最為明顯。試劑盒檢測(cè)NADPH和rGSH水平變化結(jié)果顯示:NADPH、Apocynin、NADPH聯(lián)合Apocynin均可抑制小鼠腦缺血再灌后NADPH和rGSH水平的降低,且NADPH聯(lián)合Apocynin組抑制作用最顯著。Western blot結(jié)果顯示:小鼠腦缺血再灌注16 h后大腦皮層缺血區(qū)I?B?、NF-?B p65及p-NF-?B p65含量顯著升高,同樣i NOS和COX2的含量也顯著上升,NADPH、Apocynin、NADPH聯(lián)合Apocynin均可顯著降低p-IKK?、p-I?B?和p-NF-?B p65的含量,抑制了NF-?B p65、iNOS、COX2的表達(dá),增加了總I?B?的蛋白水平,且NADPH聯(lián)合Apocynin組效果最為顯著。免疫熒光結(jié)果顯示:假手術(shù)組小鼠大腦皮層NF-?B p65蛋白主要表達(dá)在神經(jīng)元胞漿中,缺血再灌后,NF-?B p65從胞漿轉(zhuǎn)移至胞核,大量表達(dá)在細(xì)胞核中,而NADPH、Apocynin、NADPH聯(lián)合Apocynin均可明顯抑制NF-?B的核轉(zhuǎn)位,兩藥合用效果更好。Western blot和免疫熒光結(jié)果共同顯示:假手術(shù)組小鼠大腦皮層NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1?和IL-18蛋白表達(dá)量很低,缺血再灌注16 h后NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1?和IL-18含量在神經(jīng)元細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞均顯著升高,給予NADPH或Apocynin后可明顯抑制缺血皮層NLRP3炎癥復(fù)合物通路的激活及炎癥因子的產(chǎn)生,NADPH聯(lián)合Apocynin使用效果優(yōu)于單獨(dú)使用。此外,NADPH、Apocynin單獨(dú)用藥及NADPH聯(lián)合Apocynin用藥均可減少小鼠腦梗死體積、降低腦水腫含量以及改善腦缺血再灌小鼠的急性期和長(zhǎng)期行為學(xué)障礙。病理組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示:NADPH、Apocynin、NADPH聯(lián)合Apocynin均可改善缺血再灌后神經(jīng)元的形態(tài),減輕核固縮和核溶解程度,降低神經(jīng)元損傷程度,其中NADPH聯(lián)合Apocynin可產(chǎn)生更顯著的效果。結(jié)論:除了抗氧化作用外,NADPH還具有抗炎作用,并且NADPH聯(lián)合NOX抑制劑Apocynin使用可在缺血性腦中風(fēng)中發(fā)揮更好的神經(jīng)保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5;R-332

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐寧;謝澤敏;唐小慧;潘薇;張廣芬;周脈濤;;NADPH氧化酶介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞活化在神經(jīng)病理性疼痛和抑郁共病中的作用[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2017年06期

2 齊倩倩;呂佩源;;NADPH氧化酶在神經(jīng)退行性疾病中的作用[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2015年04期

3 羅秀菊;;NADPH oxidase inhibitor apocynin attenuates ischemia/reperfusion induced myocardial injury in rats[J];China Medical Abstracts(Internal Medicine);2013年01期

4 ;Perioral and Facial Noxious Stimulation-induced C-fos-like Protein Expression and Its Relationship with NADPH-diaphorase Reactivity in Trigeminal Sensory Complex in the Rat[J];針刺研究;1994年Z1期

5 ;NADPH-diaphorase Activity in the Nuclei of Trigeminal Nerve and Its Change after Electroacupuncture[J];針刺研究;1994年Z1期

6 賴高惠;;利用陽(yáng)光制造氨基酸[J];化工新型材料;1987年09期

7 姜方旭;韓英士;曾慶善;;大鼠鼻咽上皮組織酶學(xué)和發(fā)育酶學(xué)研究 (Ⅰ) 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶產(chǎn)生的NADPH第Ⅰ和第Ⅱ途徑[J];解剖學(xué)雜志;1987年03期

8 劉屏;乙酰肉堿對(duì)NADPH誘導(dǎo)的心臟微粒體類脂過(guò)氧化的保護(hù)作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);1988年03期

9 李國(guó)華;魏欣冰;張岫美;易凡;;NADPH氧化酶介導(dǎo)的氧化還原信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在高同型半胱氨酸血癥中的作用及分子機(jī)制[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2009年05期

10 朱梅仙;胡繼芬;;NADPH氧化酶與子癇前期關(guān)系的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè));2007年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 董靜梅;周萍;;NADPH氧化酶合并谷氨酰胺干預(yù)對(duì)過(guò)度訓(xùn)練引起的中性粒細(xì)胞功能的調(diào)控及其機(jī)制研究[A];2013年全國(guó)競(jìng)技體育科學(xué)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集[C];2013年

2 ;Activation of NADPH Oxidase:Phosphorylation of Protein and Lipid Complex[A];2008心血管藥理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

3 Stephen T.O'Rourke;;20-HETE increases NADPH oxidase-derived ROS production and stimulates L-type calcium channel via PKC-dependent mechanism in cardiomyocytes[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第23屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

4 董麗華;孫紹光;李亮;韓梅;;TRAF6-mediated SM22α K21 Ubiquitination Promotes G6PD Activation and NADPH Production, Contributing to GSH Homeostasis and VSMC Survival In Vitro and In Vivo[A];第五屆泛環(huán)渤海生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2015年

5 Longying Zha;Jiading Chen;Yajie Zhang;Xinwei Chu;Suxia Sun;Limei Mao;Wenhong Cao;;Soyasaponin Bb Antagonize Inflammation by Inhibiting TLR4 Recruitment into Lipid Rafts and Association with Adaptor Molecules through Suppression of NADPH Oxidase-Dependent ROS Generation[A];第十二屆全國(guó)營(yíng)養(yǎng)科學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2015年

6 李巖;顧博雅;趙麗;;有氧運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)自發(fā)性高血壓大鼠下丘腦室旁核NADPH氧化酶的表達(dá)與活性[A];2013年中國(guó)生理學(xué)會(huì)運(yùn)動(dòng)生理學(xué)專業(yè)委員會(huì)年會(huì)暨“運(yùn)動(dòng)與健康”學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2013年

7 趙瑛;陳峰;;白藜蘆醇對(duì)高糖下腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞NADPH氧化酶的影響及干預(yù)機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

8 鄭曉峰;;NADPH sensor protein HSCARG down-regulates NO synthesis and is essential for cell viability[A];第二屆全國(guó)“跨學(xué)科蛋白質(zhì)研究”學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2008年

9 Fuqiang Sun;Liyan Hou;Yuning Che;Lin Zhang;Qingshan Wang;;NADPH oxidase contributes to learning and memory deficits in a mouse model of Parkinson's disease[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第七次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第六次中青年學(xué)者科技論壇論文摘要[C];2018年

10 孟濤;于金貴;;異丙酚抑制脂多糖誘導(dǎo)的,NADPH氧化酶調(diào)節(jié)的巨噬細(xì)胞腫瘤壞死因子a和白介素-6的分泌[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合麻醉學(xué)會(huì)[CSIA]年會(huì)暨第二屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合麻醉學(xué)術(shù)研討會(huì)、江蘇省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)麻醉專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2015年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 宏源證券 柴沁虎;NOx或成為大氣治理重要抓手[N];中國(guó)化工報(bào);2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 秦媛媛;NADPH和NOX抑制劑Apocynin（夾竹桃麻素）聯(lián)用在小鼠腦卒中模型中抗炎和神經(jīng)保護(hù)的作用[D];蘇州大學(xué);2017年

2 韓建普;擬南芥蛋白激酶調(diào)控NADPH氧化酶RBOHF的機(jī)理研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

3 于中連;煙草NADPH氧化酶在Na～+、Cu～（2+）脅迫中的活性變化及其作用[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 郝福順;植物質(zhì)膜NADPH氧化酶參與ABA和鎳離子誘導(dǎo)的活性氧積累[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

5 張彪;NADPH氧化酶4是一個(gè)藥物干預(yù)腫瘤轉(zhuǎn)移的潛在靶點(diǎn)[D];浙江大學(xué);2013年

6 謝洪濤;擬南芥NADPH氧化酶介導(dǎo)動(dòng)態(tài)活性氧的水平從而調(diào)控絨氈層程序性細(xì)胞死亡及花粉發(fā)育的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 羅冬嬌;Ⅲ型PI3K調(diào)控NADPH氧化酶活性促進(jìn)血小板活化和血栓形成[D];浙江大學(xué);2016年

8 阿布力克木·阿布力孜(Ablikim Abliz);NADPH氧化酶抑制劑apocynin對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠腸粘膜屏障損傷的作用及其機(jī)制探討[D];武漢大學(xué);2016年

9 唐湘祁;NADPH氧化酶調(diào)節(jié)MMP-9和E選擇素表達(dá)與缺血再灌注腦損傷的病理機(jī)制[D];中南大學(xué);2011年

10 解華;基于NADPH氧化酶活性調(diào)控的益心解毒方治療心力衰竭的分子機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張美玲;表達(dá)NADPH和底物供應(yīng)的關(guān)鍵基因?qū)?-羥基異亮氨酸合成的影響[D];江南大學(xué);2018年

2 顧怡;還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸抑制血小板功能[D];蘇州大學(xué);2018年

3 周熒;NADPH抑制MPTP誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥和神經(jīng)毒性[D];蘇州大學(xué);2018年

4 齊夢(mèng)蝶;穿心蓮中4種NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶的功能表征[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

5 董仕楨;NADPH氧化酶在5-HT加重的小鼠結(jié)腸炎模型中的表達(dá)及作用[D];河南科技大學(xué);2017年

6 翁曉芬;NADPH對(duì)腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];蘇州大學(xué);2017年

7 吳曉娟;內(nèi)皮NADPH氧化酶4調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制[D];重慶大學(xué);2017年

8 高雨梅;外周血中性粒細(xì)胞NADPH氧化酶與糖尿病腎病相關(guān)性研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

9 余理;尿酸上調(diào)腎小管上皮細(xì)胞NADPH蛋白水平對(duì)腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響[D];中南大學(xué);2011年

10 黃暨生;黃芩苷對(duì)NADPH氧化酶介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2012年

本文編號(hào)：2713488