【摘要】：目的:根據(jù)中醫(yī)溫病學(xué)理論,基于古代醫(yī)藥本草典籍文獻信息,結(jié)合現(xiàn)代藥理研究,研制一種安全高效、綠色環(huán)保、經(jīng)濟方便的空氣消毒劑,以獲取較好的社會效益和經(jīng)濟效益。以中藥空氣氣溶膠殺菌活性為考察指標,進行配伍關(guān)系與制備工藝優(yōu)化,研制出一種中藥空氣氣溶膠消毒劑。了解其對室內(nèi)空氣的消毒效果,建立質(zhì)量控制標準,檢測其急性毒性作用,確保其臨床用藥安全性,探討其消毒殺菌的作用機制。方法:1.氣溶膠消毒劑殺菌效果檢測方法的選擇:以抑菌能力為指標,比較紙片抑菌試驗與空氣消毒現(xiàn)場試驗方法,選擇合適的檢測方法;2.消毒劑提取工藝研究:以紙片抑菌圈直徑為考察指標,以藥液比、乙醇濃度、提取時間作為考察因素,通過L_9(34)正交試驗優(yōu)化提取工藝;3.消毒劑藥物配伍關(guān)系研究:以紙片抑菌圈直徑為考察指標,以四味藥材作為考察因素,藥材的高、中、低不同劑量作為因素水平,通過L_9(34)正交試驗優(yōu)化配伍比例;4.抑菌作用研究:通過紙片抑菌實驗,考察中藥空氣氣溶膠消毒劑對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌的抑制作用;采用六級篩孔撞擊采樣法對中藥空氣氣溶膠消毒劑消毒前后空氣中的菌落數(shù)進行采集培養(yǎng),計算殺菌率,判斷中藥空氣氣溶膠消毒劑對空氣中自然菌的消毒效果;比較中藥空氣氣溶膠消毒劑與原熏蒸消毒劑消毒效果有無差異;5.質(zhì)量標準研究:對消毒劑的性狀、檢查項進行了規(guī)定;采用TLC法與HPLC法對該消毒劑的沒食子酸、熊果酸、槲皮素等成分進行定性鑒別,采用HPLC法對主要有效成分沒食子酸進行含量測定研究;對該消毒劑的穩(wěn)定性進行了研究;根據(jù)所得結(jié)果制定質(zhì)量控制標準,擬定質(zhì)量標準草案;6.急性毒性試驗研究:采用小鼠急性經(jīng)口毒性實驗、急性吸入毒性實驗、家兔急性眼刺激實驗與豚鼠皮膚刺激實驗,判斷中藥空氣氣溶膠消毒劑急性毒性;7.殺菌機制研究:研究消毒劑對白色葡萄球菌生長曲線、電導(dǎo)率、超微結(jié)構(gòu)的影響,探討中藥空氣氣溶膠消毒劑可能的殺菌機制。結(jié)果:1.紙片抑菌試驗與空氣消毒現(xiàn)場試驗的結(jié)果顯示,紙片抑菌試驗與空氣消毒現(xiàn)場試驗的結(jié)果趨勢一致,紙片抑菌作用越好其空氣消毒現(xiàn)場試驗效果也越強,提示紙片抑菌試驗可以作為考察消毒劑消毒效果的檢測方法;2.氣溶膠消毒劑最佳提取工藝是:藥材用15倍70%乙醇浸泡2小時,提取3小時,濾過,再提取1小時,合并兩次提取液,減壓濃縮至密度約為1.00(55℃測);3.氣溶膠消毒劑最佳配伍關(guān)系為:五倍子:山楂:C藥:D白木香葉=3:2:3:1;4.按最佳提取工藝與配伍提取的消毒劑,對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌均具有一定抑制作用,抑菌強度依次為:革蘭氏陽性菌革蘭氏陰性菌真菌;對密閉空間消毒效果尤佳,消毒前后空氣中的菌落數(shù)有差異(P0.05),消亡率大于90%,符合2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》空氣消毒劑的現(xiàn)場消毒試驗消亡率大于90%的標準;中藥空氣氣溶膠消毒劑與原熏蒸消毒劑消毒效果比較表明:兩者對春、夏、秋、冬4個季節(jié)的密閉空間中自然菌的消亡率均大于90%,但對于污染較輕的冬季空間,原大復(fù)方熏蒸消毒劑的消毒效果優(yōu)于氣溶膠消毒劑;5.質(zhì)量標準研究規(guī)定了消毒劑的性狀、檢查項,檢查項限定了10 mL消毒劑總固體量不少于2.40 g,PH值范圍為3.0~4.0;增設(shè)了在同一薄層色譜條件下對五倍子、C藥材的鑒別及消毒劑中主要有效成分沒食子酸、熊果酸、槲皮素的鑒定,同時增加了對主要有效成分沒食子酸的HPLC含量測定,規(guī)定了10 mL消毒劑中沒食子酸含量不低于24.57 mg,該方法穩(wěn)定、可靠、重現(xiàn)性好;穩(wěn)定性檢測試驗表明消毒劑在一年內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定,殺菌有效成分沒食子酸含量下降率10%,現(xiàn)場消毒試驗消亡率大于90%,符合2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》空氣消毒劑的現(xiàn)場消毒試驗消亡率大于90%的標準;6.小鼠急性經(jīng)口毒性實驗與急性吸入毒性實驗結(jié)果表明中藥空氣氣溶膠消毒劑屬實際無毒,豚鼠皮膚刺激實驗結(jié)果表明中藥空氣氣溶膠消毒劑對皮膚無刺激,家兔急性眼刺激實驗結(jié)果表明中藥空氣氣溶膠消毒劑對家兔眼有輕微刺激;7.中藥空氣氣溶膠消毒劑對白色葡萄球菌的生長曲線實驗表明,其對白色葡萄球菌有抑制作用;能增加白色葡萄球菌的電導(dǎo)率,說明其可能改變了細菌細胞膜的通透性,使菌體細胞內(nèi)的離子滲出;透射電鏡下,消毒劑作用24小時的白色葡萄球菌出現(xiàn)質(zhì)壁分離、細胞質(zhì)濃縮、分布不均甚至空腔的現(xiàn)象,表明消毒劑對白色葡萄球菌細胞壁與細胞膜結(jié)構(gòu)具有較強的破壞作用。該消毒劑的抑菌機制可能與改變了細菌細胞膜的通透性,破壞細菌細胞壁結(jié)構(gòu)有關(guān)。結(jié)論:本研究制備了一種中藥空氣氣溶膠消毒劑,消毒效果確切,無毒性,對眼有輕微刺激,高效經(jīng)濟,制備工藝合理,質(zhì)量穩(wěn)定可控。
【圖文】：

圖 2-1 兩種消毒劑對同一空間消毒的成本毒劑樣品的空氣現(xiàn)場消毒試驗結(jié)果顯示，兩者與消毒前比較，消毒寓空氣細菌總數(shù)均顯著減少(P＜0.05)，對 4 個季節(jié)的空氣消毒符合 2002 版《消毒技術(shù)規(guī)范》對空氣中自然菌的消亡率均大于 90%兩種消毒劑消毒效果均好；對春、夏、秋 3 季之間的消亡率無顯著與原熏蒸消毒劑冬季的消亡率相比，氣溶膠消毒劑冬季的空氣消毒異(P<0.05)，說明原熏蒸消毒劑對于空氣污染較輕，細菌數(shù)較少空氣溶膠消毒劑，這可能與原熏蒸消毒劑處方藥味多有關(guān)系。兩種消較結(jié)果顯示，氣溶膠消毒劑大大降低了生產(chǎn)成本。消毒前空氣中細菌總數(shù)相比，夏、秋、冬 3 季均有顯著性差異(P<病高發(fā)情況一致，提示春季空氣中的病原菌、病毒等迅速繁殖，極發(fā)生與流行，需要經(jīng)常對空氣進行消毒。夏季與冬季空氣中細菌總數(shù)著性差異(P<0.05)，冬季天氣寒冷且干燥，細菌生長與繁殖緩慢，，消毒。

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文分別取適量沒食子酸對照品、熊果酸對照品、槲皮素對照品加甲醇制成 1 mg/m對照品溶液。3.2.2.2 薄層色譜鑒別按照 2015 版《中國藥典》四部通則 0502 的薄層色譜法試驗，分別吸取上述溶液各 5~10 μL,分別點于同一硅膠 G 薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸（體積比 2 : 1 : 0.5為展開劑，展開，取出，晾干，于紫外燈 254 nm 下觀察結(jié)果,結(jié)果如圖 3-1A；噴以10%硫酸-乙醇 90℃顯色，在日光下檢視結(jié)果，結(jié)果見圖 3-1B 。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R283.6

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本文編號：2705634