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田薊苷促進大鼠腦卒中后血管新生的作用及機制研究

發(fā)布時間:2020-06-09 18:59
【摘要】:目的:本研究旨在通過建立大鼠MCAO(Middle Cerebral Artery Occlusion)模型,探究田薊苷對大鼠腦卒中后缺血區(qū)血液循環(huán)的影響和對血管新生的促進作用及可能機制,為后期進一步研究田薊苷對缺血性腦卒中的保護作用及機制提供實驗依據(jù)。方法:(1)制作MCAO模型。(2)神經(jīng)功能學評分及分組、給藥,得分在6~14分的大鼠為造模成功,將之隨機分為:模型組(生理鹽水灌胃)與田薊苷小(4 mg/kg)、中(8 mg/kg)、大(16 mg/kg)劑量組,假手術組(生理鹽水灌胃)僅進行頸外動脈結(jié)扎。(3)利用TTC(Triphenyl Tetrazolium Chloride)染色對大鼠腦梗死面積進行檢測。(4)利用乳膠灌注的方法對缺血側(cè)皮層維持血流灌注的血管數(shù)目進行檢測。(5)利用免疫熒光(IF,Immuno fluorescence)的方法對田薊苷給藥后梗死灶周邊微血管密度和ki67標記的新生血管數(shù)目等進行檢測。(6)利用免疫印跡(WB,Western Blot)的方法對VEGF、Ang-1、p-Src/Src、p-Erk/Erk等蛋白在腦組織表達進行檢測。結(jié)果:(1)MCAO造模7天后,與模型組相比,田薊苷中劑量和大劑量給藥組大鼠神經(jīng)功能評分有顯著降低(P0.05,P0.01)。(2)TTC染色對腦梗死面積測定結(jié)果顯示,模型組梗死面積為全腦的27.96%,田薊苷中劑量給藥組為11.73%,大劑量給藥組給藥組為6.04%,較模型組梗死面積有明顯降低(P0.01,P0.01)。(3)田薊苷給藥7天后,中劑量組和大劑量組大鼠缺血皮層中能維持血流灌注的血管數(shù)目高于模型組,且保存的血管中微小血管所占比例較模型組有顯著增加。(4)IF結(jié)果顯示田薊苷中劑量組和大劑量組梗死周邊區(qū)血管所占面積比均高于模型組,且ki67標記的血管數(shù)目較模型組有顯著升高(P0.01,P0.01)。(5)WB結(jié)果顯示,對比模型組,田薊苷中劑量組和大劑量組VEGF、Ang-1、p-Src、p-Erk蛋白表達顯著上調(diào)(P0.05)。結(jié)論:田薊苷能有效促進腦卒中后血管新生,其機制可能是通過調(diào)節(jié)VEGF信號通路下游的p-Src、p-Erk等蛋白實現(xiàn)。
【圖文】:

流程圖,流程


田薊苷的制備流程

示意圖,大鼠,示意圖,造模方法


圖 3 大鼠 MCAO 示意圖Fig.3 MCAO schematic of rats造模方法[47]:雄性 SD 大鼠于手術前 12 小時禁食。稱重后選用體重在 260間的大鼠進行麻醉(按 0.35ml/kg 的劑量腹腔注 10%的水合氯醛)。大鼠麻醉仰臥位置于手術操作臺上,,用安爾碘進行術周消毒。于大鼠頸部正中切口約
【學位授予單位】:新疆醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R285.5;R-332

【參考文獻】

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2 祝杏園;注射用丹參多酚酸對急性局灶性腦梗死小鼠血腦屏障的保護作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

3 戴佩e

本文編號:2705105


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