【摘要】：目的:探討柴胡疏肝散對(duì)功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠胃平滑肌細(xì)胞凋亡和NF-κB蛋白表達(dá)的影響,以進(jìn)一步揭示疏肝理氣法促胃動(dòng)力機(jī)制。方法:將48只健康SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、多潘立酮組及柴胡疏肝散低、中、高劑量組。除正常組外,其余五組均通過(guò)改良夾尾激惹刺激法制造FD大鼠模型,于造模同一天分別使用多潘立酮水溶液(0.3g·L-1)和柴胡疏肝散低、中、高劑量水煎劑(0.16g?mL-1,0.32g?mL-1,0.64g?mL-1)進(jìn)行灌胃,在造模4周后,測(cè)定各組大鼠胃排空率,采用HE染色觀(guān)察胃組織病理變化,利用透射電子顯微鏡觀(guān)察大鼠胃平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cell,SMC)線(xiàn)粒體形態(tài),采用原位末端缺口標(biāo)記法(TdT-mediated d UTP Nick-End Labeling,TUNEL)檢測(cè)大鼠胃SMC凋亡情況;免疫組化法檢測(cè)大鼠胃平滑肌細(xì)胞Bcl-2、Bax、NF-KB蛋白的表達(dá)。結(jié)果:各組大鼠胃組織病理學(xué)觀(guān)察未見(jiàn)糜爛、潰瘍、化生等器質(zhì)性病變。透射電鏡觀(guān)察胃組織發(fā)現(xiàn)正常組大鼠胃SMC之間間隙正常,連接緊密,線(xiàn)粒體形態(tài)正常;模型組大鼠胃SMC間隙增寬,連接松弛,線(xiàn)粒體明顯腫脹,亦可見(jiàn)凋亡小體;多潘立酮組和柴胡疏肝散低、中、高劑量組胃SMC間隙正常,連接緊密,線(xiàn)粒體腫脹減輕,凋亡小體減少。與正常組比較,模型組大鼠胃排空率顯著降低(P0.05),細(xì)胞凋亡率顯著增高(P0.05),胃平滑肌細(xì)胞Bcl-2表達(dá)顯著減少(P0.05),Bax、NF-KB表達(dá)顯著升高(P0.05);與模型組比較,柴胡疏肝散低、中、高劑量組和多潘立酮組大鼠胃排空率均顯著升高(均P0.05),胃SMC線(xiàn)粒體損傷顯著改善,細(xì)胞凋亡率和Bax、NF-KB表達(dá)水平均顯著降低(均P0.05),Bcl-2表達(dá)水平則顯著升高(P0.05);與多潘立酮組比較,柴胡疏肝散高劑量組胃排空率顯著升高(P0.05),胃SMC凋亡率和Bax、NF-KB表達(dá)水平均顯著降低(均P0.05),Bcl-2表達(dá)水平則顯著升高(P0.05);柴胡疏肝散低、中、高劑量組間比較,中、高劑量組胃排空率和Bcl-2表達(dá)水平較低劑量組有顯著升高(均P0.05),中、高劑量組胃SMC凋亡率、Bax、NF-KB表達(dá)水平較低劑量組顯著降低(均P0.05)。結(jié)論:1.柴胡疏肝散可以降低FD大鼠胃平滑肌細(xì)胞的凋亡率,從而發(fā)揮促胃動(dòng)力作用,其機(jī)制是通過(guò)上調(diào)Bcl-2的表達(dá)、抑制Bax的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)線(xiàn)粒體途徑的細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮作用。2.FD的發(fā)生、發(fā)展可能與胃平滑肌NF-κB蛋白的表達(dá)密切相關(guān);柴胡疏肝散可以減少NF-κB蛋白的表達(dá),抑制NF-κB凋亡信號(hào)通路異常激活導(dǎo)致的胃平滑肌的損傷,促進(jìn)胃腸動(dòng)力的恢復(fù)。
【圖文】：

圖 1 各組大鼠胃組織學(xué)變化（HE,×100）Fig.1 Group changes in histology of stomach in rats（HE,×100）A: 正常組 B：模型組 C：多潘立酮組 D：柴胡疏肝散低劑量組E：柴胡疏肝散中劑量組 F：柴胡疏肝散高劑量組3.3 各組大鼠胃 SMC 超微結(jié)構(gòu)、線(xiàn)粒體的變化正常組大鼠胃 SMC 表面不平整，肌膜可見(jiàn)小凹，SMC 之間間隙正常，接緊密，胞質(zhì)可見(jiàn)豐富的線(xiàn)粒體，線(xiàn)粒體形態(tài)正常，結(jié)構(gòu)完整（A）。模組大鼠胃 SMC 間隙增寬，，連接松弛，溶酶體增多，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，線(xiàn)粒體顯腫脹，線(xiàn)粒體嵴模糊、斷裂或消失，胞質(zhì)亦可見(jiàn)凋亡小體(B)。多潘立

圖 2 各組大鼠胃 SMC 線(xiàn)粒體超微結(jié)構(gòu)(TEM,×50000)Fig.2 The ultrastructure of mitochondria of rat gastric SMC(TEM,×5000A:正常組 B：模型組 C：多潘立酮組 D：柴胡疏肝散低劑量組 E：柴胡疏肝散中劑量組 F：疏肝散高劑量組3.4 各組大鼠胃 SMC 凋亡率（表 2；圖 3）與正常組比較，模型組大鼠胃 SMC 凋亡率顯著高于正常組（P<0.05與模型組比較。多潘立酮組和柴胡疏肝散低、中、高劑量組胃 SMC 凋亡均有顯著降低（P<0.05）；與柴胡疏肝散低劑量組比較，多潘立酮組和柴疏肝散中、高劑量組大鼠 SMC 凋亡率有顯著降低（均 P<0.05）；柴胡疏肝中劑量組與柴胡疏肝散高劑量組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表 2 各組大鼠胃 SMC 的凋亡率( , x±s)Table 2 Group rates of gastric SMC apoptosis in rats( , x±s)組別 N 細(xì)胞凋亡率
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2702779