【摘要】：楸葉泡桐種子為玄參科泡桐屬植物楸葉泡桐的干燥種子。據(jù)《藥性論》記載:“治五淋,沐發(fā)去頭風(fēng),生發(fā)滋養(yǎng)�！弊鳛槲覈�(guó)傳統(tǒng)中藥,其根、皮、花、葉、果實(shí)均可入藥。長(zhǎng)期以來(lái),泡桐主要用來(lái)治療咳嗽、痰多、咽喉腫痛、支氣管炎、淋病等疾病�，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明泡桐還具有抗腫瘤、抗哮喘等作用。目的對(duì)楸葉泡桐種子的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究,并對(duì)分離得到的單體化合物進(jìn)行膽堿酯酶和黃嘌呤氧化酶抑制活性研究,探討苯乙醇苷類(lèi)與香葉基黃酮類(lèi)化合物黃嘌呤氧化酶抑制活性與結(jié)構(gòu)的關(guān)系。方法應(yīng)用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、ODS柱色譜、制備HPLC色譜、重結(jié)晶等手段,對(duì)楸葉泡桐種子的正丁醇和乙酸乙酯部位進(jìn)行化學(xué)成分的系統(tǒng)研究,根據(jù)理化性質(zhì)并運(yùn)用ESI-MS、UV、HRESIES、H-NMR、C-NMR、IR、HMBC、HMQC等波譜技術(shù)及化學(xué)方法對(duì)所分得的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。應(yīng)用紫外分光光度法對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行膽堿酯酶抑制活性測(cè)定,通過(guò)HPLC法對(duì)分離得到的香葉基黃酮類(lèi)和苯乙醇苷類(lèi)化合物進(jìn)行了黃嘌呤氧化酶抑制活性的研究,測(cè)定IC_(50)值,并測(cè)定了活性較好化合物的酶動(dòng)力學(xué)常數(shù)及酶抑制類(lèi)型。結(jié)果從楸葉泡桐種子中分離純化得到27個(gè)化合物,鑒定其結(jié)構(gòu)分別為:4',5,7-三羥基-3'-甲氧基-6-[3,7-二羥基-3,7-二甲基-2(E)-辛基]黃酮醇(1),3',5,7-三羥基-4'-甲氧基-6-[7-羥基-3,7-二甲基-2(S)-辛烯]二氫黃酮(2),4',5,5',7-四羥基-6-[6-羥基-3,7-二甲基-2(E)-7-辛二烯]-3'-甲氧基二氫黃酮(3),Isopaucatalinone B(4),Prokinawan(5),3,3',4',5,7-五羥基-6-[7-羥基-3,7-二甲基-2(E)-辛烯基]二氫黃酮醇(6),6-geranyl-4',5,7-trihydroxy-3',5'-dimethoxyflavanone(7),3,3',4',5,7-五羥基-6-[6-羥基-3,7-二甲基-2(E),7-辛二烯]二氫黃酮醇(8),Tomentin E(9),Tomentin D(10),(2S)-2-(4-羥基-3-甲氧基苯)-5-羥基-8-(4-羥基-4-甲基戊基)-8-甲基-2,3,7,8-四氫吡喃并[3,2-g]吡喃-4(6H)-酮(11),(2S)-2-(4-羥基苯基)-5-羥基-8-(4-羥基-4-甲基戊基)-8-甲基-2,3,7,8-四氫吡喃并[3,2-g]吡喃-4(6H)-酮(12),6-geranyl-3,4',5,7-tetrahydroxy-3'-methoxyflavanone(13),Guaiacylglycerol-β-ferulic acid ether(14),Erythro-(7S,8R)-guaiacylglycerol-β-coniferyl aldehyde ether(15),Isoacteoside(16),Acteoside(17),Ilicifolioside A和Isoilicifolioside A混合物(18),Plantalloside(19),Orobsnchosid(20),Tomentoside(21),Campneoside I(22),Darendoside B(23),Apigenin(24),Luteolin(25),Cistanoside F(26),Linarin(27)。對(duì)從楸葉泡桐種子分離得到的27個(gè)化合物進(jìn)行了抗膽堿酯酶活性研究,活性篩選結(jié)果表明化合物5、6、8與16具有較高的雙重膽堿酯酶抑制活性,但與陽(yáng)性對(duì)照藥多奈哌齊相比其IC_(50)偏高。其中化合物16的IC_(50)值較小,對(duì)膽堿酯酶具有較好的抑制作用。對(duì)分離得到的8個(gè)苯乙醇苷類(lèi)和12個(gè)香葉基黃酮類(lèi)化合物運(yùn)用HPLC方法進(jìn)行了黃嘌呤氧化酶活性的初步探究,結(jié)果顯示化合物5,16,19,22抑制率較好,從而對(duì)這四個(gè)化合物進(jìn)行進(jìn)一步的探究,包括IC_(50)值以及酶動(dòng)力學(xué)活性的測(cè)定。結(jié)論從楸葉泡桐種子中分離純化得到27個(gè)化合物,包括2個(gè)新化合物:1,2。7個(gè)種首發(fā)化合物分別為:6,8,16,17,18,22,25;8個(gè)屬首發(fā)化合物:5,14,15,19,20,21,23,26。膽堿酯酶活性篩選結(jié)果表明化合物5、6、8、16具有較高的雙重膽堿酯酶抑制活性,但與陽(yáng)性對(duì)照藥多奈哌齊相比其IC_(50)偏高。其中化合物16的IC_(50)值較小,抑制膽堿酯酶的作用較高。HPLC法測(cè)定黃嘌呤氧化酶抑制活性,初步探究結(jié)果表明化合物5,16,19,22抑制率較好,并存在一定的量效關(guān)系。通過(guò)對(duì)反應(yīng)速率的測(cè)定,然后1/V對(duì)1/S作雙倒數(shù)曲線(xiàn),結(jié)果顯示:化合物5,16,19都是混合型抑制。
【圖文】：
反應(yīng)體系的方法，加入黃嘌呤儲(chǔ)備充分振搖啟動(dòng)反，15，20，25 min 后，然后在反應(yīng)液中加入 500 L娃哈哈純凈水定容到刻度，取 20 L 進(jìn)行 HPLC樣品重復(fù)測(cè)定 3 次，求尿酸峰面積的平均值。由平的斜率即為反應(yīng)速率。在不同樣品濃度（2.0，1.5，1.0，，0.5 mM）下測(cè)定酶動(dòng)力學(xué)常數(shù)和酶的抑制類(lèi)及雙倒數(shù)曲線(xiàn)作圖，即可得到 Km和 Vm值。準(zhǔn)曲線(xiàn)的建立5 25 50 100 200 3.7501 2.4966 7.1073 15.5421 28.3940 43.
楸葉泡桐種子的化學(xué)成分及活性篩選根據(jù)黃嘌呤標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程的建立，運(yùn)用外標(biāo)法可以計(jì)算出反應(yīng)液黃嘌呤的濃度以計(jì)算出黃嘌呤氧化酶的抑制率。.2 溫度對(duì)反應(yīng)體系的影響化合物 16 19 22 5溫度 黃嘌呤峰面積25℃ 1.7949 5.0194 0.1459 1.405430℃ 0.8134 2.930 0.1174 0.242135℃ 8.679 8.5708 9.1293 8.034340℃ 0.217 0.5485 0.1031 0.111845℃ 0.1142 0.1736 0.0999 0.0996
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R284;R285
【相似文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 繆禮科;雷開(kāi)壽;;楸葉泡桐調(diào)查報(bào)告[J];陜西林業(yè)科技;1980年03期
2 沈士訓(xùn);楸葉泡桐栽培中幾個(gè)問(wèn)題的探討[J];山東林業(yè)科技;1981年04期
3 薛景;王英愛(ài);賈獻(xiàn)慧;杜成林;唐文照;;楸葉泡桐種子的苯乙醇苷類(lèi)化學(xué)成分研究[J];食品與藥品;2018年05期
4 趙昱峰;;楸葉泡桐地膜覆蓋育苗技術(shù)[J];農(nóng)民致富之友;2014年08期
5 段偉;趙陽(yáng);王保平;馮延芝;喬杰;崔令軍;周海江;;基于光響應(yīng)曲線(xiàn)特征參數(shù)的楸葉泡桐優(yōu)良無(wú)性系選擇[J];西北林學(xué)院學(xué)報(bào);2017年06期
6 王紅玲;孫倩;黃瑞芳;;楸葉泡桐雜種無(wú)性系9503的組織培養(yǎng)技術(shù)研究[J];江蘇林業(yè)科技;2019年02期
7 常德龍;黃文豪;張?jiān)茙X;胡偉華;關(guān)倩;韓黎雪;;4種泡桐木材材色的差異性[J];東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年08期
8 ;楸葉泡桐嫁接繁殖試驗(yàn)[J];山東林業(yè)科技;1981年01期
9 李偉;;揪葉泡桐的葉和葉柄再生小植株[J];國(guó)外林業(yè);1993年02期
10 翟曉巧,王國(guó)周,畢會(huì)濤,李培玉;泡桐叢枝病發(fā)生與葉片酚和氨基酸變化關(guān)系研究[J];河南科學(xué);2000年03期
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條
1 薛景;楸葉泡桐種子的化學(xué)成分及活性篩選[D];濟(jì)南大學(xué);2019年
2 王英愛(ài);楸葉泡桐果皮化學(xué)成分及抗氧化、抗炎活性研究[D];濟(jì)南大學(xué);2018年
3 王楊;楸葉泡桐和臺(tái)灣泡桐四倍體誘導(dǎo)及其體外植株再生體系建立[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年
本文編號(hào)：
2702768
