【摘要】：目的:建立兔腹主動脈粥樣硬化DES置入模型,研究化痰活血解毒方對兔腹主動脈DES置入后新生動脈粥樣硬化斑塊的影響。方法:1、建立兔腹主動脈粥樣硬化DES置入模型及實驗分組:選取雄性日本大耳白兔(清潔級)40只預(yù)適應(yīng)飼養(yǎng)1W后進行腹主動脈球囊損傷,高脂飼料(基礎(chǔ)飼料中加入膽固醇5%,豬油5%,蛋黃粉3%)喂養(yǎng)8W,于腹主動脈最狹窄處置入DES支架,隨機分為4組:模型組(MG組),瑞舒伐他汀組(RG組),化痰活血解毒方低劑量組(LG組),化痰活血解毒方高劑量組(HG組)。其中化痰活血解毒方藥物組成為:瓜蔞皮15g,薤白18g,皂角刺15g,血竭2g,紅曲25g,三七5g,忍冬藤25g,以上七味中藥,其中紅曲、血竭、三七碎成細粉狀;瓜蔞、皂角刺、忍冬藤、薤白加水反復(fù)煎三次,后濃縮為浸膏,然后加入上述細粉,真空干燥,粉碎,即得中藥,經(jīng)灌胃途徑給藥。各組給予相應(yīng)藥物干預(yù)24周。2、利用ELISA法檢測不同藥物干預(yù)24周后各組血清CRP、IL-6、MMP-9的表達水平。3、運用OCT掃描成像技術(shù)觀察支架置入后支架段血管內(nèi)膜的情況:藥物干預(yù)24周后評價各組支架處血管管腔面積、新生內(nèi)膜厚度、新生內(nèi)膜面積等指標(biāo)。4、通過免疫組織化學(xué)法檢測各組血管的平滑肌肌動蛋白(a-Actin)、平滑肌骨橋蛋白(OPN)、巨噬細胞CD68的表達。結(jié)果:1、動物模型:高脂飼料喂養(yǎng)后實驗兔體重均有所增加,后期體重基本不變。腹主動脈球囊損傷后兔子共死亡4只,死亡原因考慮為應(yīng)激性損傷等。DES支架置入前行腹主動脈造影顯示血管狹窄程度約為30~80%。手術(shù)后3天內(nèi)小部分實驗兔出現(xiàn)精神淡漠,食欲不振的情況,3天后基本好轉(zhuǎn);余實驗兔術(shù)后恢復(fù)良好,正常飲食。模型組兔子在DES置入術(shù)后立即死亡1只,猜測其死亡原因可能為血管應(yīng)激性痙攣等;化痰活血解毒方低劑量組兔子死亡2只,一只DES置入后即刻死亡,另一只于術(shù)后3天內(nèi)死亡,化痰活血解毒方組死亡一只,其死亡原因為術(shù)后手術(shù)傷口持續(xù)出血,考慮因縫合包扎手術(shù)創(chuàng)口時縫合線未結(jié)扎緊密有關(guān)。余各組實驗兔狀態(tài)良好,直至實驗結(jié)束。兔腹主動脈血管造影提示血管暢通,血流正常,支架貼壁良好。藥物干預(yù)過程中各實驗兔精神狀態(tài)良好,毛發(fā)正常有光澤,進食、二便等未見明顯異常,未見明顯藥物不良反應(yīng)。2、血清炎癥因子:與MG組相比,RG組、LG組與HG組CRP、IL-6的表達水平均低于MG組(P0.05);與RG組相比,LG組血清中CRP、IL-6的表達明顯低于RG組(P0.05),HG組的表達無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與LG組相比,HG組表達水平明顯較高(P0.05)。血清中MMP9的表達水平結(jié)果顯示:與MG組相比,RG組、LG組與HG組表達水平明顯低于MG組(P0.05);與RG組相比,LG組的表達明顯低于RG組(P0.05),HG組的表達稍高于RG組,但無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與LG組相比,HG組的表達高于LG組(P0.05)。3、OCT掃描:經(jīng)定量分析后結(jié)果顯示:與MG組相比,RG組、LG組、HG組的管腔面積均比MG組均大,LG組的管腔面積明顯較大(P0.05),RG組、HG組與MG組之間差異無明顯的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);與RG組相比,LG組、HG組管腔面積無明顯差異(P0.05);與LG組相比,HG組無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與MG組相比,RG組、LG組、HG組的新生內(nèi)膜面積及新生內(nèi)膜厚度均低于MG組,其中LG組的新生內(nèi)膜面積顯著降低(P0.05);與LG組相比,RG組、HG組的新生內(nèi)膜面積無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4、免疫組化染色:各組兔腹主動脈支架段血管a-Actin免疫組化定量分析后結(jié)果顯示:與MG組相比,RG組a-Actin的陽性表達稍高于RG組,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);LG組a-Actin的陽性表達明顯高于RG組(P0.05),HG組a-Actin的陽性表達與RG組無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);LG組a-Actin的陽性表達稍高于RG組,HG組a-Actin的陽性表達稍低于RG組,但兩者與與RG組相比均無統(tǒng)計學(xué)意義;HG組與LG組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各組兔腹主動脈支架段血管OPN、CD68免疫組化定量分析后結(jié)果顯示:RG組、LG組、HG組OPN、CD68的陽性表達均顯著低于MG組,有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);LG組、HG組OPN、CD68的陽性表達與RG組相比無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);RG組與HG組相比OPN、CD68的陽性表達無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、化痰活血解毒方可降低DES置入后血清炎癥因子CRP、IL-6、MMP9的表達水平,具有抑制炎癥反應(yīng)的作用,可抑制支架內(nèi)新生動脈粥樣硬化的形成。2、化痰活血解毒方可抑制VSMC的表型轉(zhuǎn)化,抑制內(nèi)膜增殖及遷移;抑制巨噬細胞CD68的過表達,具有抗支架內(nèi)新生動脈粥樣硬化斑塊的作用。
【圖文】：

圖 1 實驗技術(shù)路線圖2.2 兔腹主動脈藥物涂層支架置入模型的制備2.2.1兔腹主動脈粥樣硬化模型首先選取健康雄性日本大耳白兔（清潔級）40 只，在本院動物房飼養(yǎng)并進行模型制備，每只兔子術(shù)前做好標(biāo)記。飼養(yǎng)環(huán)境:溫度 23 ℃ ～ 25 ℃，光照周期為12 h:12h，相對濕度為 50% ～ 60%，檢疫觀察預(yù)適應(yīng)喂養(yǎng) 1 周。腹主動脈球囊損傷術(shù)：術(shù)前 3 天各組給予實驗兔阿司匹林 25mg/d 灌胃，術(shù)前 24h 禁食。配制 10%水合氯醛 3-5ml/kg/只進行腹腔注射麻醉。麻醉成功標(biāo)志：四肢癱軟、呼吸快慢均勻、角膜反射遲鈍。將實驗兔綁置于兔臺上，用電推剪剪去右股動脈周圍體毛，剃毛直徑約 5cm，碘伏紗布自手術(shù)中心向四周消毒 3 次并鋪巾，1%利多卡因針皮下局部麻醉。手術(shù)切開右股動脈搏動處下發(fā)的皮膚，用直鉗及彎鉗縱行逐層鈍性分離右股動脈，完全暴露手術(shù)處股動脈約 2cm 長度，手術(shù)用 4#線切 2 段約 3cm,一段于股動脈遠心端打結(jié)，另一段由助手輔助提拉股動脈近心端線并將手術(shù)刀柄置于股動脈下固定。直視下以 21G 橈動脈穿刺針行股動脈穿

結(jié)果1 模型的建立DES 置入術(shù)后 5 天內(nèi)小部分實驗兔出現(xiàn)精神淡漠，食欲不振，后基本好轉(zhuǎn)；余實驗兔術(shù)后恢復(fù)良好，飲食正常。高脂飼料喂養(yǎng)后實驗兔體重均增加，后期體重增長緩慢。球囊損傷術(shù)后兔腹主動脈血管造影提示血管明顯狹窄（30%-80%）（見圖 2），8W 后于明顯狹窄處 DES 置入，在造影的透視下定位并釋放支架，造影顯示支架貼壁良好。至實驗結(jié)束，，MG 組、RG 組及 LG 組兔成功造模各 8 只，HG 組兔成功造模 7 只。藥物干預(yù)后各實驗兔精神狀態(tài)良好，毛發(fā)正常有光澤，進食、二便等未見明顯異常，未見明顯藥物不良反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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2 靳宏光;趙明;齊鋒;;丹紅注射液對冠心病患者頸動脈粥樣硬化斑塊影響的臨床觀察[J];中國實用醫(yī)藥;2013年17期

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4 金娟;劉莉;李志鴻;;丹參酮對血瘀證患者頸動脈粥樣硬化斑塊及血清超敏C反應(yīng)蛋白的影響[J];中醫(yī)藥學(xué)報;2012年03期

5 李強;凌芳;聶德云;熊濤;;大劑量阿托伐他汀對急性腦梗死患者血清細胞因子及動脈粥樣硬化斑塊的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2012年16期

6 王永剛;齊婧;鄭剛;尤金枝;周曉俊;石益;杜菊梅;;丹黃通脈膠囊治療頸動脈粥樣硬化性狹窄的臨床研究[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2012年04期

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本文編號：2702591