【摘要】：目的:研究冬凌草甲素對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制作用以及誘導(dǎo)DNA損傷的影響,探求冬凌草甲素是否能夠誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞發(fā)生自噬。方法:(1)MTT法及結(jié)晶紫法檢測(cè)冬凌草甲素對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞的增殖活性的影響。(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)冬凌草甲素對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞周期的影響。(3)吖啶橙法檢測(cè)自噬酸性囊泡。(4)Western blot檢測(cè)DNA損傷相關(guān)蛋白γH2AX(S139)、phospho-ATM(S1981)、phospho-P53(S15)、phospho-CHK2(T68)、phospho-cdc2(Y15)、phospho-cdc25c(S216)以及自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1表達(dá)量的變化。(5)細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)冬凌草甲素對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞DNA損傷相關(guān)蛋白phospho-ATM(S1981)和γ-H2AX(S139)焦點(diǎn)形成的影響。結(jié)果:(1)MTT結(jié)果顯示不同濃度冬凌草甲素對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞均有不同程度的抑制作用,其抑制作用具有濃度依賴關(guān)系.(2)結(jié)晶紫染色結(jié)果顯示隨藥物濃度增高,細(xì)胞密度逐漸減小,顯示OD值逐漸減小。(3)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示隨著藥物濃度的升高,G0/G1期細(xì)胞逐漸減少,G2/M期細(xì)胞逐漸增多,在40μM達(dá)到阻滯最高峰,表現(xiàn)為G2/M期阻滯。(4)吖啶橙檢測(cè)自噬結(jié)果顯示酸性自噬囊泡的數(shù)量呈濃度依賴性增高。(5)Western blot結(jié)果顯示DNA損傷相關(guān)蛋白γH2AX(S139)、phospho-ATM(S1981)、phospho-P53(S15)、phospho-CHK2(T68)、phospho-cdc2(Y15)、phospho-cdc25c(S216)蛋白水平呈濃度依賴性增高,自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅰ蛋白水平呈劑量依賴性減少、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白水平呈濃度依賴性增多、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比例減小;(6)免疫熒光結(jié)果發(fā)現(xiàn)phospho-ATM(S1981)、γH2AX(S139)焦點(diǎn)共定位,而且隨著藥物濃度增大而增多。結(jié)論:(1)冬凌草甲素可以抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖,通過“ATM-CHK2-Cdc2”通路誘導(dǎo)G2/M期阻滯,并且誘導(dǎo)DNA損傷,但DNA損傷信號(hào)通路具體機(jī)制有待進(jìn)一步探索。(2)此外,冬凌草甲素能夠誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞自噬,自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1水平隨藥物濃度增高而增加。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉芳;朱學(xué)慧;張慶偉;周晶;車憲平;韓瑞發(fā);;正交試驗(yàn)優(yōu)化冬凌草中冬凌草甲素的提取工藝[J];天津藥學(xué);2007年04期

2 戴一;孫隆儒;;冬凌草甲素、乙素的研究進(jìn)展[J];食品與藥品;2008年09期

3 蘇秀紅;史應(yīng)強(qiáng);董誠(chéng)明;葉海東;;冬凌草植株再生過程中冬凌草甲素的積累機(jī)制[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2011年07期

4 魯彥毫,劉國(guó)俊,李梅榮,李大超,余曉立;冬凌草葉和莖中冬凌草甲素含量的對(duì)比研究[J];藥物分析雜志;2000年06期

5 張雁冰,薛華珍,寇嫻,王桂紅;信陽冬凌草甲素和乙素β-環(huán)糊精包合物的研究[J];中藥材;2001年02期

6 張典瑞,任天池;冬凌草甲素的藥學(xué)研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2003年11期

7 杜斌;呂淑琛;張秋榮;;高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定冬凌草片中冬凌草甲素的含量[J];中國(guó)藥師;2005年11期

8 寧宇;趙培榮;連小珂;王留興;樊青霞;王瑞林;孫燕;;反相高效液相色譜法測(cè)定人體血漿中冬凌草甲素含量[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2006年03期

9 冉倩;徐進(jìn)宜;吳曉明;華維一;;冬凌草甲素的研究進(jìn)展[J];藥學(xué)與臨床研究;2007年02期

10 王傳金;魏運(yùn)洋;呂晶;杜楊艷;;制備型高效液相色譜法分離冬凌草中冬凌草甲素[J];精細(xì)化工;2007年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 崔慧芳;龔復(fù)俊;陳玲;王有為;;冬凌草甲素超臨界CO_2萃取技術(shù)研究[A];第八屆全國(guó)中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)與第五屆全國(guó)藥用植物和植物藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

2 劉穎;張萍;馮年平;張欣;許潔;;冬凌草甲素自微乳給藥系統(tǒng)的體外釋放動(dòng)力學(xué)研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第九屆制劑學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

3 江劍;劉家源;孫海波;劉溪;;冬凌草甲素抗腫瘤機(jī)制研究[A];第十屆全國(guó)藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

4 徐凱;郭劍明;張沂南;劉宇軍;徐志兵;朱延軍;王國(guó)民;;冬凌草甲素對(duì)雄激素非依賴性前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

5 郭劍明;徐凱;張沂南;劉宇軍;楊念欽;王國(guó)民;;冬凌草甲素對(duì)雄激素非依賴性前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及機(jī)制的研究[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

6 伍旭;趙烽;劉珂;關(guān)玉昆;;1-氧代冬凌草甲素衍生物的合成及抗腫瘤活性研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第26屆學(xué)術(shù)年會(huì)有機(jī)化學(xué)分會(huì)場(chǎng)論文集[C];2008年

7 曲佳;郭坤元;;冬凌草甲素誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞凋亡的研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

8 王文靜;常紅;李海斌;王磊;王彩娟;劉軍偉;張書勝;;苯丙氨酸取代杯[4]芳烴固定相在天然藥物冬凌草甲素分離分析中的應(yīng)用[A];全國(guó)生物醫(yī)藥色譜及相關(guān)技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)（2012）會(huì)議手冊(cè)[C];2012年

9 孫智平;張相年;鄧偉杰;李超;;HPLC法測(cè)定五種不同產(chǎn)地冬凌草中冬凌草甲素的含量[A];共鑄醫(yī)藥學(xué)術(shù)新文明——2012年廣東省藥師周大會(huì)論文集[C];2012年

10 李全勝;黃玉榮;劉昌孝;;冬凌草甲素在大鼠的代謝產(chǎn)物研究[A];第八次全國(guó)藥物與化學(xué)異物代謝學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前4條

1 傅俊英;冬凌草甲素可抑制肝癌細(xì)胞增殖[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 記者 胡德榮;冬凌草甲素對(duì)急性髓系白血病有潛在治療作用[N];健康報(bào);2012年

3 潘祥林;劉加軍;伍新堯等;冬凌草甲素有體外抗白血病作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

4 陳蘭;冬凌草甲素對(duì)M2型白血病療效良好[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王蘇雷;冬凌草甲素改善阿爾茨海默病模型小鼠認(rèn)知功能及機(jī)制研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

2 徐文;冬凌草甲素的微粒制劑和藥動(dòng)學(xué)研究[D];沈陽藥科大學(xué);2006年

3 崔僑;冬凌草甲素誘導(dǎo)人腫瘤細(xì)胞自噬與凋亡關(guān)系的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2007年

4 張春玲;冬凌草甲素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡的機(jī)制研究[D];沈陽藥科大學(xué);2004年

5 王傳金;冬凌草甲素長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的研究[D];南京理工大學(xué);2009年

6 任睽睽;冬凌草甲素固體脂質(zhì)納米粒的制備及其抗腫瘤作用研究[D];沈陽藥科大學(xué);2006年

7 張濤;冬凌草甲素抗乳腺癌作用及機(jī)理研究[D];吉林大學(xué);2012年

8 張軼雯;冬凌草甲素對(duì)CYP450酶的影響及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2014年

9 李進(jìn);冬凌草甲素對(duì)PC-3細(xì)胞的增殖抑制、凋亡誘導(dǎo)和轉(zhuǎn)移抑制作用及分子機(jī)制[D];中南大學(xué);2009年

10 臧凌鶴;冬凌草甲素增強(qiáng)U937細(xì)胞吞噬凋亡小體的機(jī)制研究[D];沈陽藥科大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 徐京龍;冬凌草甲素抑制食管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化的分子機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2015年

2 周澤雄;冬凌草甲素誘導(dǎo)HepG_2肝癌細(xì)胞凋亡及相關(guān)信號(hào)通路研究[D];廣東藥科大學(xué);2016年

3 周曉彤;口服冬凌草甲素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的制備及評(píng)價(jià)[D];暨南大學(xué);2016年

4 王佐;冬凌草甲素、鳳凰單樅香氣抗癌抗炎功能特性及機(jī)理研究[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 余韜;冬凌草甲素誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞DNA損傷與自噬的研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2017年

6 王興蘭;冬凌草甲素對(duì)哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2017年

7 龔素娟;冬凌草甲素的提取純化及其脂質(zhì)體制劑的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2009年

8 鄭海娜;冬凌草甲素的藥代動(dòng)力學(xué)和組織分布研究[D];河南大學(xué);2011年

9 伍旭;冬凌草甲素結(jié)構(gòu)修飾和細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià)[D];煙臺(tái)大學(xué);2009年

10 金娟;冬凌草甲素誘導(dǎo)肺癌A549細(xì)胞凋亡及機(jī)制研究[D];南華大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：2702516