【摘要】：動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是心腦血管疾病共同的病理基礎(chǔ),其發(fā)病原因復(fù)雜,主要涉及脂質(zhì)代謝紊亂、炎性細胞浸潤、氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮細胞損傷和平滑肌細胞激活等,嚴(yán)重危害人類的健康。AS是血管壁對各種損傷的一種異常反應(yīng),具有經(jīng)典炎癥變性、滲出及增生的特點,因而炎癥學(xué)說是目前被廣泛認可的發(fā)病機制之一。臨床上最常用的治療動脈粥樣硬化藥物為他汀類降脂藥,但長期使用該類藥物可能造成肝損傷。因此,從中藥、天然藥物中尋找AS治療藥物是目前的研宄熱點。中藥菝葜具有利濕去濁、祛風(fēng)除痹,解毒散瘀的功效,中醫(yī)臨床上多用于治療盆腔炎等婦科炎癥。現(xiàn)代藥理研究表明,菝葜具有抗炎、抗氧化、降血糖、降脂、抗腫瘤等作用,本實驗室前期研究亦證實菝葜黃酮及皂苷成分具有較強抗炎、抗氧化作用�；趧用}粥樣硬化的發(fā)病機制及菝葜的藥理作用,本課題組提出了“菝葜具有抗動脈粥樣硬化作用”的假說。為了驗證以上假說,本論文進行了菝葜抗動脈粥樣硬化的藥效學(xué)研究,并基于NLRP3炎癥小體信號通路對其作用機制進行了探討,同時對發(fā)揮作用的有效部位進行了初步篩選。本論文研究結(jié)果將為拓展菝葜的臨床適應(yīng)癥及開發(fā)抗AS新藥提供科學(xué)依據(jù)。本論文主要完成了以下研究工作:1.采用高脂飼料喂養(yǎng)加腹腔注射維生素D_3法建立大鼠動脈粥樣硬化模型,造模6周后給藥治療6周,對大鼠主動脈和肝臟組織進行HE染色和油紅O染色,觀察各組大鼠主動脈和肝臟的病理改變及脂質(zhì)沉積;用試劑盒檢測大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、SOD、MDA、NO、iNOS、IL-1β、IL-8、IL-10和IL-18的含量。HE染色和油紅O染色結(jié)果表明,菝葜醇提物能改善血管動脈壁的結(jié)構(gòu)紊亂和紋理不清,改善肝小葉結(jié)構(gòu)和肝細胞脂肪變性情況,減輕大鼠主動脈和肝臟組織中脂質(zhì)沉積情況,其中菝葜高劑量組作用優(yōu)于陽性組。血清指標(biāo)檢測結(jié)果顯示,與模型組相比,菝葜醇提物各劑量組均能極顯著降低IL-1β、IL-8、IL-18含量及升高IL-10含量(P0.01),體現(xiàn)出很強的抗炎作用;各劑量組能明顯降低AS大鼠血清中的TG、LDL-C、NO和iNOS含量(P0.05或P0.01),高、中劑量組可降低HDL-C、MDA含量,明顯升高SOD活力(P0.05或P0.01);菝葜醇提物對血清TC水平有降低趨勢但無顯著影響(P0.05)。研究結(jié)果顯示,菝葜通過抗炎、抗氧化、調(diào)節(jié)血脂水平及保護細胞內(nèi)皮功能多途徑抗動脈粥樣硬化。2.采用免疫組織化學(xué)法檢測大鼠主動脈和肝臟NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的表達情況;采用Western blot法檢測主動脈和肝臟組織中NLRP3、ASC、pro-Casepase-1、caspase-1、IL-1β、AIM2、IKKα、IκBα蛋白的表達。免疫組化結(jié)果顯示,菝葜醇提物能減少主動脈NLRP3、IL-1β和IL-18蛋白的表達,能減少肝臟中NLRP3、IL-1β蛋白的表達,但對IL-18的表達無明顯影響。Western blot結(jié)果顯示,菝葜醇提物能通過降低主動脈和肝臟組織的NLRP3、ASC、pro-Casepase-1、caspase-1、IL-1β和AIM2蛋白的表達量,升高IκBα蛋白的表達量來起到抗炎作用,但對IKKα的表達無明顯影響。研究結(jié)果顯示,通過抑制NLRP3信號通路可能是菝葜抗動脈粥樣硬化作用機制之一。3.氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)在動脈粥樣斑塊的發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用。本文采用Cu~(2+)體外誘導(dǎo)LDL氧化,以硫代巴比妥酸反應(yīng)物(脂類物質(zhì)氧化降解產(chǎn)物)含量為指標(biāo)評價LDL被氧化修飾的程度,篩選菝葜抗動脈粥樣硬化的有效部位。結(jié)果顯示,菝葜醇提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、石油醚部位、水部位抗LDL氧化修飾的IC_(50)值分別為43.57、29.22、22.68、293.00、487.50μg/mL,表明菝葜抗動脈粥樣硬化主要有效部位為正丁醇部位和乙酸乙酯部位,二者抗LDL氧化修飾能力與陽性抗氧劑二丁基羥基甲苯(BHT,IC_(50)為22.62μg/mL)相當(dāng)。二者能明顯延長LDL氧化反應(yīng)潛伏期和降低LDL氧化修飾程度。本研究結(jié)果為進一步探討菝葜抗動脈粥樣硬化的藥效物質(zhì)奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

圖 2-1 各組大鼠給藥過程中的體重變化 病理學(xué)觀察.1 主動脈病理學(xué)觀察采用 HE 染色觀察各組大鼠主動脈病理學(xué)改變情況，如圖 2-2 所正常組動脈壁結(jié)構(gòu)完整，紋理清晰，未見明顯異常；模型組動脈及外膜分界不清，細胞核固縮，細胞內(nèi)有多量空泡，管腔內(nèi)有疑碎片；陽性對照組動脈壁結(jié)構(gòu)較完整，，紋理尚存，細胞內(nèi)有多量菝葜低劑量組動脈壁紋理尚存，細胞質(zhì)淡染；菝葜中劑量組動脈尚存，細胞質(zhì)淡染；菝葜高劑量組動脈壁紋理清晰，未見明顯異

圖 2-1 各組大鼠給藥過程中的體重變化3.2 病理學(xué)觀察3.2.1 主動脈病理學(xué)觀察采用 HE 染色觀察各組大鼠主動脈病理學(xué)改變情況，如圖 2-2 所示其中正常組動脈壁結(jié)構(gòu)完整，紋理清晰，未見明顯異常；模型組動脈壁中膜及外膜分界不清，細胞核固縮，細胞內(nèi)有多量空泡，管腔內(nèi)有疑似血栓碎片；陽性對照組動脈壁結(jié)構(gòu)較完整，紋理尚存，細胞內(nèi)有多量空泡；菝葜低劑量組動脈壁紋理尚存，細胞質(zhì)淡染；菝葜中劑量組動脈壁紋理尚存，細胞質(zhì)淡染；菝葜高劑量組動脈壁紋理清晰，未見明顯異常
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 方鑒;;通心絡(luò)膠囊抗動脈粥樣硬化的臨床應(yīng)用[J];海峽藥學(xué);2017年06期

2 薛文雋,吳國忠;中藥抗動脈粥樣硬化的藥理學(xué)研究進展[J];上海中醫(yī)藥雜志;2003年06期

3 阮士怡;原希偃;任樹生;張伯禮;胡國強;劉云潔;趙邦愛;王銳;屈彩芹;趙亞莉;張遠;郭俊華;;“軟堅散結(jié)”中藥復(fù)方抗動脈粥樣硬化的實驗研究[J];天津中醫(yī);1988年04期

4 肖利群,章永平,徐也魯;心痛定抗動脈粥樣硬化形成作用機制的探討[J];心肺血管學(xué)報;1989年01期

5 鄭義;陳揚;商永;;高密度脂蛋白對抗動脈粥樣硬化的新靶標(biāo)[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

6 丁波;邱波;任愛玲;孫衍飛;周保坤;張鑒;;靛紅抗動脈粥樣硬化機制研究進展[J];藥學(xué)研究;2017年06期

7 朱瑩;宋志紅;;解析瑞舒伐他汀抗動脈粥樣硬化的臨床價值和藥理[J];中國實用醫(yī)藥;2014年30期

8 崔慧輝;田英;龍石銀;;二苯乙烯苷抗動脈粥樣硬化的作用和機制[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2009年20期

9 史靜艷;;瑞舒伐他汀的藥理分析及抗動脈粥樣硬化的臨床價值研究[J];中國農(nóng)村衛(wèi)生;2016年22期

10 廖喻;吳潔;李先東;蔣亞軍;;阿托伐他汀抗動脈粥樣硬化方面的研究進展[J];中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2014年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 邊云;田風(fēng)勝;;三黃片組分抗動脈粥樣硬化的相關(guān)研究[A];第九屆海峽兩岸中醫(yī)藥發(fā)展與合作研討會論文集[C];2014年

2 魏萬林;;抗動脈粥樣硬化治療進展[A];第四屆全國老年醫(yī)學(xué)進展學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

3 許艷妮;楊媛;高潔;鮑羿;王麗;徐揚;劉祺;杜郁;鄭智慧;巫曄翔;姜威;余利巖;洪斌;司書毅;;微生物來源抗動脈粥樣硬化候選藥物篩選及活性研究[A];第十二屆全國抗生素學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

4 諸駿仁;;調(diào)脂抗動脈粥樣硬化的進展[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

5 孔德新;管琳;周千翔;;丹益蓮抗動脈粥樣硬化的臨床療效[A];第三屆中國藥理學(xué)會補益藥藥理專業(yè)委員會學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

6 諸駿仁;;調(diào)脂抗動脈粥樣硬化的進展[A];中華醫(yī)學(xué)會第十一次全國心血管病學(xué)術(shù)會議專題報告匯編[C];2009年

7 劉暢;王瀟;劉鵬;馮婷婷;李永臻;許艷妮;司書毅;;化合物IMB840抗動脈粥樣硬化活性研究[A];第十二屆全國脂質(zhì)與脂蛋白學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

8 周京紅;汪海;;激活NNMR抗動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)的免疫學(xué)途徑[A];第九屆全國心血管藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

9 張倩;田風(fēng)勝;;三黃片與動脈粥樣硬化的關(guān)系研究[A];第九屆海峽兩岸中醫(yī)藥發(fā)展與合作研討會論文集[C];2014年

10 廖端芳;楊云波;袁皓瑜;李元建;;Ezetimibe抗動脈粥樣硬化的非腸道機制[A];第九屆全國心血管藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前4條

1 本報記者 慕欣;須以抗動脈粥樣硬化為核心[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2011年

2 本報記者 慕欣;高血壓抗動脈粥樣硬化治療策略：如何付諸實踐？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2011年

3 李水銀;蒲黃降血脂抗動脈粥樣硬化的機理[N];中國醫(yī)藥報;2001年

4 鄺棗園 黃衍壽 吳偉;黃芩苷抗動脈粥樣硬化有新說[N];中國醫(yī)藥報;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 甄奕;CD40LsiRNA阻斷CD40/CD40L受體配體軸抗動脈粥樣硬化的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

2 徐金瑞;黑大豆種皮花色苷抗動脈粥樣硬化及其抗氧化機制研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

3 周京紅;激活NNMR抗動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)機制的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

4 金雪婷;普羅布考通過樹突狀細胞抗動脈粥樣硬化的機制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

5 石貴軍;冠心清化散抗動脈粥樣硬化機理及對血管內(nèi)皮細胞的保護作用的實驗研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2017年

6 張躍;比較兔不同動脈間TES基因的表達及其與動脈粥樣的關(guān)系及可能的機制[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 蔣思怡;菝葜抗動脈粥樣硬化作用及機制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 黃春艷;血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑抗動脈粥樣硬化研究進展[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 曾瑜;槲皮素抗動脈粥樣硬化的作用及機制[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2013年

4 呂淑萍;IGF-1的抗動脈粥樣硬化機制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2017年

5 陶修龍;復(fù)方三七顆粒抗動脈粥樣硬化臨床研究及其相關(guān)炎性因子的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2017年

6 陳敏;姜黃屬中藥及姜黃素活血化瘀抗動脈粥樣硬化的文獻整理及實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

7 鐵春苗;依折麥布抗動脈粥樣硬化的作用及其機制研究[D];浙江大學(xué);2015年

8 鄭宗菊;普羅布考抗動脈粥樣硬化療效觀察[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

9 馬東明;一氧化氮和硫化氫在阿托伐他汀鈣抗動脈粥樣硬化中的作用[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2012年

10 張延菲;益母草堿（SCM198）抗動脈粥樣硬化活性及其作用機制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

本文編號：2700309