【摘要】：目的平臥菊三七(Gynura procumbens(Lour.))為菊科植物,具有逆轉(zhuǎn)急慢性乙醇誘發(fā)的脂肪肝的藥理活性。本文的目的是研究平臥菊三七水提取物(GPAE)對(duì)蛋氨酸和膽堿缺乏(MCD)飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的預(yù)防作用。方法采用MCD飼料喂養(yǎng)C57BL/6J小鼠六周,誘導(dǎo)NASH模型。在造模的同時(shí),模型小鼠每天灌胃GPAE(500,1000 mg/kg),正常對(duì)照組小鼠喂飼等熱量蛋氨酸和膽堿補(bǔ)充(MCS)飼料,并灌胃等體積生理鹽水。給藥6周后,使用試劑盒檢測(cè)各組小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量,肝臟甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和丙二醛(MDA)含量及氧化應(yīng)激相關(guān)酶過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、血紅素氧化酶1(HO-1)活性。細(xì)胞色素P450 2E1(CYP2E1)和細(xì)胞色素P450 4A(CYP 4A)的活性使用LC-MS/MS法檢測(cè)。采用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)肝臟脂代謝相關(guān)基因過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)、脂肪酸結(jié)合蛋白5(FABP5)、肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1a(CPT1α)、�；o酶A氧化酶(ACOX)、硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD-1)、甘油-3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶(GPAT)和微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MTTP)的mRNA表達(dá)量。Western Blotting法檢測(cè)肝臟NASH相關(guān)基因CASP8和FADD樣凋亡調(diào)節(jié)因子(CFLAR)、磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(pJNK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、紅系衍生的核因子2相關(guān)因子2(NRF2)、CYP2E1和CYP4A的蛋白表達(dá)量。結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)GPAE能夠上調(diào)CFLAR并抑制JNK的磷酸化。在脂質(zhì)代謝方面,GPAE 上調(diào)了 FABP5,CPT1α,ACOX,PPARα,SCD-1,GPAT 和 MTTP 的 mRNA 表達(dá),降低肝臟TG和TC含量。氧化應(yīng)激方面,GPAE增加了 NRF2的蛋白表達(dá)和HO-1,CAT和GSH-Px的活性,抑制CYP2E1和4A的活性和蛋白表達(dá)。在肝損傷方面,GPAE降低了血清ALT和AST水平,以及肝臟MDA的含量。結(jié)論這些結(jié)果表明,GPAE對(duì)MCD飲食誘發(fā)的小鼠的NASH具有顯著的預(yù)防作用。激活CFLAR-JNK通路是GPAE抵抗NASH的主要機(jī)制,一方面通過促進(jìn)肝臟中脂肪酸的β氧化和外排,減少肝臟脂質(zhì)的積累,另一方面通過增加肝臟中抗氧化酶(CAT,GSH-Px和HO-1)的活性,并通過激活NRF2來抑制產(chǎn)生ROS的酶(CYP2E1和CYP4A)的活性,從而減輕肝臟氧化應(yīng)激損傷。
【圖文】：

邐第２章材料與方法邐逡逑３）４％多聚甲醛溶液的配制：稱�。�§多聚甲醛固體，，加入１０0１１１１＾８５溶液，在水逡逑浴鍋中６５°Ｃ，加熱３ｈ，現(xiàn)配現(xiàn)用。逡逑４）邐０．９％生理鹽水的配制：稱�。梗纾危幔茫欤芙庠谏倭侩p蒸水中，然后定容至１Ｌ。逡逑５）ＧＰＡＥ混懸液的配制：稱�。牵校粒牛秒p蒸水配成５０ｍｇ／ｍＬ和１００ｍｇ／ｍＬ的混逡逑懸液。逡逑２．２實(shí)驗(yàn)方法逡逑２．２．１實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線逡逑

６５．２％，邋ＴＧ分別下降了２５．７％和３１．４°／。（表３．１）。逡逑ＭＣ組血清ＡＬＴ、ＡＳＴ活性顯著性高于ＮＣ組，且ＧＰＡＥ組ＡＬＴ、ＡＳＴ活性顯著低于逡逑ＭＣ組，且有劑量依賴性（表３．１）。圖３．１顯示，ＭＣ組小鼠肝臟經(jīng)ＨＥ染色和油紅Ｏ染色逡逑后
【學(xué)位授予單位】：湖北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

【共引文獻(xiàn)】

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7 陳

本文編號(hào)：2699774