【摘要】：具有官修性質(zhì)的北宋《本草圖經(jīng)》記載石斛“以廣南者為佳”,本研究在課題組前期研究基礎(chǔ)上,對(duì)“以廣南者為佳”中石斛在“廣南”產(chǎn)區(qū)的歷史分布進(jìn)行大量地方志及本草考證、實(shí)地考察,并進(jìn)一步運(yùn)用色譜分析、活性篩選、轉(zhuǎn)錄組等現(xiàn)代技術(shù)來(lái)實(shí)證廣西鐵皮石斛品質(zhì),闡明古人認(rèn)為石斛“以廣南者為佳”的緣由。目的:對(duì)石斛“以廣南者為佳”的歷史進(jìn)行考證,闡明北宋時(shí)期“廣南”是指何處,且所指為哪種石斛。進(jìn)而對(duì)廣西不同產(chǎn)地鐵皮石斛樣品的品質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià),比較其差異,同時(shí)建立其黃酮類成分HPLC特征圖譜研究,并與廣東丹霞種、福建丹霞種、云南種、浙江種鐵皮石斛黃酮特征指紋圖譜進(jìn)行比較,鑒定廣西種鐵皮石斛特異性成分,為廣西鐵皮石斛資源的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在此基礎(chǔ)上探討廣西鐵皮石斛多糖抗腫瘤、抗氧化活性,重點(diǎn)討論多糖分子量對(duì)抗腫瘤活性的影響,以期初探鐵皮石斛多糖具有抗腫瘤高活性的分子量范圍。最后利用轉(zhuǎn)錄組分析多糖相關(guān)合稱的基因。方法:1.通過(guò)對(duì)史料、主流本草及地方志對(duì)“廣南”石斛歷史分布進(jìn)行考證,并實(shí)地考察。2.采用HPLC方法對(duì)廣西不同產(chǎn)地鐵皮石斛樣品的甘露糖與葡萄糖峰面積比、甘露糖含量、多糖含量進(jìn)行比較。3.采用HPLC特征圖譜技術(shù),建立廣西不同產(chǎn)地鐵皮石斛黃酮類成分HPLC特征圖譜分析方法,采用國(guó)家藥典委員會(huì)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件(2004A版)進(jìn)行相似度分析。4.采用HPLC-MS方法鑒定廣西不同產(chǎn)地鐵皮石斛黃酮特征性成分。5.采用Fe2+-Vc-H2O2體系氧化法制備不同分子量鐵皮石斛多糖片段。6.測(cè)定對(duì)人肺癌A549、PC9、人肝癌HepG-2、人結(jié)腸癌HT-29、人宮頸癌Hela、人胃癌SGC7901等腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用,流式測(cè)定對(duì)Hela細(xì)胞凋亡率的影響,熒光定量PCR測(cè)定對(duì)Hela細(xì)胞Bax、Bcl-2 mRNA表達(dá)量的影響,在細(xì)胞水平開(kāi)展鐵皮石斛不同分子量(652.29～11.10kDa)多糖抗腫瘤活性研究。體外清除自由基的方法研究鐵皮石斛不同分子量多糖抗氧化活性的差異。7.轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析廣西桂平白石山種源鐵皮石斛多糖合成相關(guān)基因。結(jié)果:1.《本草圖經(jīng)》中“廣南”即為廣南東路、廣南西路暨當(dāng)今廣東、廣西。①?gòu)V西石斛歷史分布主要分布于廣西的東南部(容縣、桂平、梧州、賀州等地)、東北部(桂林)、西北部(百色靖西、凌云縣、德保,崇左、河池等地),其中容縣“都嶠山”、桂平“白石山”者為佳。②南北朝時(shí)期韶關(guān)已經(jīng)盛產(chǎn)石斛,至唐代,石斛的產(chǎn)地?cái)U(kuò)大至廣東省多地。在唐代和宋代,廣州、韶關(guān)、瀧州(羅定市)、春州、勤州(陽(yáng)春市)石斛作為貢品上貢,說(shuō)明了該地的石斛質(zhì)量上乘。地方志記載廣東石斛主要分布于西北部的清遠(yuǎn)市的陽(yáng)山縣、連山縣,河源市連平縣,肇慶市開(kāi)建縣;北部到東北部的韶關(guān)市始興縣、樂(lè)昌縣、乳源縣、南雄縣,梅州市、英德市;東部到東南部的潮州市、汕尾市、東莞市。③本草考證、實(shí)地考察確認(rèn)了生長(zhǎng)于始興天柱\鎩⑷菹囟堅(jiān)繳�、郭g槳資絞現(xiàn)柿考訓(xùn)氖な，

本文編號(hào)：2699719