發(fā)布時間：2020-06-04 22:48

【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)研究目的在于探討絞股藍(lán)七葉膽苷XVII(GypenosideXVII,GP-17)對皮膚光老化小鼠抗衰老作用,通過檢測GP-17對皮膚光老化小鼠血清中前列腺素2(PGE2)、環(huán)氧合酶2(COX-2)以及皮膚組織中MMP-1含量表達(dá)的影響,研究探析GP-17在紫外線照射導(dǎo)致光老化的小鼠中的抗衰老作用及氧化應(yīng)激相關(guān)機(jī)制。材料與方法:選取60只7周齡雄性昆明小鼠,隨機(jī)分為6組,每組10只,分別為空白對照組,UV模型組,GP-17高劑量組,GP-17中劑量組,GP-17低劑量組和陽性對照組即維生素E(VE)對照組。剔除小鼠背部大約為2×2cm~2左右面積的毛發(fā)將皮膚充分暴露。除空白對照組外的五組小鼠置于40W紫外線燈管(UVA+UVB)下進(jìn)行照射,第13周后小鼠出現(xiàn)慵懶、倦怠、蜷縮、皮膚粗糙并伴有豬毛征出現(xiàn)、紋理加粗加深變大、皮膚顏色開始暗紅等表現(xiàn),說明皮膚病理的改變已經(jīng)符合文獻(xiàn)記載的光老化模型的標(biāo)準(zhǔn),代表造模成功。照射時間結(jié)束,終止照射,UV累計強(qiáng)度為224.427J/cm~2。第14周開始,給予空白對照組的小鼠以及UV模型組的小鼠一定量的鹽水灌胃。GP-17高、中、低劑量組以及VE對照組采用灌胃的方式給予高中低三組劑量的絞股藍(lán)七葉膽苷,VE橄欖油。每天一次持續(xù)兩周。第16周將小鼠處死,經(jīng)腹主動脈取血,并取小鼠背部裸露部分的皮膚組織,Elisa方法檢測小鼠血清中的PGE2、COX-2含量,采用Western-Blot方法檢測小鼠皮膚組織中的MMP-1含量。結(jié)果:1.小鼠血清中PGE-2含量的表達(dá)各組血清中PGE2含量檢測顯示,與空白對照組相比,UV模型組血清中PGE2含量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);GP-17高、中、低劑量組以及VE對照組中PGE2含量與空白對照組相比有所升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)(P0.05)。與UV模型組相比較,GP-17高、中、低劑量組以及VE對照組PGE2含量較低,差異具有顯著性(P0.01)。與GP-17高劑量組相比,GP-17中、低劑量組以及VE對照組PGE2含量偏高,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)(P0.05);結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。2.小鼠血清中COX-2含量的表達(dá)各組血清中COX-2含量檢測顯示,與空白對照組相比,UV模型組血清中COX-2含量明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);與空白對照組相比較,GP-17高、中、低劑量組以及VE對照組中COX-2含量與空白對照組相比有所升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與UV模型組相比較,GP-17高、中、低劑量組以及VE對照組COX-2含量較低,差異具有顯著性(P0.01)。與GP-17高劑量組相比,GP-17中、低劑量組以及VE對照組COX-2含量偏高,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)(P0.05);結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。3.各組小鼠皮膚組織中MMP-1含量結(jié)果顯示,與空白對照組相比,UV模型組MMP-1含量有所升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);GP-17高、中、低劑量組以及VE對照組中MMP-1含量與空白對照組相比有所升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與UV模型組相比較,GP-17高、中劑量組以及VE對照組中MMP-1含量含量較低,差異具有顯著性(P0.01)。與GP-17高劑量組相比,中、低劑量組以及VE對照組MMP-1含量偏高,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)(P0.05)。結(jié)論:1.UV照射下的小鼠體內(nèi)發(fā)生氧化應(yīng)激時,可誘導(dǎo)PGE2和COX-2炎癥介質(zhì)表達(dá)增加,活化MMP-1生成,降解細(xì)胞外基質(zhì)從而引起皮膚光老化產(chǎn)生;2.皮膚光老化的小鼠體內(nèi)PGE2和以及MMP-1含量較高,GP-17通過有效降低PGE2、COX-2炎癥因子過度表達(dá)從而抑制MMP-1分泌,減輕小鼠皮膚光老化的損傷。
【圖文】：

測定安裝好以后，倒入轉(zhuǎn)移緩沖液，并將電泳儀的參數(shù)設(shè)壓狀態(tài)下轉(zhuǎn)移。后取出PVDF膜，并在膜的右上角剪角作為標(biāo)記，用TBS百分之五濃度的 BSA 溶液中，放置在水平搖床上，室濃度的 BSA 封閉液進(jìn)行稀釋，稀釋度的比例為 1:100鋪平放在干凈的塑料薄膜上，之后再在 PVDF 膜上層再機(jī)圍繞著 PVDF 膜封閉三條邊，，隨后將一抗的工作液從后，把最后一側(cè)也封閉上，平放在 4℃的冰箱里，孵育濃度的 BSA 封閉液進(jìn)行稀釋，稀釋度的比例為 1:100

注：1.空白對照組 2.UV 模型組 3.GP-17 高劑量組4.GP-17 中劑量組 5.GP-17 低劑量組 6.VE 對照組圖 3 各組小鼠皮膚組織中 MMP-1 的含量比較示意圖
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2697084