【摘要】：目的:1.研究加味七方胃痛顆粒含藥血清對(duì)胃癌AGS細(xì)胞增殖的影響。2.探討加味七方胃痛顆粒含藥血清干預(yù)胃癌AGS細(xì)胞后miRNA表達(dá)及初步作用分析。方法:1.體外培養(yǎng)胃癌AGS細(xì)胞。2.將加味七方胃痛顆粒對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃5天,提取含藥血清,以及健康大鼠血清。3.實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組(動(dòng)物血清組)及藥物血清干預(yù)組:空白對(duì)照組不加任何處理;陰性對(duì)照組加動(dòng)物血清;藥物血清干預(yù)組分成5個(gè)濃度梯度,分別加入終濃度為2.5%、5%、10%、15%、20%的藥物血清。在培養(yǎng)箱里分別培養(yǎng)24h、48h、72h。采用cck8法檢測(cè)不同濃度的含藥血清對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖影響。4.空白組:胃癌AGS細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。陰性對(duì)照組:胃癌AGS細(xì)胞,加入與藥物觀察組相同劑量的正常大鼠血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組:胃癌AGS細(xì)胞,加味七方胃痛顆粒含藥血清進(jìn)行干預(yù),干預(yù)72小時(shí)后,提取總RNA并進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控,然后構(gòu)建文庫,進(jìn)行高通量測(cè)序,對(duì)miRNA表達(dá)差異譜進(jìn)行分析。結(jié)果:1.加味七方胃痛顆粒含藥血清干預(yù)AGS細(xì)胞24h、48h、72h后,各濃度組對(duì)AGS的增殖均有抑制作用,與陰性對(duì)照組對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并呈時(shí)間及濃度依賴性。2.經(jīng)加味七方胃痛顆粒干預(yù)后胃癌AGS細(xì)胞后,22個(gè)miRNA出現(xiàn)上調(diào),23個(gè)miRNA出現(xiàn)下調(diào);22個(gè)上調(diào)的miRNA為:miR-14-5p、miR-3145-5p、miR-509-3p、let-7c-5p、miR-411-5p、miR-99a-5p、miR-1286、miR-135a-5p、miR-3620-3p、miR-1-3p、miR-513a-5p、miR-378f、miR-3138、miR-3180、miR-3180-3p、miR-379-5p、miR-654-5p、miR-6747-3p、miR-1185-1-3p、miR-4640-3p、miR-144-3p、miR-3688-3p;23個(gè)下調(diào)miRNA為:miR-1261、miR-497-5p、miR-512-3p、miR-525-5p、miR-548az-5p、miR-6735-5p、miR-675-3p、miR-219b-3p、miR-2277-3p、miR-1180-5p、miR-125b-1-3p、miR-4449、miR-4523、miR-675-5p、miR-4466、miR-515-5p、miR-1323、miR-569、miR-1283、miR-4802-3p、miR-510-5p、miR-3158-5p、miR-7114-5p。結(jié)論:1.加味七方胃痛顆粒含藥血清對(duì)胃癌AGS細(xì)胞的增殖有抑制作用,與時(shí)間和濃度具有依賴性。2.經(jīng)加味七方胃痛顆粒干預(yù)胃癌AGS細(xì)胞后miRNA出現(xiàn)了差異性的表達(dá),可能通過引起miR-144-3p、miR-99a-5p等差異性表達(dá),抑制胃癌細(xì)胞的增殖。
【學(xué)位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285

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本文編號(hào)：2697028