【摘要】：目的:通過紅芪總黃酮干預(yù)白血病細(xì)胞,研究其對(duì)白血病干細(xì)胞的分化及增殖作用,以c-fos基因?yàn)殛P(guān)鍵,與MPKA,PKA信號(hào)通路進(jìn)行對(duì)比,闡明紅芪總黃酮通過c-fos通路介導(dǎo)白血病細(xì)胞的清晰調(diào)控脈絡(luò),進(jìn)而為預(yù)防及治療白血病提供新思路與理論基礎(chǔ)。方法:不同劑量濃度紅芪總黃酮干預(yù)人白血病干細(xì)胞,選用MTT法對(duì)紅芪總黃酮對(duì)白血病干細(xì)胞增殖的抑制作用進(jìn)行檢測(cè),運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)監(jiān)測(cè)紅芪總黃酮對(duì)細(xì)胞凋亡的作用進(jìn)行分析,同時(shí)使用Western Blot和qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)c-fos基因在蛋白與基因水平上的表達(dá),與MPKA,PKA信號(hào)通路進(jìn)行對(duì)比,分析其差異。結(jié)果:紅芪總黃酮在一定的劑量濃度范圍內(nèi)具有抑制K562細(xì)胞增殖的效果,同時(shí)紅芪總黃酮能夠阻滯人白血病細(xì)胞周期G0/G1、G2/M期,但其紅芪總黃酮的促凋亡作用不敏顯。紅芪總黃酮通過促進(jìn)c-fos基因的表達(dá),促進(jìn)K562細(xì)胞的分化。結(jié)論:紅芪總黃酮通過c-fos通路介導(dǎo),抑制白血病干細(xì)胞G0/G1期DNA合成,從而抑制白血病細(xì)胞的增殖,并且其抑制作用呈現(xiàn)量效關(guān)系。
【圖文】：

圖 1 MTT 法檢測(cè)紅芪總黃酮對(duì) K562 細(xì)胞增殖行為的影響由表 1 結(jié)果顯示，當(dāng)紅芪總黃酮干預(yù) K562 細(xì)胞時(shí)間為 24h 時(shí)，各劑量濃度的酮干預(yù)組檢測(cè)結(jié)果與空白對(duì)照組的結(jié)果相比較，發(fā)現(xiàn)其吸光度數(shù)值無明顯差異組數(shù)據(jù)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，進(jìn)行排除。而當(dāng)紅芪總黃酮干預(yù) K562 細(xì)胞時(shí)間為 48h 時(shí)，各劑量濃度的紅芪總黃酮干預(yù)空白對(duì)照組的檢測(cè)結(jié)果相比，其吸光度數(shù)值呈現(xiàn)明顯差異，表明該數(shù)據(jù)具有統(tǒng)，同時(shí)其數(shù)據(jù)顯示隨著紅芪總黃酮的劑量濃度不斷提高，紅芪總黃酮干預(yù) K56增殖抑制能力越強(qiáng)，表明紅芪總黃酮的干預(yù)呈現(xiàn)量效關(guān)系。通過進(jìn)行組間比較現(xiàn) 20μg/mL 分別與 60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL 的紅芪總黃酮干預(yù)組具顯示 20μg/mL 劑量濃度的紅芪總黃酮干預(yù)組與其余紅芪總黃酮?jiǎng)┝繚舛雀深A(yù)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，是證明紅芪總黃酮具有量效關(guān)系的有力證據(jù)。紅芪總黃酮干預(yù) K562 細(xì)胞時(shí)間為 72h 時(shí)，我們發(fā)現(xiàn) 20μg/mL 的 MTT 檢測(cè)結(jié)

圖 2 流式細(xì)胞儀測(cè)定不同濃度紅芪總黃酮對(duì) K562 細(xì)胞的凋亡圖（A：空白對(duì)照組，B 40μg/ml 紅芪總黃酮，C 80μg/ml 紅芪總黃酮μg/ml 紅芪總黃酮，E 60μg/ml 紅芪總黃酮，，F(xiàn) 1000μg/ml 紅芪總黃細(xì)胞技術(shù)的分析結(jié)果顯示，當(dāng)紅芪總黃酮干預(yù) K562 細(xì)胞時(shí)間照組的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，我們發(fā)現(xiàn) K562 細(xì)胞的細(xì)胞周期中止于是 G2/M 期的生長細(xì)胞周期阻滯特別顯著。我們經(jīng)過對(duì)比紅照組的流式細(xì)胞技術(shù)分析結(jié)果顯示，80μg/mL與 100μg/mL的紅0/G1 期的阻滯具有顯著效果，同時(shí) 20μg/ml、40μg/ml、60μg/m總黃酮對(duì)細(xì)胞生長的 G2/M 期具有較顯著的阻滯作用，并且周期的阻滯作用具有量效關(guān)系。對(duì)比與分析各劑量濃度的紅芪總黃酮干預(yù)組的流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)紅芪總黃酮對(duì) K562 細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用基本數(shù)據(jù)，認(rèn)為紅芪總黃酮有可能不具有促進(jìn) K562 細(xì)胞凋亡的作
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2686544