【摘要】：目的:研究有效成分偽原薯蕷皂苷(PPD)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥介質(zhì)及相關(guān)信號通路的影響。方法:(1)使用PPD前采用HPLC檢測其純度;(2)體外培養(yǎng)Raw264.7巨噬細(xì)胞,加入不同濃度的PPD,采用SRB比色法確定無細(xì)胞毒性的最適使用劑量;(3)采用qPCR、western blot觀察PPD對LPS誘導(dǎo)Raw264.7巨噬細(xì)胞IL-1β表達(dá)及相關(guān)信號通路TLR2/MAPK/NF-кB、NLRP3/caspase-1的影響;(4)采用qPCR、western blot、ELISA觀察PPD對LPS誘導(dǎo)Raw264.7巨噬細(xì)胞AA代謝通路的影響。結(jié)果:(1)HPLC分析PPD的純度為96.15%,可用于處理細(xì)胞;(2)SRB分析確定PPD的無細(xì)胞毒性劑量范圍大約為15-30μg/mL;(3)用PPD預(yù)處理Raw264.7巨噬細(xì)胞,可劑量依賴地抑制LPS誘導(dǎo)的IL-1β表達(dá)(P0.01或P0.05),也顯著抑制了調(diào)控IL-1β表達(dá)的上游通路MAPK/NF-кB活性(P0.01或P0.05),以及NLRP3/caspase-1的表達(dá)(P0.01或P0.05),對TLR2mRNA的表達(dá)無影響;(4)此外,在AA代謝通路中,PPD劑量依賴地抑制LPS誘導(dǎo)的LTB_4、PGE_2的表達(dá),也顯著下調(diào)COX-2 mRNA表達(dá)(P0.01或P0.05),對PLA_2 mRNA表達(dá)無影響(P0.01或P0.05)。結(jié)論:偽原薯蕷皂苷通過抑制炎癥介質(zhì)IL-1β、LTB_4、PGE_2表達(dá)而發(fā)揮抗炎活性,其作用機(jī)制與抑制MAPK/NF-кB、NLRP3/caspase-1和AA代謝通路有關(guān)。
【圖文】：

技術(shù)路線圖

PPD化學(xué)結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 張曉音;吳e，

本文編號：2683601