【摘要】：本論文以懷牛膝(Achyranthes bidentata Blume)和巴戟天(Morinda officinalis How)兩種補(bǔ)腎壯骨類中藥為研究對象,對分離純化所得的均一糖聚物進(jìn)行一級結(jié)構(gòu)研究,初步考察其高級結(jié)構(gòu),并對其抗骨質(zhì)疏松活性進(jìn)行系統(tǒng)的評價。通過水提醇沉法結(jié)合堿提醇沉法得到懷牛膝和巴戟天的3種粗糖聚物。依次利用離子交換柱層析和凝膠柱層析對粗糖聚物進(jìn)行分離純化,并結(jié)合各種波譜分析手段和一系列的化學(xué)方法對純化所得的均一糖聚物進(jìn)行一級結(jié)構(gòu)解析。此外,利用糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的斑馬魚骨質(zhì)疏松模型對精糖聚物進(jìn)行抗骨質(zhì)疏松活性評價。聯(lián)合使用離子交換色譜柱DEAE-52和凝膠色譜柱Sephacryl S-100對粗糖聚物ABPB、MO50、MOPB進(jìn)行系統(tǒng)的分離純化,最終得到6個精糖聚物,分別為ABPB-1、ABPB-2、ABPB-3、MOW50-1、MOP50-2、MOPB-2。比旋光度法和高效凝膠滲透色譜(HPGPC)結(jié)果顯示6個糖聚物均為均一糖聚物,其分子量分別為2319 Da、25680Da、77231 Da、1810 Da、2503 Da、94994 Da。通過完全酸水解,結(jié)合高效液相色譜(HPLC)和離子色譜對6個均一糖聚物進(jìn)行單糖組成分析,綜合單糖組成、紅外光譜、GC-MS、NMR分析結(jié)果對6個均一糖聚物進(jìn)行一級結(jié)構(gòu)鑒定,結(jié)果表明MOW50-1和MOP50-2均為菊淀粉型果聚糖,而ABPB-1為混合型果聚糖。ABPB-2、ABPB-3和MOPB-2均為酸性雜多糖。通過剛果紅實驗、圓二色譜、掃描電鏡分別對6個均一糖聚物的高級結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步考察,結(jié)果顯示6個均一糖聚物均不存在三股螺旋結(jié)構(gòu),且在掃描電鏡觀察下呈現(xiàn)不同的形態(tài),這可能與其分子量、單糖組成等基本結(jié)構(gòu)特征的不同有關(guān)。目前,國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)中均未見此6個均一糖聚物的結(jié)構(gòu)報道。利用糖皮質(zhì)激素潑尼松龍對受精后3天(3-dpf)的斑馬魚幼魚進(jìn)行誘導(dǎo),成功建立斑馬魚骨質(zhì)疏松模型。以斑馬魚幼魚頭部骨骼的相對熒光強(qiáng)度為檢測指標(biāo),對ABPB-3和ABW50-1的抗骨質(zhì)疏松活性進(jìn)行系統(tǒng)的評價。結(jié)果顯示懷牛膝精糖聚物ABW50-1和ABPB-3均能顯著提高模型斑馬魚幼魚頭骨的相對熒光強(qiáng)度,活性具有濃度依賴性,且未顯示出毒性,說明ABPB-3及ABW50-1對糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥具有良好的治療效果。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284;R285

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2678203