發(fā)布時間：2020-05-23 23:52

【摘要】：目的:探討蟾蜍他靈對急性髓細胞白血病HL-60細胞株的增殖和凋亡作用的影響,從而為蟾蜍他靈治療急性髓細胞白血病提供理論依據(jù)。方法:采用不同濃度的蟾蜍他靈作用于急性髓系白血病細胞HL-60;(1)細胞增殖測定:應用臺盼藍染色實驗對應用蟾蜍他靈的HL-60細胞進行染色,進行細胞計數(shù),計算細胞增殖抑制劑細胞活力,繪制增殖抑制曲線;應用MTT法檢測細胞活力及抑制率,并繪制曲線;應用流式細胞儀檢測細胞內(nèi)DNA含量及細胞周期,對蟾蜍他靈作用后細胞內(nèi)DNA含量及周期進行檢測。(2)細胞凋亡測定:應用Hochest33258/PI染色法對不同濃度蟾蜍他靈作用后細胞雙染后于熒光顯微鏡下對細胞形態(tài)及數(shù)量進行觀察;應用Annexin V-FITC/PI雙標記法對HL-60細胞進行雙染,應用流式細胞儀檢測細胞凋亡百分率,對蟾蜍他靈作用于HL-60細胞后對細胞增殖及凋亡進行檢測。結(jié)果:1.蟾蜍他靈能夠有效地抑制HL-60細胞的增殖,并呈藥物濃度依賴性,通過計算其IC50為6.627μg/ml,且可以阻滯細胞在G0/G1期,從而抑制細胞增殖、誘導凋亡。2.通過用Hoechst33258/PI雙染實驗和Annexin V-FITC/PI雙標記法實驗提示蟾蜍他靈能誘導急性髓系白血病HL-60細胞凋亡;3.蟾蜍他靈1.25μg/ml的藥物濃度即可出現(xiàn)細胞凋亡,在蟾蜍他靈濃度為5.0μg/ml~10.0μg/ml可以達到較好的誘導凋亡作用,與第一部分實驗對細胞增殖抑制測定所得到的實驗結(jié)果相一致。結(jié)論:1.本實驗通過對細胞增殖能力的檢測,應用臺盼藍拒染實驗、MTT實驗以及流式細胞儀檢測細胞內(nèi)DNA含量及細胞周期實驗方法,揭示蟾蜍他靈對急性髓系白血病HL-60細胞具有抑制增殖作用,且呈現(xiàn)出藥物濃度依賴性;2.通過細胞凋亡測定實驗,得出蟾蜍他靈可以通過抑制HL-60細胞增殖活力,誘導細胞凋亡的結(jié)論,且其誘導HL-60細胞凋亡的作用受藥物濃度的影響,1.25μg/ml的藥物濃度即可出現(xiàn)細胞凋亡,在蟾蜍他靈濃度為5.0μg/ml-10.0μg/ml可以達到較好的誘導凋亡作用;3.蟾蜍他靈具有抑制急性髓系白血病HL-60細胞株增殖和誘導凋亡的作用;4.本研究已明確蟾蜍他靈對HL-60細胞具有抑制增殖和誘導凋亡的作用,但對其具體作用機制還尚未明確,有待進一步研究。
【圖文】：

陜西中醫(yī)藥大學 2017 屆碩士學位論文27.24%，24.48%，15.86%，13.79%，見圖 1。結(jié)果顯示蟾蜍他靈濃度增高，隨之活胞數(shù)逐漸減少，表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。而在濃度區(qū)間為 5μg/ml~10μg/ml 蟾蜍他的細胞生長抑制率在與 DMSO 對照組對比后發(fā)現(xiàn)均有顯著性差異。

圖2：臺盼藍實驗結(jié)果繪制出細胞活力及增殖抑制曲線
【學位授予單位】：陜西中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285

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本文編號：2678142